Том 49, № 2 (2004)

Исследована частота выявления антител к вирусу гепатита Е (ВГЕ) у населения южных регионов, средней полосы Европейской части Российской Федерации и Сибири. Антитела к ВГЕ наиболее часто обнаруживались как у больных с патологией печени, так и у лиц с заболеваниями, не связанными с первичным поражением печени, в частности у пациентов кожно-венерологических диспансеров и ВИЧ-инфицированных. Повышенный уровень антител к ВГЕ отмечен также у доноров крови, медицинских работников и в изолированных коллективах (тюрьмы и психиатрические больницы). Выявлена корреляция между частотой регистрации антител к ВГЕ и такими факторами риска, как контакт с кровью и нарушение гигиенических правил.

Изучены репродукция штаммов вируса Эбола (ВЭ), вызывающих различную летальность у морских свинок, в перитонеальных макрофагах и эксплантатах аорты животных in vitro и in vivo, а также продукция интерферона у (ИФН-у) и фактора некроза опухоли а (ФНОа) макрофагами и эндотелиоцитами морских свинок. Взаимодействие макрофаг - ВЭ на примере 2 моделей восприимчивости к ВЭ показывает, что леталыюсть ВЭ не связана однозначно только с уровнем репродукции вируса в макрофагах. Взаимодействие эндотелиоцит - ВЭ показывает, что летальность ВЭ находится в обратной зависимости от уровня продукции ИФН-у и ФНОа эндотелиоцитами. В общем же летальность при лихорадке Эбола не определяется только способностью или неспособностью ВЭ репродуцироваться в макрофагах и эндотелиоцитах, а зависит еще и от ряда патогенетических факторов, одним из которых может быть цитотоксическое действие иммунных комплексов, образующихся в процессе развития инфекции.

Исследована динамика гемолитической активности комплемента в крови морских свинок при летальной и нелетальной формах инфекции Эбола. Установлена корреляция динамики нарастания активности комплемента в крови животных с летально протекающей инфекцией. У животных, демонстрирующих летальную инфекцию, после инфицирования вирусом Эбола гемолитическая активность комплемента стремительно нарастала, и уже через 15 ч с момента инфицирования показатели активности комплемента у 100% морских свинок превышали фоновые значения более чем в 2 раза. К концу 1-х суток начиналось их снижение, которое достигало к окончанию инкубационного периода (3-4-е сутки после инфицирования) исходного уровня и затем снижалось до 0 за 2-3 сут до летального исхода. Еще сильнее этот феномен, как и феномен ускоренной смерти, был выражен при инфицировании животных, однократно иммунизированных инактивированным вирусом Эбола. При инфицировании морских свинок нелетальным штаммом вируса Эбола активизация синтеза комплемента происходила лишь в конце инкубационного периода, она сопровождалась плавным подъемом, "платообразно"- или волнообразно-повышенным уровнем комплемента на период течения заболевания и нормализацией показателей активности в период выздоровления. Выявленная особенность может быть важной при прогнозировании исхода заболевания. Показана четкая связь между гемолитической активностью комплемента и уровнем циркулирующих иммунных комплексов в крови экспериментальных животных, прослеживающаяся при инфицировании как летальным, так и нелетальным штаммом.

Представлены данные о значении гормональных и иммунологических нарушений и их взаимосвязях в патогенезе герпетического кератита у мужчин. Оценка уровней тестостерона, кортизона и содержания CD8*-, С095*-лимфоцитов, интерлейкина-6 и фактора некроза опухоли а, а также установление взаимосвязей между ними имеют прогностическое значение у мужчин с герпетическим кератитом. Снижение концентрации тестостерона у мужчин с тяжело протекающими формами герпетического кератита свидетельствует о целесообразности включения в комплексную терапию гормонкорригирующих препаратов.

С использованием бакуловирусной системы экспрессии получены рекомбинантные белки нуклеокапсида (N) американского и европейского типов вируса репродуктивного и респираторного синдрома свиней (РРСС). Полученные продукты были очищены методом метапло-аффинной хроматографии и их специфичность подтверждена в имму нохимических реакциях с использованием референтных моноклональных антител. Антигенная активность рекомбинантных белков была исследована в реакции непрямого иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием свиных сывороток, охарактеризованных ранее коммерческим набором "HerdChek" фирмы "IDEXX". Показана возможность применения полученных рекомбинантных антигенов для определения антител к вирусу РРСС методом непрямого иммуноферментного анализа.

Для усовершенствования лабораторной значимости серологического обследования больных с различными клиническими проявлениями герпетической инфекции разработана отечественная иммуноферментная тест-система "Герпес-диагност" на основе выявления низкоавидных IgG-антител. Отработаны основные параметры постановки теста, оптимизирован этап получения иммуносорбента на основе антигенов вируса герпеса простого (ВГП) типов 1 и 2, подобраны концентрация основного реагента, позволяющего удалять низкоавидные антитела, в качестве которого был выбран раствор 8 М мочевины, а также временные и температурные режимы постановки теста. Отработана система учета и интерпретации результатов. Установлено, что индекс авидности антител менее 35% является надежным критерием наличия острой первичной инфекции, вызванной как ВГП типа 1, так и ВГП типа 2. При рецидиве герпетической инфекции индекс авидности антител может варьировать в пределах 30-45%.