Том 49, № 1 (2003)

Изучено содержание индивидуальных белков ВГС в клетках печени пациентов с хроническим гепатитом С (ХГС) и проанализирована взаимосвязь между выявлением белков и активностью патологического процесса. Экспрессию белков ВГС в криостатных срезах биоптатов печени 69 пациентов с ХГС оценивали с помощью иммуногистохимического метода с применением оригинальных моноклональных антител (МКА) к 5 белкам ВГС. Результаты детекции белков у пациентов сравнивали с активностью и стадией ХГС (по гистологическому диагнозу и уровню аланинаминотрансферазы - АЛТ). Белки ВГС суммарно выявлены в печени 74% пациентов; белки core, NS3, NS4A, NS4B и NS5A - у 28, 43, 43, 55 и 58% больных соответственно. Все изученные белки обнаружены в цитоплазме гепатоцитов. Белки в печени выявлялись чаще по сравнению с обнаружением РНК ВГС в сыворотке крови (61%). Это указывает на большую чувствительность данного теста при выявлении ВГС-инфекции. Показано, что накопление белка core коррелировало с наличием репликативной формы РНК ВГС в печени и с повышенным уровнем АЛТ. Число NSSA-экспрессирующих клеток находилось в прямой связи со стадией ХГС. Количество NS4B- и NSS-позитивных гепатоцитов негативно коррелировало с активностью воспалительно-некротических процессов в печени. Среди антигенпозитивных пациентов чаще встречалась гиперферментемия. При одновременном определении белков ВГС в печени и РНК ВГС в сыворотке гистологическая активность ХГС была достоверно выше.

Экспериментальная инфекция мышей линии BALB/c, зараженных летальной дозой вируса клещевого энцефалита (КЭ), штамм 205, сопровождалась выраженным нарастанием концентрации цитокинов ИЛ-1р, ИЛ-б, ИЛ-10, ФНОа в сыворотке крови животных. Максимальные значения этих цитокинов определяли в терминальной стадии инфекции. Заражение животных нелетальной дозой вируса КЭ характеризовалось достоверно менее выраженным нарастанием концентрации ИЛ-1р, ФНОа и ИЛ-10. Концентрация ИЛ-6 в сыворотке крови животных, зараженных нелетальной дозой вируса, изменялась в течение всего периода наблюдения. Динамика цитокинов в сыворотке крови мышей, инфицированных летальной дозой вируса КЭ, позволяет предположить развитие SIRS в терминальной стадии инфекции.

Методом твердофазного иммуноферментного анализа показано взаимодействие растворимого рекомбинантного рецептора CD4 (rsCD4) с аполипопротеином AI человека. В сравнительных исследованиях методом проточной цитофлюориметрии показаны конкурентные взаимодействия поверхностных белков ВИЧ1 (др120, др41) и аполипопротеина AI человека с рецептором CD4, присутствующим на клеточных мембранах лимфоцитов человека линии МТ4. Высказывается предположение о том, что конкурентные взаимоотношения между этими белками могут проявляться и в отношении рецептора аполипопротеина AI, что нарушает участие последнего в регуляции биосинтеза белка и приводит к снижению массы тела у ВИЧ-инфицированных больных.

Электронно-микроскопические исследования свидетельствуют о том, что стимулированные фитогемагглютинином (ФГА) культуры здоровых доноров могут быть с успехом использованы для изучения этиологии гепатитов, передаваемых парентеральным путем. Электронно-микроскопическое изучение вируса, выделенного из сыворотки крови больного гепатитом на культурах лейкоцитов человека, стимулированных ФГА, и названного лейкоцитарным вирусом гепатита (ЛВГ), позволило при использовании метода негативного контрастирования обнаружить вирусные частицы гексагональной формы размером 50-65 нм с оболочкой, разделенной светлым промежутком шириной 4-5 нм. Это позволило отнести ЛВГ к семейству Flaviviridae. В штамме К ЛВГ, хранившемся в Музее вирусов НИИ вирусологии РАМ в течение 24 лет в лиофилизированом виде при -5°С, обнаружена РНК вируса гепатита С, однако ее генотипирование осуществить не удалось. В материалах дальнейшего пассирования ЛВГ на стимулированных ФГА культурах лейкоцитов доноров РНК этого вируса обнаружить не удалось, что, возможно, свидетельствует об инактивации ЛВГ при хранении. В этих материалах не обнаружена также РНК вируса гепатита G, но при пассировании штамма в 1999 г. обнаружена ДНК вируса ТТ, что свидетельствует о широком распространении этого вируса в популяции здоровых доноров, лимфоциты которых используют при приготовлении культур лейкоцитов крови.

Изучено влияние y-L-глутамилгистамина (соединение I) и его аналогов на состояние неспецифической резистентности и противовирусную активность на моделях экспериментальной гриппозной и герпетической инфекций. На модели эмоционально-двигательного стресса у мышей показано, что применение соединения II предотвращает или ослабляет снижение активности НК-клеток и синтеза а- и у-интерфероиов в постстрсссовый период. Аналоги y-L-Glu-HA (соединения II, III IV) повышали резистентность мышей к экспериментальной гриппозной инфекции при низкой множественности заражения (10 ЛД50), а соединение II - и при высокой инфицирующей дозе (100 ЛД50). При экспериментальном герпетическом энцефалите мышей соединение II не оказывало выраженного защитного действия в жестких условиях эксперимента. Таким образом, ряд испытуемых аналогов y-L-глутамилгистамина обладают иммуномодулирующей активностью и способны нормализовать показатели неспецифического иммунитета. При этом они оказывают выраженное противовирусное действие при экспериментальной гриппозной инфекции и малоэффективны при экспериментальном герпетическом энцефалите мышей. Из исследованных соединений наиболее перспективным представляется соединение II.

Впервые на территории Ульяновской области проведено комплексное обследование населения, кровососущих членистоногих и домашних животных. Выявлена активная циркуляция некоторых арбовирусов, установлена преимущественно экологическая связь вирусов серогруппы калифорнийского энцефалита с комарами рода Aedes, а вируса Батаи - с комарами рода Anopheles. Отмечено наиболее частое обнаружение антител к вирусам комплекса калифорнийского энцефалита.