Том 57, № 2 (2012)

В настоящем обзоре проанализированы новейшие данные и современные представления о ферменте циклооксигеназа-2 (СОХ-2) как возможном биомаркере вирусассоциированных злокачественных патологий человека. Подробно рассмотрены возможные механизмы активации СОХ-2 в клетках, инфицированных онкогенными вирусами человека, такими как вирус гепатита В, вирус Эпштейна-Барр, папилломавирус человека.

Представлен теоретический анализ проблемы определения перспективности испытуемых противовирусных неспецифических препаратов для решения задач биологической безопасности в отношении экзотических вирусных инфекций. Сутью предлагаемой концепции оценки защитной эффективности является анализ результатов воздействия испытуемого препарата на патогенез экспериментальной инфекции по признаку купирования адекватно моделируемого на животных ведущего синдрома поражения человека. Изложенные подходы к критериям адекватности выбираемых видов животных целям испытаний по патогенетическим и фармакологическим показателям формируют в совокупности новую методологию оценки эффективности защитных препаратов. Приведены основные требования к методике проведения испытаний. Прогностическая значимость оценки защитной эффективности противовирусных препаратов для человека будет зависеть от степени приближения патогенетических особенностей и внешних проявлений заболеваний у животных выбранного вида к инфекции у человека. В работе изложены также сравнительные характеристики течения лихорадки Эбола и венесуэльского энцефаломиелита лошадей у человека и несколько видов обезьян.

Иа основе гликолипидов из морских макрофитов, сапонина из голотурий и холестерина путем самосборки получены наноразмерные морфологические структуры, названные нами тубулярными иммуностимулирующими (ТИ) комплексами. Изучена возможность построения на их основе вакцинных препаратов, содержащих субъединичные антигены вируса гриппа. Зарегистрировано четкое повышение иммуногенности гемагглютинина вируса гриппа при иммунизации экспериментальных животных этим антигеном в составе ТИ-комплексов. Показана возможность усиления адъювантной активности ТИ-комплекса к гемагглютинину вируса гриппа путем добавления в состав матрицы ТИ-комплекса известного антиоксиданта эхинохрома А из плоского морского ежа Scaphechinus mirabilis.

С помощью метода РНК-интерференции были получены данные о противовирусной активности малых интерферирующих РнК-олигонуклеотидов (миРнК) в отношении инфекции, вызванной вирусом гепатита С(ВГС) в культурах клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ). Механизм РнК-интерференции основан на специфическом распознавании мРНК-мишени с помощью специально сконструированных малых (19-22 пары оснований) интерферирующих РНК-олигонуклеотидов (миРНК, или siRNA). В частности показано, что обработка монослоя клеток СПЭВ, инфицированных ВгС, миРНК приводила к защите зараженных клеток от цитопатогенного действия вируса. Результаты были подтверждены в опытах, в которых была обнаружена способность РНК-олигонуклеотидов снижать продукцию инфекционного (цитопатогенного) ВГС инфицированными клетками СПЭВ в ранних стадиях инфекции

Используемые в настоящее время вакцины против клещевого энцефалита основаны на инактивации вируса клещевого энцефалита (ВКЭ) дальневосточного или западноевропейского генетических типов из первичных культур фибробластов куриных эмбрионов. Поскольку ВОЗ рекомендует разрабатывать вакцины с использованием в качестве субстрата не куриных эмбрионов, а перевиваемых культур клеток, проведено сравнение инфекции перевиваемых монослойных культур клеток СПЭВ, Vero E6 и вакцинной линии Vero (B) штаммами ВКЭ сибирского и дальневосточного генетических типов, доминирующих в эндемичных районах России. После заражения клеток ВКЭ дальневосточного (штаммы Софьин и 205) или сибирского (штаммы Айна, 2530, 2689 и 2703) генетических типов титры жизнеспособного ВКЭ достигали 2,8 lg ЦПД 50 для клеток Vero (B), 5,5 lg ЦПД 50 для Vero E6 и до 9 lg ЦПД 50 для клеток СПЭВ. Количественные оценки антигена E ВКЭ в иммуноферментном анализе и геном-эквивалентов посредством обратной транскрипции с последующей ПЦР в реальном времени позволили определить до 10 8 вирионов в 1 мл культуральной жидкости, что соответствовало микроскопическим наблюдениям ЦПД для клеток СПЭВ и существенно превышало значения для клеток Vero E6 и особенно для клеток Vero (B). На основании данных титрования штаммов ВКЭ, ИФА и ОТ-ПЦР в реальном времени отечественная вакцинная клеточная линия Vero (B), охарактеризованная в соответствии с требованиями ВОЗ, и клетки Vero E6 можно применять для разработки вакцин против клещевого энцефалита