Том 58, № 2 (2013)

Многочисленные исследования показали, что с помощью процесса самосборки одновременная экспрессия некоторых белков вируса гриппа в клетке может приводить к образованию вирусоподобных частиц (ВПЧ) даже в отсутствие вирусного генома. Морфологическое и антигенное сходство гриппозных ВПЧ с нативными вирионами представляет собой перспективную основу для новых противовирусных вакцин. В последнее десятилетие угроза появления штаммов вируса гриппа с пандемической потенцией становится все более актуальной. в связи с этим была разработана технология получения нового поколения безопасных и эффективных неэмбриональных вакцин, полученных на основе гриппозных ВПЧ в различных экспрессионных системах, имеющих значительные преимущества по сравнению с существующими способами производства вакцин. Подобные вакцины индуцируют в организме животных и людей полноценный гуморальный и клеточный иммунный ответ. В настоящем обзоре представлен анализ литературы по теме гриппозных ВПЧ, полученных в различных экспрессионных системах: клетках насекомых, млекопитающих и растений.

Перспективный подход к конструированию противовирусных вакцин состоит в активации клеточного звена иммунитета с помощью ДНК-вакцин. Цель работы - изучение эффективности генетической иммунизации мышей ДНК-конструкцией pcNS3-NS5B, одновременно кодирующей 5 неструктурных белков вируса гепатита С (ВГС) - NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B - в сравнении с плазмидами, содержащими гены индивидуальных неструктурных белков NS3, NS4, NS5A и NS5B ВГС. Мышей линии DBA иммунизировали ДНК-конструкциями трехкратно. Гуморальный иммунный ответ оценивали в иммуноферментном анализе (ИФА), клеточный - по количественному анализу уровня пролиферации Т-лимфоцитов методом проточной цитометрии и в реакции бласттрансформации лимфоцитов, по синтезу и секреции цитокинов ИФН-Y и ИЛ-2 методами ELISpot и ИФА. Установлено, что по большинству изученных параметров иммунный ответ на плазмиду pcNS3-NS5B был выше, чем на плазмиды, кодирующие отдельные белки. Так, достигнут функционально активный Т-клеточный ответ одновременно на антигены, представляющие эпитопы белков NS3, NS4, NS5A и NS5B ВГС разных генотипов. Показан высокий уровень пролиферации CD4+ -Т-клеток, секреция ИЛ-2 и ИФН-y, индукция антител изотипа IgG2a к белкам NS3 и NS5B. Полученные результаты свидетельствуют о возможности создания эффективной вакцины против гепатита С на основе ДНК-конструкции pcNS3-NS5B.

В популяции вируса клещевого энцефалита (ВКЭ) в Курганской области доминирует сибирский подтип (100%). Население вакцинируется отечественными вакцинами, приготовленными из штаммов дальневосточного подтипа. Среди 601 обследованного больного 143 (23,79%) были привиты по полной или незавершенной схеме. Из них 76,9% были привиты вакциной "Энцевир" НПО "Микроген", Томск. В 2010 г. зарегистрирован случай КЭ у 6-кратно вакцинированной больной 49 лет. Заболевание развилось через 2 года после последней ревакцинации и через 5 дней после укуса клеща. Длительность болезни от появления первых симптомов до летального исхода - 55 ч. В стационаре после введения иммуноглобулина у больной появились генерализованные судороги, отек мозга, нарушение дыхания. Из ткани спинного мозга выделен высоковирулентный штамм ВКЭ сибирского подтипа. Обсуждаются возможные механизмы развития заболевания, включая гетеротипичность вакцинных штаммов и феномен антителозависимого усиления инфекции.

При помощи поляризационного флюоресцентного иммуноанализа (ПФИА) изучена антигенная активность синтетических флюоресцентно-меченных пептидов, перекрывающих иммунореактивные участки из аминокислотных остатков (а. о.) 7-19, 20-34 из N-концевой части и а. о. 73-85 из центральной области нуклео-капсидного белка вируса гепатита С (ВГС). На основе данных пептидов разработана ПФИА-тест-система для выявления антител к нуклеокапсидному белку ВГС. Проведено сравнительное изучение аналитических характеристик ПФИА-тест-системы и коммерческой иммуноферментной тест-системы для выявления анти-ВГС. Исследования показали, что разработанный метод обладает 85% чувствительностью и высокой специфичностью относительно тест-системы сравнения. Полученные результаты свидетельствуют O принципиальной возможности применения метода ПФИА для определения антител к нуклеокапсидному белку ВГС в клинических образцах сывороток крови.