Prevalence and genetic diversity of the Alongshan virus (Flaviviridae) circulating in ticks in the south of Eastern Siberia

Full Text

Введение

Флавивирусы, переносимые клещами, широко распространены по всему миру и представляют серьезную медицинскую проблему, вызывая значительное количество инфекционных заболеваний среди людей [1]. Среди флавивирусов, переносчикам которых являются клещи, на территории России встречаются вирус Повассан, вирус омской геморрагической лихорадки, вирус шотландского энцефаломиелита овец (Louping ill virus) и вирус клещевого энцефалита [2–4]. Несмотря на достаточно большое видовое разнообразие, геном всех флавивирусов имеет типичное строение и представляет собой несегментированную оц(+)РНК длиной около 11 kb, кодирующую одну протяженную открытую рамку считывания, по краям которой находятся 5’- и 3’-нетранслируемые области [5]. Однако за последнее десятилетие были выделены флавиподобные вирусы, которые отличаются от «классических» флавивирусов принципиально другим строением генома и представляют собой обособленную группу в семействе Flaviviridae. Такие вирусы обладают сегментированным одноцепочечным РНК-геномом положительной полярности, в структуре которого имеется гомология с РНК-зависимой РНК-полимеразой (NS5) и хеликазой (NS3) «классических» флавивирусов. В эту группу входят вирус Алонгшан (Alongshan virus, ALSV), вирус Джингмен (Jingmen tick virus), вирус Янггоу (Yanggou tick virus) и другие вирусы группы Jingmenvirus.

Геномы многокомпонентных флавиподобных вирусов включают от 4 (характерно для большинства вирусов, изолированных из клещей, летучих мышей, обезьян и человека) до 5 (встречается у вирусов, выделенных из комаров) сегментов [6]. Сегмент 1 кодирует неструктурный белок NS5-like, имеющий гомологию с белком NS5 (РНК-зависимая РНК-полимераза) классических флавивирусов. Сегмент 3 кодирует неструктурный белок, имеющий высокую степень гомологии с флавивирусным белком NS3. Белок NS3, наряду с NS5, играет центральную роль в репликации вируса и является одним из наиболее изученных неструктурных белков. N-концевой домен NS3 обладает протеазной активностью, а C-концевой домен выполняет функцию хеликазы. Протеиназная активность необходима для процессинга полипротеина, хеликазный домен участвует в кэппировании и синтезе вирусной РНК. На сегодняшний день хорошо изучена структура белка NS3 у большинства несегментированных флавивирусов и показана высокая гомология не только в строении, но также в механизмах гидролиза АТФ, распознавания и раскручивания РНК [7]. Структурные белки VP1, VP2 VP3 закодированы в сегментах 2 и 4 и не имеют известных гомологов как среди семейства Flaviviridae, так и среди других известных на сегодняшний день вирусов. Сегмент 2 у ALSV кодирует предполагаемые гликопротеины VP1a и VP1b, а также маленький белок с тремя трансмембранными доменами, функция которого не известна. Белки VP2 (предполагаемый капсидный белок) и VP3 (предполагаемый вирусный мембранный белок) закодированы в сегменте 4 и имеют частично перекрывающиеся рамки трансляции.

Благодаря достижениям в области высокопроизводительного секвенирования и вирусной метагеномики варианты флавиподобных вирусов были обнаружены в различных образцах на территории 4 континентов: в Азии (Китай, Лаос, Япония, Турция), Европе (Финляндия, Италия, Косово, Румыния, Россия), Южной Америке (Бразилии, Тринидад и Тобаго, Колумбия) и Африке (Уганда, Кения и Гвинея) (табл. 1). На территории России также показано широкое распространение сегментированных флавиподобных вирусов (ALSV и вирус Янггоу). Так, генетический материал ALSV был обнаружен в образцах голодных клещей I. persulcatus, I. ricinus, Dermacentor reticulatus и D. nuttalli, собранных в Калининградской, Ульяновской, Челябинской областях, а также в республиках Карелия, Татарстан, Горный Алтай и Тыва [8–10].

 

Таблица 1. Распространение ALSV в мире

Table 1. Distribution of ALSV in the world

Вид хозяина Host species	Страна Country	Номер последовательности в GenBank GenBank accession number	Ссылка Reference
I. persulcatus	Китай China	MH158439–MH158440, MH678646–MH678648	[11]
I. persulcatus	Китай China	MT246198–MT246199, MT514916–MT514917, MT536950–MT536953
I. ricinus	Финляндия Finland	MN107153–MN107160	[12]
I. ricinus	Франция France	MN095519–MN095522	[13]
I. ricinus	Сербия Serbia	MT822179–MT822180	[14]
I. ricinus, D. reticulatus	Германия Germany	MW094148–MW094151	[15]
I. ricinus	Швейцария Switzerland	OP921096–OP921099	[16]
Hae. longicornis	Китай China	MZ676705
I. persulcatus, D. nuttalli, Hae. concinna, I. ricinus, D. reticulatus	Россия Russia	MN604229, MN648770–MN648777, MT210218–MT210225, MW525311, MW525312, MW525314–MW525321, MW52531–MW52533, MW525284–MW525310, MW556738–MW556741, MW584331	[8–10, 17]
Culex tritaeniorhynchus	Китай China	MK213942
Bos taurus	Китай China	MK122718, MK122720, MN218594, MN218595	[18]
Homo sapiens	Китай China	MH158415–MH158438	[18]

 

В настоящее время показана патогенность многокомпонентных флавиподобных вирусов для сельскохозяйственных животных и человека. Однако эти сведения носят фрагментарный и ограниченный характер. Не исключена вероятность того, что роль флавиподобных вирусов в инфекционной патологии домашних животных и человека может быть существенно более значимой, чем принято считать. Так, ALSV был выделен из крови пациента с лихорадкой на северо-востоке Китая [9]. У 86 из 384 пациентов с лихорадкой и 18 пациентов с укусами клещей в анамнезе был выявлен ALSV с помощью молекулярно-генетических и серологических диагностических тестов. Пациенты, инфицированные ALSV, в анамнезе имели лихорадку, головную боль и другие симптомы, которые напоминают проявления других инфекций, переносимых клещами. Близкородственный ALSV вирус Джингмен был обнаружен в крови приматов в Уганде, в крови крупного рогатого скота в Бразилии и в крови пациентов с диагнозом «геморрагическая лихорадка Крым-Конго» в Косово [19–21]. Эти результаты также указывают на то, что сегментированные флавиподобные вирусы могут являться причиной инфекционных заболеваний человека и создавать угрозу для здоровья населения.

Проблема инфекций, переносчиками которых являются иксодовые клещи, актуальна для многих регионов России, в том числе и для Восточной Сибири, где отмечается беспрецедентный рост заболеваемости населения вирусным клещевым энцефалитом, иксодовым клещевым боррелиозом и клещевым риккетсиозом. Показано, что экосистемы юга Восточной Сибири и севера Монголии являются оптимальными для существования разнообразных переносчиков и возбудителей трансмиссивных инфекций, переносимых клещами [22]. Обширная территория юга Восточной Сибири граничит или территориально близка к внутренним районам Китая, где впервые и была обнаружена циркуляция ALSV. Тем не менее в литературе имеются данные лишь об единичной находке ALSV на территории Республики Тыва.

Цель данной работы ‒ поиск и молекулярно-генетическая характеристика изолятов ALSV, переносимых клещами, на юге Восточной Сибири.

Материалы и методы

Всего для исследования было проанализировано 1060 индивидуальных проб клещей, отловленных на территории республик Хакасия, Тыва, Бурятия, Иркутской области и Забайкальского края в весенне-летний период 2023 г. (рис. 1).

 

Рис. 1. Места отлова исследуемых клещей. Красным цветом отмечены локации, где в собранных клещах была выявлена РНК ALSV; зеленым ‒ локации, где РНК ALSV не была обнаружена.

Fig. 1. Locations where the studied ticks were captured. Locations where ticks positive for ALSV RNA were collected are marked in red; Locations where no ALSV RNA was detected are indicated in green.

 

Сбор образцов клещей производили с растительности методом «на флаг». Клещей дважды отмывали 70% этанолом для удаления внешних загрязнений и наружной микрофлоры, после чего хранили при температуре −80 °C до проведения дальнейших исследований. Видовую принадлежность клещей устанавливали по морфологическим характеристикам согласно определителю с последующей таксономической верификацией проб, положительных на наличие ALSV, путем определения нуклеотидной последовательности фрагмента гена цитохромоксидазы, локализованного в митохондриальном геноме клеща.

Гомогенизацию полученных образцов осуществляли с использованием лабораторного гомогенизатора TissueLyserLT (Qiagen, Германия) в 300 мкл стерильного физраствора. Выделение суммарной РНК из исследуемых образцов проводили методом фенол-хлороформной экстракции с использованием TRIzol Reagent.

 

Таблица 2. Используемые в работе праймеры

Table 2. Primers used in this work

Мишень Target	Праймер Primer	Структура праймера (5’→3’) Primer sequence (5’→3’)	Длина Amplicon length (bp)	Тотжига (°С) Annealing T (°С)	Ссылка Reference
cox1	IpCX _f	ATTAGGAGCACCTGATATAGCTTTCCC	660	60	[24]
	IpCX _r	GCTGTAAATAAGCTCGAGTGTCGATAA
Сегмент 2 Segment 2	Miass_gly_3F	TGGATCAGCTCACACCACAC	333	53	[25]
	Miass_gly_3R	TCACCGTCACAGTGGAATGG
Сегмент 1 Segment 1	MiassF	GGTACACGGACCTGGGATCCTATTG	825	50
	MiassR	TCTCTGACTCCTGTTCTAATC
Сегмент 2 Segment 2	AL2_2F	CTTGCTACATCGGAATCATGCC	1091	56	Данная работа Current study
	AL2_2R	GATAAGCCCTCTCGATACCTC
Сегмент 3 Segment 3	AL3_2F	TGCTGTCCATAGCAATCATACC	865	56
	AL3_2R	GTAGGACACGTCCTTTGCGA
Сегмент 4 Segment 4	AL4_2F	GGAAGAGCTGGATACCGAACTG	1274	56
	AL4_2R	TGCCAGATGTGTAGCTTCCC

 

Скрининг полученных образцов на наличие РНК флавиподобных вирусов выполняли с помощью метода полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР), используя праймеры Miass_gly_3F/Miass_gly_3R, комплементарные фрагменту генома сегмента 2 (табл. 2). Постановку ОТ-ПЦР производили на термоциклере Т-1000 («Bio-Rad», США) в 25 мкл реакционной смеси. Для положительных образцов были получены ампликоны, частично перекрывающие все 4 сегмента генома ALSV. Для исключения возможной интеграции фрагментов вирусного генома ALSV в геном клеща [23] с положительными пробами параллельно была проведена ПЦР без этапа обратной транскрипции, в результате которой ни один ампликон наработан не был.

Детекцию полученных ампликонов проводили методом гель-электрофореза в 2% агарозном геле в трис-ацетатном буфере, содержащем 0,1% бромида этидия. Секвенирование по Сэнгеру осуществляли с использованием набора BigDye Terminatorv.3.1 Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems, США). Определение нуклеотидных последовательностей выполняли на основе капиллярного электрофореза с помощью автоматического секвенатора 3130xl Genetic Analyzer (Applied Biosystems, США). Анализ полученных нуклеотидных последовательностей проводили с использованием программного продукта UniproUGENE v. 1.48. Филогенетический анализ нуклеотидных последовательностей исследуемых фрагментов генома проводили методом максимального правдоподобия с использованием модели эволюции Tamura-Nei в программе MEGA Х. Показатели статистической надежности узлов филогенетического дерева рассчитывали с помощью бутстреп-анализа с использованием 1000 случайных реплик; 95% доверительный интервал (ДИ) уровня инфицированности клещей изучаемыми патогенами рассчитывали с использованием онлайн-сервиса (https://www.pedro.org.au/english/downloads/confidence-interval-calculator).

Результаты

Все образцы были протестированы методом ОТ-ПЦР с использованием скрининговых праймеров для сегмента 2 генома ALSV. Встречаемость РНК среди клещей I. persulcatus, собранных в Республике Хакасия, составила 3,3% (95% ДИ 1,4–7,5). Аналогичный показатель для Иркутской области составил 1% (95% ДИ 0,3–3,7), для Республики Тыва – 0,9% (95% ДИ 0,3–3,4) и для Забайкальского края – 0,7% (95% ДИ 0,2–3,6). Среди клещей D. nuttalli, отловленных на территории Республики Бурятия, РНК ALSV обнаружено не было, что, вероятно, связано с гораздо более низкой вирусофорностью данного вида клещей (табл. 3).

 

Таблица 3. Встречаемость ALSV в исследуемых пробах клещей, обитающих на юге Восточной Сибири

Table 3. Detection rates of ALSV in the studied ticks living in the south of Eastern Siberia

Регион Region	Вид клещей Tick species	Район District	Географические координаты Latitude, Longitude	Число проанализированных образцов Number of analysed ticks	Число положительных образцов Number of virus-positive
Забайкальский край Zabaykalsky Krai	I. persulcatus	Дульдургинский район, Национальный парк Алханай Duldurga district, Alkhanai National Park	50.873671, 113.398280	150	1
Республика Хакасия Republic of Khakassia	I. persulcatus	Бейский район, долина реки Табат Beysky district, Tabat river valley	52.947886, 90.721274	100	2
		г. Саяногорск, дачное общество Большой Карак Sayanogorsk, Bolshoi Karak	53.032989, 91.415743	50	3
Иркутская область Irkutsk region	I. persulcatus	Иркутский район, Байкальский тракт, 20 км Irkutsk district, Baikalsky tract, 20 km	52.189528, 104.489475	100	0
		Иркутский район, Байкальский тракт, 26 км Irkutsk district, Baikalsky tract, 26 km	52.162501, 104,524191	100	2
Республика Тыва Republic of Tyva	I. persulcatus	Каа-Хемский район, местечко Копту Kaa-Khem district, Koptu	51.757770, 95.418196	20	0
	I. persulcatus	Тоджинский район, перевал Тожу Todzhinsky district, Tozhu pass	52.701197, 96.802060	170	2
	I. persulcatus	Тандинский район, местечко Дургенский каньон Tandinsky district, Durgen Canyon	51.049461, 94.646579	20	0
Республика Бурятия Republic of Buryatia	D. nuttalli	Джидинский район, с. Гэгэтуй Dzhidinsky district, village Gegetui	50.683752, 105.181199	50	0
		Тарбагатайский район, с. Саратовка Tarbagatai district, village Saratovka	51.537704, 107.346951	50	0
		Тарбагатайский район, гора Спящий лев Tarbagatai district, Mount «Sleeping Lion»	51.537704, 107346951	50	0
		Тарбагатайский район, окрестности с. Саянтуй Tarbagatai district, village Sayantui	51,694972, 107.448139	50	0
		Иволгинский район, окрестности с. Ключи Ivolginsky district, village Kluchi	51.687606, 107.173963	50	0
		Селенгинский район, окрестности г. Гусиноозерск Selenginsky district, Gusinoozersk	50.632847, 105.382886	50	0
		Заиграевский район, окрестности с. Эрхирик, Онохой Zaigraevsky district, village Erhirik	51.898049, 108.006255	50	0

 

Выявленные в работе нуклеотидные последовательности были депонированы в базу данных GenBank под номерами OR620965–OR620974 для фрагмента сегмента 1, OR620975–OR620984 для фрагмента сегмента 2, OR620985–OR620994 для фрагмента сегмента 3 и OR620995–OR621004 для фрагмента сегмента 4.

Филогенетические деревья демонстрируют, что генетические варианты ALSV, циркулирующие в клещах I. persulcatus на территории юга Восточной Сибири, по всем четырем сегментам группируются с последовательностями, обнаруженными в Китае (рис. 2).

 

Рис. 2. Филогенетические деревья выявленных вариантов ALSV.

Fig. 2. Phylogenetic trees of identified ALSV variants.

 

 

Различия в нуклеотидных последовательностях между выявленными вариантами по определенным в работе фрагментам генома составили от 2 до 3%. Различия в выведенных аминокислотных последовательностях варьировали от 0,5 до 1,5% (рис. 3).

 

Рис. 3. Уровень различия нуклеотидных и аминокислотных последовательностей выявленных вариантов ALSV на юге Восточной Сибири.

Fig. 3. Level of differences in nucleotide and amino acid sequences of identified ALSV variants in the south of Eastern Siberia.

 

Генетическое сходство нуклеотидных последовательностей между полученными в настоящем исследовании вариантами ALSV и рядом прототипных изолятов флави- и флавиподобных вирусов приведено в табл. 4.

 

Таблица 4. Уровень гомологии нуклеотидной последовательности (%) ряда выявленных вариантов ALSV по сравнению с прототипными изолятами флави- и флавиподобных вирусов

Table 4. Level of nucleotide sequence similarity (%) of a number of identified ALSV variants in comparison with prototype isolates of flavi- and flavi-like viruses

Прототипные изоляты Prototype isolates		Варианты ALSV, полученные в работе ALSV variants identified in this study
		Chita 2023-1	Khakassia 2023-1	Tuva 2023-1	Irkutsk 2023-1
ALSV H3	Сег. 1/Seg.1	96,3	95,8	96,2	96,1
	Сег. 2/Seg.2	93,9	94,4	93,9	93,8
	Сег. 3/Seg.3	96,3	97,1	96,4	96,3
	Сег. 4/Seg.4	97,3	96,5	97,3	96.5
ALSV Miass502	Сег. 1/Seg.1	89,7	89,8	89,5	89,4
	Сег. 2/Seg.2	98,0	97,4	98	97,2
	Сег. 3/Seg.3	90,9	90,4	91,4	89,9
	Сег. 4/Seg.4	90,2	90,2	91,1	90,3
ALSV Kuutsalo	Сег. 1/Seg.1	88,9	89,5	89,5	89,1
	Сег. 2/Seg.2	91,7	91,6	91,3	91,5
	Сег. 3/Seg.3	90,7	90,7	91,2	90,6
	Сег. 4/Seg.4	91,2	90,9	91,5	90,8
Jingmen tick virus isolate 21GZ1	Сег. 1/Seg.1	75,2	76,5	75,3	75,2
	Сег. 2/Seg.2	50,3	50,3	50,4	50,4
	Сег. 3/Seg.3	74,5	74,2	75,8	74,5
	Сег. 4/Seg.4	63,3	63,2	64,4	64,1
Yanggou tick virus isolate Republic Altay/997/2016	Сег. 1/Seg.1	73,4	73,2	74,2	73,7
	Сег. 2/Seg.2	61,9	61,9	62,1	61,9
	Сег. 3/Seg.3	76,2	76,5	76,4	75,7
	Сег. 4/Seg.4	70,2	70,4	70,3	69,8
Takachi virus isolate IM-OI110	Сег. 1/Seg.1	74,2	75,2	74,5	75,3
	Сег. 2/Seg.2	65,7	66,1	66,3	66,3
	Сег. 3/Seg.3	77,3	77,2	77,4	77,2
	Сег. 4/Seg.4	74,6	74,5	74,9	75,4
Tick-borne encephalitis viru strain Zausaev	Сег. 1/Seg.1	54,5	54,7	54,6	54,3
	Сег. 2/Seg.2	–	–	–	–
	Сег. 3/Seg.3	41,6	41,4	41,7	41,5
	Сег. 4/Seg.4	–	–	–	–

 

Наиболее высокий уровень гомологии варианты ALSV из Восточной Сибири проявляли с китайским изолятом ALSV H3 (94–97%). Уровень гомологии изучаемых вариантов с прототипным изолятом ALSV Miass502, выделенным из клеща I. persulcatus на территории Челябинской области, составил 90–97%. Аналогичный показатель при сравнении с вариантами ALSV, выделенными из I. ricinus в Европе, колебался в пределах 90%. Гомология с последовательностями других флавиподобных вирусов (Джингмен, Янггоу, Тачен) составляла от 50 до 75% для разных сегментов генома. Гомология сегмента 1 (NS-5 like) и сегмента 3 (NS-3 like) при сравнении с геномом вирусом клещевого энцефалита составила 54 и 41%, соответственно.

Обсуждение

Полученные в настоящей работе данные об уровне встречаемости ALSV на территории южных регионов Восточной Сибири в целом соответствуют аналогичным данным, полученным для других регионов России. Наибольшая инфицированность клещей обнаружена в Хакасии (3,3%), что приближается к вирусофорности клещей из Челябинской области (4,3%) и Калининградской области (7,8%). Уровень инфицированности для других регионов Восточной Сибири (0,7–1%) соответствует ранее полученным показателям для Республики Тыва (0,6%), Республики Карелия (0,8%) и Республики Татарстан (1,4%) [8–10]. На основе полученных нами данных можно предположить наличие некоего градиента в возрастании инфицированности клещей ALSV с востока на запад, однако это предположение следует подтвердить проведением более обширного мониторинга и увеличением исследуемых проб клещей.

Согласно данным литературы, при филогенетическом анализе сегмента 2, кодирующего поверхностные структурные вирусные белки, показано, что основными факторами эволюции ALSV являются вид основного переносчика и место изоляции вируса. Предположительно изоляты ALSV разделяются в соответствии с основным видом переносчика на группы «I. ricinus» и «I. persulcatus». Группа «I. persulcatus» делится на две подгруппы: европейскую (республики Карелия и Алтай, Челябинская область) и азиатскую (Китай, республики Алтай, Тыва и Карелия, Челябинская и Ульяновская области и Алтайский край) [9]. Данное предположение нашло подтверждение в настоящем исследовании, т.е. все изоляты ALSV, циркулирующие на юге Восточной Сибири в клещах I. persulcatus, однозначно кластеризовались в азиатскую подгруппу соответствующего переносчика при анализе по каждому из сегментов генома.

В проведенной ранее работе было показано, что наибольший уровень внутривидового различия в нуклеотидных последовательностях ALSV характерен для сегмента 1, кодирующего аналог NS5 белка «классических» флавивирусов [23]. Это подтверждается на примере выявленных вариантов ALSV. Однако при анализе аминокислотных последовательностей видно, что аналоги белков NS5 и NS3 более консервативны по сравнению со структурными белками ALSV (рис. 3).

Можно предположить, что для вирусов с многокомпонентным геномом характерны события перегруппировки/рекомбинации, которые могут вносить вклад в их генетическую изменчивость. Топология филогенетических деревьев, построенных для фрагментов всех 4 сегментов, как у выявленных генетических вариантов ALSV, так и у прототипных изолятов практически совпадает. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что геном флавпиподобных вирусов чрезвычайно стабилен среди позвоночных и беспозвоночных. Этот факт позволяет предположить, что вирус уже хорошо адаптирован к обоим хозяевам.

Показано, что на территории Республики Тыва существуют сочетанные очаги флавивирусов (вирус клещевого энцефалита) и флавиподобных вирусов (ALSV и вирус Янггоу) [9]. В связи с широким распространением вируса клещевого энцефалита в Восточной Сибири и обнаружением в клещах данного региона ALSV, наличие таких сочетанных очагов можно предположить и на других изучаемых территориях. Это поднимает вопрос о возможной коциркуляции этих вирусов, их взаимного влияния друг на друга и коинфицировании человека при укусе клеща.

Заключение

Современная неблагополучная эпидемиологическая ситуация, сложившаяся в России в отношении инфекций, переносимых клещами, характеризуется не только ростом заболеваемости уже известными «клещевыми» инфекциями, но и выявлением новых нозологических форм и возбудителей, роль которых в региональной инфекционной патологии остается малоизученной или вообще неизученной. Данные о циркуляции флавиподобных вирусов, потенциально опасных для человека, могут служить основой для коррекции профилактических и противоэпидемических мероприятий. Для понимания актуальной обстановки, проведения регионально-ориентированной лабораторной диагностики и осуществления своевременных и адекватных профилактических мероприятий по отношению к инфекциям, переносимым клещами на территории Восточной Сибири, необходима достоверная информация о спектре циркулирующих на территории региона переносимых клещами патогенов и их генетической вариабельности. В работе показано широкое распространение вируса Алонгшан на территории республик Хакасия и Тыва, Иркутской области и Забайкальского края. Для выявленных вариантов вируса проведена молекулярно-генетическая характеристика и получены частичные нуклеотидные последовательности всех 4 сегментов генома. Эти данные актуализируют необходимость проведения мониторинга за изменением границ распространения флавиподобных вирусов, потенциально опасных для человека, и их переносчиков, что позволит спрогнозировать варианты распространения инфекции.

About the authors

Mikhail Yu. Kartashov

State Research Center of Virology and Biotechnology «Vector»

Author for correspondence.
Email: mikkartash@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-7857-6822

Ph.D. (Biol.), Senior Researcher

Russian Federation, 630559, Koltsovo, Novosibirsk region

Ekaterina I. Krivosheina

State Research Center of Virology and Biotechnology «Vector»

Email: katr962@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-5181-0415

Researcher

Russian Federation, 630559, Koltsovo, Novosibirsk region

Valentina Yu. Kurushina

State Research Center of Virology and Biotechnology «Vector»

Email: kurushina.valenti@gmail.com
ORCID iD: 0009-0005-8148-5242

Junior Researcher

Russian Federation, 630559, Koltsovo, Novosibirsk region

Alexander B. Moshkin

Chita anti-plague station

Email: pchs.chita@mail.ru
ORCID iD: 0009-0007-8491-2363

Director

Russian Federation, 672014, Chita

Sergey S. Khankhareev

Department of the Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare of the Republic of Buryatia

Email: org@03.rospotrebnadzor.ru
ORCID iD: 0000-0002-4884-7919

Ph.D. (Med.), Director

Russian Federation, 670013, Ulan-Ude

Choigana R. Biche-ool

Center of Hygiene and Epidemiology in the Republic of Tuva

Email: priem@17cgie.ru
ORCID iD: 0009-0002-1622-0553

Head of the Epidemiological Surveillance Department

Russian Federation, 667010, Kyzyl

Oksana N. Pelevina

Center for Hygiene and Epidemiology in the Republic of Khakassia

Email: pelevina_on@fbuz19.ru
ORCID iD: 0009-0004-9507-4199

Entomologist, Center for Hygiene and Epidemiology

Russian Federation, 655017, Abakan

Nikita V. Popov

Center for Hygiene and Epidemiology in the Irkutsk region

Email: ento-molog@mail.ru
ORCID iD: 0009-0002-6276-2388

Head of Department-Entomologist

Russian Federation, 664047, Irkutsk

Olga L. Bogomazova

Center for Hygiene and Epidemiology in the Irkutsk region

Email: entomolog@sesoirk.irkutsk.ru
ORCID iD: 0009-0009-6892-1125

Entomologist

Russian Federation, 664047, Irkutsk

Vladimir A. Ternovoi

State Research Center of Virology and Biotechnology «Vector»

Email: tern@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0003-1275-171X

Ph.D. (Biol.), Head of Department State Research Center of Virology and Biotechnology

Russian Federation, 630559, Koltsovo, Novosibirsk region

References

Supplementary files