Вопросы вирусологии

Семейство Orthomyxoviridae состоит из 9 родов, включая Alphainfluenza viruses, куда входят вирусы гриппа птиц. У двух субтипов ‒ Н5 и Н7 ‒ помимо обычных низковирулентных штаммов описана особая разновидность высоковирулентного вируса птиц, способного вызывать заболеваемость у птиц с летальностью выше 60%. Эти и ряд других разновидностей вируса гриппа, тесно связанных с птицами, принято обозначать термином «птичий вирус гриппа». Различие высоко- (HPAI) и низковирулентных (LPAI) вирусов гриппа обусловлено структурой аргининсодержащего сайта протеолитической активации в белке НА. Вирус высоковирулентного птичьего гриппа Н5 выявлен около 100 лет назад и на протяжении этого времени вызывает эпизоотии среди диких и домашних птиц, и лишь несколько локальных эпизодов болезни зарегистрированы среди людей с начала XXI в. В последние годы зафиксирован резкий подъем заболеваемости птиц высоковирулентным вирусом Н5N1 (клайд h2.3.4.4b) на всех континентах планеты, сопровождающийся переходом вируса на разные виды млекопитающих. Регистрируемая глобальная смертность среди домашних и сельскохозяйственных птиц от данного субтипа приближается к уровню 1 млрд особей. Опасным эпидемическим фактором становятся участившиеся вспышки птичьего гриппа с высокой летальностью среди млекопитающих, в частности морских львов и тюленей в Северной и Южной Америке, норок и пушных зверей в Испании и Финляндии, домашних и уличных кошек в Польше. Изолированные от млекопитающих штаммы птичьего гриппа H5N1 клайда h2.3.4.4b имеют признаки частичной адаптации к организму человека в генах РВ2, NP, HA, NA, играющих главную роль в регуляции аэрозольной трансмиссии и круга хозяев вируса. Создавшаяся ситуация представляет реальную угрозу предадаптации вируса в организме млекопитающих как промежуточных хозяев с последующим переходом предадаптированного вируса в популяцию людей и формированием пандемии с катастрофическими последствиями.

Введение. При возникновении нового заболевания одним из наиболее доступных средств с установленной и доказанной терапевтической эффективностью в первую очередь являются препараты, содержащие специфические антитела к данному инфекционному агенту. Введение таких препаратов направлено на снижение количества возбудителя в макроорганизме и, как следствие, уменьшение тяжести симптомов заболевания либо выздоровление.

Целью настоящего обзора является анализ опыта использования иммуноглобулинов и моноклональных антител при лечении больных COVID-19 в ходе пандемии.

Результаты и заключение. Двумя основными группами медицинских средств защиты, блокирующих проникновение вируса SARS-CoV-2 в пермиссивные клетки, являются препараты, получаемые из плазмы крови реконвалесцентов (иммуноглобулин), и человеческие моноклональные антитела. В первой группе препаратов при лечении больных COVID-19 ведущее место занимает плазма крови реконвалесцентов. Данный препарат с успехом может быть использован для проведения экстренной профилактики на ранних стадиях заболевания. Основным недостатком терапии при использовании плазмы крови реконвалесцентов является трудность стандартизации ввиду значительного варьирования содержания специфических антител у доноров. Другим недостатком терапии при использовании препаратов первой группы являются нежелательные побочные реакции у реципиентов, возникающие при их введении. Альтернативным подходом при проведении терапии COVID-19 является использование гуманизированных и генно-инженерных человеческих моноклональных антител против определенных эпитопов вируса SARS-CoV-2, в частности, рецептор-связывающего домена S-белка, способных предотвратить проникновение вируса в пермиссивные клетки и прервать развитие манифестной инфекции. Преимуществами данных препаратов является их безопасность, высокая специфическая активность, возможность стандартизации, однако сложность их производства и высокая стоимость делают их малодоступными для массового использования в практической медицине.

Введение. Инфекция HTLV-1 сохраняется в течение всей жизни человека, обусловливая бессимптомное вирусное носительство у большинства пациентов и обеспечивая цепь передачи. Однако примерно у 4% инфицированных развивается Т-клеточная лейкемия/лимфома взрослых (ATLL). HTLV-1 – это онкоретровирус, который трансформирует CD4⁺-Т-лимфоциты и дерегулирует лимфопролиферативные пути, что способствует развитию ATLL. Для достижения трансформации клеток большинство онкогенных ретровирусов используют трансдукцию с захватом протоонкогенов, при этом провирусная интеграция нарушает экспрессию опухолевых супрессоров или протоонкогенов.

Цель исследования. Мы провели исследование по определению распространенности HTLV-1-инфекции среди доноров крови с целью расширения базы данных HTLV-1, оценки риска передачи вируса через компоненты крови, а также оценки риска персистенции инфекции или развития неопластических заболеваний у носителей HTLV-1.

Материалы и методы. Настоящая научная работа – перекрестное исследование доноров крови всех категорий. В исследовании участвовали 265 доноров крови из Национального центра переливания крови в Браззавиле. После тестирования на антитела к HTLV-1 методом ИФА во всех положительных в ИФА-образцах проводили определение провирусной ДНК методом «вложенной» ПЦР, а затем методом количественной ОТ-ПЦР с использованием специфических праймеров p53 и c-myc оценивали экспрессию генов.

Результаты. Из 265 доноров 20 человек были положительны по анти-HTLV-1-антителам, у 5 доноров была выявлена провирусная ДНК. Распространенность HTLV-1 составила 1,8%. Все HTLV-1-инфицированные доноры были мужчинами (1,8%), с положительной корреляцией между наличием инфекции и мужским полом (p = 0,05); 1,1% положительных доноров были регулярными, большинство в возрасте от 31 до 45 лет (1,5%), и наиболее часто встречались доноры-совместители (1,1%). Во всех образцах наблюдалась нормальная экспрессия генов p53 и c-myc.

Заключение. Распространенность HTLV-1, хотя и низкая, остается значительной проблемой. У HTLV-1-инфицированных доноров не было обнаружено аномальной экспрессии генов p53 или c-myc, что может означать, что ни один из Т-лимфоцитов доноров не был трансформирован HTLV-1.

Введение. Инфекции, переносимые иксодовыми клещами, являются значимой проблемой для многих регионов России, в том числе и для Восточной Сибири. Неблагополучная эпидемиологическая ситуация может характеризоваться не только ростом встречаемости уже известных «клещевых» инфекций, но и выявлением новых нозологических форм и возбудителей, роль которых остается малоизученной или вообще неизученной. Сегментированные флавиподобные вирусы могут быть причиной инфекционных заболеваний человека и создавать угрозу для здоровья населения.

Цель работы ‒ поиск и молекулярно-генетическая характеристика изолятов вируса Алонгшан (Flaviviridae: Alongshan virus, ALSV), переносимого клещами на юге Восточной Сибири.

Материалы и методы. Было собрано и исследовано 1060 клещей, отловленных на территории Республик Хакасия, Тыва, Бурятия, Иркутской области и Забайкальского краяв весенне-летний период 2023 г. Детекцию РНК ALSV выполняли с помощью метода полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией с последующим определением нуклеотидной последовательности и проведением филогенетического анализа для каждого из 4 сегментов генома.

Результаты. Инфицированность ALSV клещей Ixodes persulcatus, собранных в Республике Хакасия, составила 3,3% (95% ДИ 1,4–7,5), в Иркутской области – 1% (95% ДИ 0,3–3,7), в Республике Тыва – 0,9% (95% ДИ 0,3–3,4), в Забайкальском крае – 0,7% (95% ДИ 0,2–3,6). Генетические варианты ALSV, циркулирующие в клещах I. persulcatus на территории юга Восточной Сибири, по всем 4 сегментам группируются с последовательностями, обнаруженными в Китае, и кластеризуются в азиатскую подгруппу, переносимую таежным клещом. Уровень различия нуклеотидных последовательностей фрагментов генома среди выявленных генетических вариантов ALSV составил от 2 до 3%.

Заключение. Показано широкое распространение ALSV в клещах I. persulcatus на территории республик Хакасия и Тыва, Иркутской области и Забайкальского края. Эти данные актуализируют мониторинг за изменением ареала распространения флавиподобных вирусов, потенциально опасных для человека, и их переносчиков.

Введение. Пандемия COVID-19, вызванная коронавирусом SARS-CoV-2, породила серьезные проблемы в здравоохранении по всему миру. Ученым в кратчайшие сроки пришлось решать задачи по разработке методов лечения и профилактики этого заболевания. Наиболее эффективным способом прерывания развивающихся новых эпидемических вспышек является вакцинация. Одним из современных и эффективных подходов при разработке вакцин является использование вирусоподобных частиц (Virus like particles, VLP).

Цель исследования – разработать технологию получения VLP на основе рекомбинантных белков SARS-CoV-2 (E, M, N и S), продуцируемых в клетках насекомых, и дать их комплексную характеристику.

Материалы и методы. Источником вирусных белков послужили синтетические гены, кодирующие белки коронавируса E, M, N и S. Были разработаны VLP с разными поверхностными S-белками 4 штаммов коронавируса: подобный вирусу Ухань, Delta, Alpha и Omicron, клонированные в плазмиду pFastBac. Белки были синтезированы в бакуловирусной системе экспрессии и собраны в VLP в перевиваемой линии клеток Trichoplusia ni (T.ni). Синтез генов, клонирование в трансферные плазмиды и получение рекомбинантных бакуловирусов проводили стандартными методами. Наличие вставки в геноме бакуловируса определяли методом полимеразной цепной реакции. Для исследования антигенной активности VLP применяли иммуноферментный анализ, иммуноблоттинг. Очистку VLP проводили ультрацентрифугированием через 20% сахарозу. Оценку морфологии выполняли с помощью электронной микроскопии и методом динамического светорассеяния.

Результаты. Получены и охарактеризованы VLP, состоящие из рекомбинантных белков S, M, E и N, на основе консенсусных последовательностей, циркулирующих в мире геновариантов SARS-CoV-2. Показана специфичность антигенных детерминант синтезированных VLP антителам, формирующимся к белкам SARS-CoV-2, изучены иммуногенные свойства VLP.

Заключение. Разработаны способы получения и очистки VLP с универсальным набором поверхностных антигенов, способных к самосборке и индуцирующих специфический иммунитет против SARS-CoV-2.

Введение. Вирус простого герпеса 1-го типа (ВПГ-1) – один из самых распространенных вирусных агентов, инфицирующих человека, имеет геном с двухцепочечной ДНК и относится к семейству Herpesviridae. Курение – одна из основных причин заболеваний и преждевременной смерти во всем мире, от которой ежегодно умирает до 6 млн человек.

Цель настоящего исследования – определение серопревалентности ВПГ-1 среди курильщиков.

Методы. Исследование проводили в период с декабря 2022 г. по январь 2023 г. В исследование была включена случайная выборка из 94 (88 мужчин и 6 женщин) здоровых лиц в возрасте от 20 до 60 лет, 50 участников составили контрольную группу. Серологическое тестирование на ВПГ заключалось в выявлении антител к ВПГ-1 класса IgG с помощью ИФА.

Результаты. Большинство участников были студентами университета – 45,7% мужчин и 5,3% женщин, за ними следовали работающие курильщики – 0,2% мужчин и 1,1% женщин. Число женщин было значительно меньше, чем мужчин, и составило 6,4 и 93,6% соответственно, что объясняется обычаями и традициями. Серопревалентность составила 24,47, 22,3 и 2,1% среди мужчин и женщин соответственно. Уровень серопревалентности составил 13,8% среди курильщиков кальяна и сигарет, 9% исключительно среди курильщиков сигарет и 1,1% исключительно среди курильщиков кальяна. Наибольший уровень выявляемости антител наблюдался в возрастных группах 21–30 и 31–40 лет – 12,80 и 7,40% соответственно.

Заключение. Исследование показало, что серопревалентность ВПГ-1 IgG составила 24,47% и была выше среди курильщиков кальяна и сигарет по сравнению с теми, кто курил исключительно сигареты или кальян.