The potential of synthetic small interfering RNA-based antiviral drugs for influenza treatment

Full Text

Грипп является одной из самых актуальных проблем мирового здравоохранения. Ежегодно гриппом болеют до 15% населения земли, из них около 500 тыс. человек умирают [1]. Вирус гриппа поражает дыхательные пути человека, но осложнения гриппа могут затронуть не только респираторную, но и сердечно-сосудистую, и центральную нервную систему [2][3][4]. Особую клиническую значимость представляют вирусы рода Alphainfluenzavirus (Influenza A virus, вирус гриппа А, ВГА) и Betainfluenzavirus (Influenza B virus, вирус гриппа В, ВГB), принадлежащие к семейству Orthomyxoviridae (https://talk.ictvonline.org/ taxonomy/), поскольку они являются причиной тяжёлых заболеваний и имеют высокий эпидемический и пандемический потенциал [5].

Терапия гриппа проблематична, поскольку вирус, в силу присущей ему высокой изменчивости, способен быстро вырабатывать резистентность к специфическим противогриппозным препаратам. Альтернативным перспективным подходом к созданию противогриппозных препаратов является использование специфических малых интерферирующих РНК (миРНК), которые могут быть нацелены на вирусные гены, либо на мРНК клеточных генов, важных для репродукции вирусов гриппа.

Цель данного обзора – оценка перспектив применения метода РНК-интерференции при разработке специфических противогриппозных препаратов.

Для лечения гриппа применяется широкий спектр этиотропных, патогенетических, симптоматических и специфических препаратов. Особый интерес представляют специфические препараты, направленные на подавление репродукции вируса гриппа и разрешённые для клинического применения.

Производные адамантана (амантадин и ремантадин). В результате действия препаратов этого ряда эндосома, содержащая вирус гриппа, не сливается с оболочкой вируса и выход вирусного рибонуклеопротеина из неё вследствие блокировки ионного канала, сформированного белком М2, не происходит. Однако ионный канал, формируемый белком М2, у вируса гриппа В выстлан полярными аминокислотами, соответственно применение препаратов адамантанового ряда в отношении ВГВ неоправданно, поскольку присутствие полярных (гидрофильных) остатков аминокислот уменьшает эффект гидрофобного препарата – адамантана [6]. Недостатком этих препаратов является то, что практически все циркулирующие в настоящее время штаммы вирусов гриппа приобрели устойчивость к ним. Если у циркулировавших до 2004 г. ВГА наблюдалась резистентность менее 1%, то с 2004 по 2016 г. в Австралии, Азии, Европе и США у таких штаммов, как A/California/07/2009 (H1N1), A/Texas/04/2009 (H1N1), A/Denmark/524/2009 (H1N1), A/Denmark/528/2009 (H1N1) и A/WSN/33 (H1N1) была выявлена более чем 95%-ная устойчивость к производным адамантана, в результате появления у них мутации S31N в гене M2 [7].

Ингибиторы нейраминидазы (озельтамивир, занамивир, перамивир). Препараты этого ряда подавляют проникновение вирусов в клетку путём отщепления остатков сиаловой кислоты с поверхности клеточной стенки. В разные эпидемические сезоны чувствительность штаммов ВГА и ВГВ по отношению к ним сильно различалась. Так, в сезон 2008–2009 гг. почти все циркулирующие вирусы гриппа A (H1N1) были устойчивы к озельтамивиру [8][9]. С 2017 по 2018 г. циркулирующие вирусы гриппа A (H1N1) были восприимчивы к озельтамивиру и перамивиру на 99%, а к занамивиру – на 100% [10].

Ингибитор слияния умифеновир (Арбидол^®). Данный препарат блокирует слияние липидной оболочки вируса с мембранами эндосомы, что предотвращает выход вРНК из эндосомы [11]. Известно, что некоторые циркулирующие штаммы резистентны к данному препарату. Так, у реассортантов, образованных от штаммов A/Singapore/1/57 и A/chicken/Germany/27/Weybridge, лишь на 50% снижалась репродукция при дозировке арбидола 10 мкг/мл [12]. Ингибиторы вирусных полимераз (фавипиравир и пр.). Они эффективны в отношении штаммов вируса гриппа, резистентных к препаратам адамантанового ряда и ингибиторам нейраминидазы [13]. Механизм действия фавипиравира заключается в том, что в клетке под воздействием протеаз он фосфорилируется в свою активную форму – фавипиравир-рибофуранозил-5’-трифосфат (F-RTP), что приводит к ингибированию РНК-зависимой РНК-полимеразы, в результате чего тормозится репродукция вируса гриппа [14]. Установлено, что замена Lys229 на Arg в белке PB1 приводит к формированию устойчивости в отношении фавипиравира, что было продемонстрированно на штамме вируса гриппа А/England/195/2009 (H1N1) [15].

Таким образом, несмотря на широкий спектр специфических противогриппозных препаратов, остро стоит проблема формирования вирусной резистентности к ним [16]. Для её преодоления необходимы принципиально новые антивирусные препараты. Одна из перспективных технологий создания специфических противовирусных препаратов основана на механизме РНК-интерференции.

РНК-интерференция – это регуляторный путь эукариотических клеток, индуцированный двухцепочечной молекулой РНК [17]. Явление РНК-интерференции было открыто Э. Файром и К. Мелло в 1998 г. у нематоды Caenorhabditis elegans. Этими исследователями также были описаны основные особенности РНК-интерференции, которые доказывают, что при ней расщепляется матричная РНК (мРНК); двухцепочечная РНК (дцРНК), определяющие узнавание комплементарного участка мРНК-мишени, эффективнее, чем одноцепочечная РНК (оцРНК); для подавления экспрессии гена необходим короткий фрагмент дцРНК [18]. В 2006 г. Э. Файр и К. Мелло получили Нобелевскую премию по физиологии и медицине за открытие явления РНК-интерференции – механизма сайленсинга генов при участии дцРНК.

Сущность РНК-интерференции заключается в подавлении экспрессии гена-мишени под влиянием миРНК (siRNA) [19][20][21]. Механизм РНК-интерференции состоит в том, что эндонуклеаза Dicer расщепляет экзогенную чужеродную дцРНК на отдельные двухцепочечные последовательности длиной от 21 до 25 пар нуклеотидов, которые и есть миРНК. Далее миРНК связывается с белковым комплексом RISC (RNA-induced silencing complex), в состав которого входит белок Ago2 из семейства Argonaute, белок PACT и белок TRBP, который распознает и расщепляет мРНК-мишень [22][23].

Создание лекарственных препаратов, действие которых основано на ингибировании активности целевых генов путём РНК-интерференции, представляется перспективным направлением, эффективность которого исследуется в отношении широкого спектра заболеваний различной этиологии, в том числе инфекционных. На данный момент разработаны и проходят стадии клинических испытаний такие препараты, как Miravirsen (против гепатита С), ARC-520 и ARC-521 (против гепатита В), ALN-RSV01 (против респираторно-синцитиальной вирусной инфекции), pHIV7-shITAR-CCR5RZ (против ВИЧ-инфекции) [22][24][25][26].

Традиционный подход к разработке противовирусных препаратов – дизайн миРНК, мишенью которых является вирусный геном. Метод РНК-интерференции был успешно испытан в одной из ранних работ Q. Ge и соавт. на двух модельных штаммах вируса гриппа: A/PR/8/34 (PR8) и A/WSN/33 (WSN) на разных клеточных культурах (Vero и MDCK). Были подобраны и исследованы около 20 миРНК, но наибольший эффект показали те, которые были направлены к мРНК вирусных белков NP и PA. При наличии в клетке миРНК, специфичных к последовательностям мРНК белков NP и PA, приостанавливался синтез этих белков, что приводило к подавлению репродукции вируса, так как прекращались репликация и транскрипция вирусного генома [27].

В дальнейшем эти авторы исследовали эффективность данного подхода на модели in vivo. Исследование проводили с использованием штамма вируса гриппа A/PR/8/34 (H1N1) на мышах. Вводили смесь, содержащую миРНК, путём эндотрахеального аэрозольного распыления. Были выбраны миРНК к генам NP, PA и PB1. В работе было показано, что использование миРНК как в терапевтических, так и в профилактических целях способно снижать репродукцию ВГА у мышей в эпителиальных клетках дыхательных путей. Доказан дозозависимый эффект препарата миРНК: при введении мышам 60 мкг миРНК к мРНК последовательности вирусного белка NP титр вируса в лёгких снижался на один порядок, тогда как при введении 120 мкг той же миРНК – в 1000 раз [28].

Успешное использование миРНК, направленных к вирусному геному, было показано в работе W. Zhiqiang и соавт. [29]. Авторы провели выравнивание последовательностей 8 сегментов РНК вируса гриппа A/Beijing/01/2009 (H1N1) и выбрали для конструирования миРНК наиболее консервативные области генов. Эффективность синтезированных миРНК оценивали по экспрессии вирусных генов при полимеразной цепной реакции (ПЦР) и с помощью титрования по цитопатическому действию. За 6 ч до инфицирования клеток А549 вирусом гриппа с множественностью заражения (MOI), равной 0,001, авторы проводили на них трансфекцию выбранными миРНК. Из 35 созданных миРНК было отобрано 10, которые снижали экспрессию целевых генов ВГА на 70% и более: PB2-912, PB1-851, PB1-1067, PB1-1789, PA-1274, NP-574, NP571, NP-1494, M-969, M-559. Через 1 сут определяли содержание вирусной РНК (вРНК) и вирусных белков с помощью ПЦР-РВ и вестерн-блоттинга.

В работе H.Y. Sui и соавт. [30] была определена консервативная последовательность вирусного гена белка М2, подобраны миРНК и продемонстрировано пролонгированное ингибирование репродукции ВГА в культуре клеток MDCK. В исследовании использовали 2 миРНК, направленные к белку М2 и 2 миРНК, направленные к гену NP [27], в качестве положительного контроля. Клетки MDCK были трансфицированы синтетическими миРНК и через 8 ч заражены штаммом вируса гриппа A/New Caledonia/20/1999 (H1N1) при MOI = 0,005. Вируссодержащую жидкость собирали через 48 ч и оценивали концентрацию вРНК методом количественной ОТ-ПЦР-РВ. Наибольший противовирусный эффект обеспечивала миРНК М-950, снижая репродукцию вируса гриппа на 80% относительно отрицательного контроля (миРНК к GFP). Кроме того, миРНК, направленные к гену белка М2, ингибировали репродукцию высоковирулентного A/Hong Kong/486/97 (H5N1) при MOI = 0,5 и 0,05 в 3 раза, при MOI = 0,005 – в 7 раз.

J. Piasecka и соавт. подобрали 9 миРНК (183, 412, 471, 613, 682, 901, 1008, 1090, 1312), нацеленных на различные участки последовательности мРНК 5-го сегмента вируса гриппа, которая кодирует белок NP. В работе использовали штаммы вируса гриппа A/California/04/2009 (H1N1), A/PR/8/34 (H1N1) и культуры клеток MDCK. В качестве положительного контроля применяли миРНК-1496, направленную к аналогичной последовательности мРНК гена NP [27][28][29]. Из девяти предложенных авторами последовательностей самый высокий ингибирующий эффект оказали миРНК 613 и 682, при использовании которых концентрация вирусной РНК снижалась от 78 до 85% в зависимости от штамма вируса по сравнению с отрицательным контролем [31].

В табл. 1 представлены наиболее эффективные вирусные гены-мишени, подавление которых с последующим эффективным снижением репродукции вируса гриппа было подтверждено в независимых исследованиях.

Таблица 1. Вирусные гены, нокдаун которых эффективно подавляет репродукцию вируса гриппа*
Table 1. The inhibition of influenza virus reproduction using knockdown of virus genes*

Примечание. * Приведены вирусные гены-мишени для миРНК, нокдаун которых приводил к достоверному снижению вирусной репро- дукции в независимых исследованиях; ** в исследовании была использована модель животных; штаммы, использованные при проведении исследования: A – A/PR/8/34 (PR8), A/WSN/33 (WSN) subtypes H1N1; B – A/PR/8/34 (PR8) – в работе использовали животную модель; C – A/Bei- jing/01/2009 (H1N1); D – A/California/04/2009 (H1N1), A/PR/8/34 (H1N1); E – A/New Caledonia/ 20/1999 (H1N1), A/Hong Kong/486/97 (H5N1).
Note. * Findings from independent studies revealed that specific knockdown of miRNA-targeted virus genes resulted in the inhibition of viral reproduction; ** an animal model was used in the research. Virus strains used in the study: A – A/PR/8/34 (PR8), A/WSN/33 (WSN) subtypes H1N1; B – A/PR/8/34 (PR8); C – A/Beijing/01/2009 (H1N1); D – A/California/04/2009 (H1N1), A/PR/8/34 (H1N1); E – A/New Caledonia/ 20/1999 (H1N1), A/Hong Kong/486/97 (H5N1).

Следует отметить, что метод РНК-интерференции имеет ограничения. Помимо необходимости создания эффективного и безопасного средства доставки специфической миРНК в клетки лёгких, существует риск возникновения устойчивых к действию миРНК вирусов. В процессе репродукции популяции вирусов в заражённых клетках образуются квазивиды вирусов, среди которых под селективным влиянием миРНК будут получать преимущества вируса, имеющие нуклеотидные замены в сайте связывания с миРНК. Образование единичной мутации в последовательности РНК-мишени приводит к полной утрате эффекта РНК-интерференции [32]. Способность РНК-содержащих вирусов ускользать от воздействия РНК-интерференции экспериментально доказана на клеточной модели инфекции ВИЧ-1, который способен уходить от миРНК в результате появления нуклеотидных замен в генах tat, nef, int и att [33]. Кроме того, остро стоит проблема точной, безопасной и действенной доставки миРНК в клетки-мишени для вируса, поскольку миРНК – неустойчивое соединение и часто подвержена воздействию нуклеаз [34].

Альтернативным подходом к созданию противогриппозных препаратов является использование специфических миРНК, направленных к мРНК клеточных генов, важных для репродукции вирусов гриппа. Вирус гриппа способен к высокой изменчивости посредством не только мутаций и реассортаций, но и путём эпистаза, то есть благодаря парным мутациям, когда появление одной мутации ведёт к возникновению другой [35]. По мнению M. Lesch и соавт. [36], целесообразно влиять непосредственно на внутриклеточные структуры клетки-хозяина, способствующие репродукции вируса гриппа в клетке, поскольку вероятность появления альтернативного пути вирусной репродукции очень низка.

Эффективность использования миРНК, направленных на подавление клеточных факторов, была исследована в работах по полногеномному миРНК-скринингу с целью выявления перспективных мишеней для РНК-интерференции. В одной из первых работ R. Konig и соавт. с использованием этого подхода обнаружили 295 клеточных факторов, необходимых для ранних стадий репродукции вируса гриппа. Из них авторами было выделено 23 наиболее эффективных гена-мишени, нокдаун которых не приводил к индукции значительной цитотоксичности. Исследование проведено на клеточных линиях А549 (аденокарцинома лёгкого человека) и штамме вируса гриппа A/ WSN/33 [37].

В другой работе A. Karlas и соавт. [38] использовали двухэтапный подход для проведения полногеномного миРНК-скрининга. Первым шагом была трансфекция миРНК культуры клеток А549, через 48 ч их инфицировали штаммом вируса гриппа А/WSN/33, а после окрашивали специфическими антителами к ВГА. Вторым шагом был перенос вируссодержащего супернатанта с А549 на репортерную культуру клеток почки эмбриона человека 293Т, стабильно трансфицированную геном люциферазы, в которой после заражения вирусом гриппа запускается экспрессия транскриптов светляковой люциферазы, фланкированных нетранслируемым участком сегмента нуклеопротеина (NP) вируса гриппа A/WSN/33. Надёжность этого подхода подтвердили с помощью миРНК, направленной к мРНК вирусного белка NP, в результате чего блокировалась репродукция вируса гриппа.

В 2018 г. A. Karlas и соавт. провели масштабный миРНК-скрининг на клеточной модели инфекции ВГА и ВГВ, в том числе A/WSN/1933(H1N1), A/Panama/2007/1999 (H3N2), ВГА птиц (A/Vietnam/1203/2004(H5N1)) и B/Thuringia/02/2006xB/Vienna/33/2006 для определения факторов клетки-хозяина, необходимых для репродукции вирусов гриппа. На основании скрининга установлено, что нокдаун таких генов, как Nup98, Nup205, FLT4, COPA, ARCN1, COPG, NXF1, EIF3A, ATP6V0C, EIF4A3, COPB1, NME3, AP2M1, MAGI2, EIF3C, ROR2 приводит к достоверному подавлению репродукции ВГА и ВГВ. Затем в базе www.ingenuity.com искали лекарственные препараты, нацеленные на выявленные гены, необходимые для репродукции всех четырёх штаммов. В результате найдены два препарата, регорафениб и сорафениб, нацеленные на FLT4, с высокой противовирусной активностью при нетоксичных концентрациях в клетках A549. Эти препараты являются ингибиторами киназ и представляют особый интерес, поскольку ген FLT4 кодирует белок-рецептор эпидермального фактора роста (EGF), а именно рецептор тирозинкиназы. Известно, что EGF принимает активное участие в проникновении вируса гриппа в клетку [39]. Авторами было установлено, что при применении регорафениба и сорафениба внутриклеточный уровень EGF оставался неизменным из за нарушения закисления эндосом. Далее авторы описали влияние регорафениба и сорафениба на слияние вируса гриппа с мембраной эндосомы. Они пометили вирусные частицы двумя липофильными красителями, красным Dil и зелёным DiOC18, которые генерировали между собой Фёрстеровский перенос энергии. Интактные меченые вирионы становились красными, когда происходил перенос энергии от DiOC18 к Dil, в то время как сдвиг в сторону зелёного DiOC18 свидетельствовал о том, что мембраны вируса и эндосомы сливаются и происходит рассеивание хромофоров, что уменьшает Фёрстеровский перенос энергии. Таким образом, авторами было доказано, что нарушаются
процессы, необходимые для слияния. A. Karlas и соавт. также сравнили профилактическую (за 2 ч до заражения) и терапевтическую (через 4 ч после заражения) эффективность обоих препаратов. При профилактическом подходе эти препараты никак не влияли на репродукцию вируса гриппа. При терапевтическом применении сорафениба вирусная нагрузка снижалась в 109 раз. В супернатанте клеток, обработанных регорафенибом, вирус не обнаруживался. Данная работа показывает, что внутриклеточный процесс, строго необходимый для репродукции всех штаммов вирусов гриппа, – это нуклеоцитоплазматический транспорт. Следовательно, агенты, блокирующие нуклеоцитоплазматический транспорт, представляют собой перспективных кандидатов для терапии гриппа, направленной на факторы хозяина. Авторами также изучена возможная эффективность подхода для вирусов других штаммов ВГА и ВГВ. Были протестированы шесть человеческих штаммов ВГА (A/WSN/33 (H1N1), A/Puerto Rico (H1N1), A/Hamburg/04/2009 (H1N1), A/Victoria/3/1975 (H3N2), A/Panama/2007/1999 (H3N2), A/England/691/2010/ (H3N2)), три птичьих штамма (A/Vietnam/1203/2004 (H5N1), A/FPV/Bratislava/1979 (H7N7), A/Mallard/Germany/439/2004 (H3N2)) и два штамма ВГВ (B/Thuringia/02/2006xB/Vienna/33/2006, B/Brisbane/60/2008). Сорафениб был активен в отношении всех штаммов, в то время как регорафениб не показал значительного влияния на репродукцию птичьих штаммов. По мнению авторов, данный результат связан с различием в кислотной стабильности гемагглютинина птичьих и человеческих штаммов. При меньшей стабильности гемагглютинина нужны более высокие значения pH для слияния и образования эндосомы. Особый интерес представляет тот факт, что регорафениб и сорафениб влияют ещё и на вирусы, которые находятся в отдалённых друг от друга филогенетических группах, такие как хантавирусы, вирусы везикулярного стоматита и простого герпеса 1 [36].

Перспективность подхода, основанного на подавлении активности клеточных генов, необходимых длярепродукции вируса гриппа, показана в исследовании М. Estrin и соавт. [40]. Авторы отобрали группу генов, для которых ранее была определена важная роль в цикле репродукции вируса гриппа, и оценили эффективность профилактического и терапевтического применения миРНК, направленных к этим генам как раздельно, так и в виде комбинаций из нескольких миРНК на клетках А549. В работе использовали 12 штаммов ВГА, включая серотипы H1N1, H3N2, H1N2, H3N8, H10N8, H7N3, H9N2 и миРНК, направленные к генам ATP6AP1, COPA, ARCN1, NUP98, RPS14, PGD. миРНК к мРНК вирусного белка NP использовали в качестве положительного контроля. 1-я – 4-я комбинации миРНК ингибировали репродукцию вируса более чем на 70%. Для учёта полученных данных авторы использовали метод бляшкообразования.

В исследовании J. Rupp и соавт. было продемонстрировано, что миРНК, направленные к генам, влияющим на гомеостаз меди, снижают репродукцию вируса гриппа. Чтобы оценить противовирусный эффект, в клеточной линии А549 была проведена трансфекция миРНК к гену CTR1, который является высокоаффинным транспортёром меди, в заражённых клетках. Нокдаун CTR1 привёл к снижению репродукции в 7,3 раза (через 24 ч, p = 0,04). Авторы считают, что влияние на внутриклеточный метаболизм меди с помощью миРНК можно использовать для профилактики и лечения гриппа [41].

Известно, что вирус гриппа блокирует процессы аутофагии, что, в свою очередь, приводит к накоплению аутофагосом из-за нарушения их слияния с лизосомами и способствует его репродукции внутри клетки [42]. Одну из ключевых ролей в аутофагии играют гены ATG5 и BECN1 [43][44]. R. Wang и соавт. показали, что подавление образования аутофагосом с помощью миРНК, нацеленных на ATG5 и BECN1, снижает репродукцию вируса гриппа. В клетках А549, инфицированных штаммом вируса гриппа (A/duck/Hubei/Hangmei01/2006 (H5N1)), была снижена экспрессия вирусных генов PB1, PB2, PA, NP и М2. По результатам вестерн-блоттинга, их экспрессия при использовании миРНК к ATG5 снизилась в 4 раза относительно контрольной GAPDH, тогда как при использовании миРНК к BECN1, – в 2 раза [45].

В табл. 2 представлены наиболее эффективные клеточные гены-мишени, эффективность которых была подтверждена в независимых исследованиях.

Таблица 2. Клеточные гены, нокдаун которых эффективно подавляет репродукцию вируса гриппа в культуре клеток*
Table 2. The inhibition of influenza virus reproduction in cell culture using knockdown of cellular genes*

Примечание. * Приведены клеточные гены-мишени для миРНК, нокдаун которых приводил к достоверному снижению вирусной репро- дукции в независимых исследованиях. Штаммы, использованные в исследовании: A – A/WSN/1933 (H1N1), A/New-Jersey/8/1976/ (H1N1), A/Netherlands/2629/2009 (H1N1), A/ Hong Kong/8/68 (H3N2), A/Nanchang/933/1995 (H3N2), A/Brisbane/10/2007 (H3N2), A/WSN/15/2009 (H3N2), A/NWS/34(HA), A/RI/5/57(- NA) (H1N1), A/harbour seal/New Hampshire/2011 (H3N8), A/mallard/interior Alaska/6MP0758/2006 (H10N8), A/mallard/Interior Alaska/10B- M05347R0/2010 (H7N3), Alaska/10BM02980R0/2010 (H9N2); B – A/Netherlands/602/2009 (H1N1), A/WSN/33 (H1N1); C – A/H1N1 (WSN), A/Panama/2007/1999 (H3N2), A/Vietnam/ 1203/2004 (H5N1), B/Thuringia/02/2006; D – A/H1N1 (A/WSN/33).
Note. * Findings from independent studies revealed that specific knockdown of cellular miRNA-targeted genes resulted in the inhibition of viral reproduction. Virus strains used in the study: A – A/WSN/1933 (H1N1), A/New-Jersey/8/1976/ (H1N1), A/Netherlands/2629/2009(pH1N1), A/Hong Kong/8/68(H3N2), A/Nanchang/933/1995(H3N2), A/Brisbane/10/2007(H3N2), A/WSN/15/2009(H3N2), A/NWS/34(HA), A/RI/5/57(NA)(H1N1), A/ harbour seal/New Hampshire/2011(H3N8), A/mallard/ interior Alaska/6MP0758/2006(H10N8), A/mallard/Interior Alaska/10BM05347R0/2010 (H7N3), Alaska/10BM02980R0/2010(H9N2); B – A/Netherlands/602/2009 (H1N1), A/WSN/33 (H1N1); C – A H1N1 (WSN), A/Panama/2007/1999(H3N2), A/Vietnam/ 1203/2004(H5N1), B/Thuringia/02/2006; D – A H1N1 (A/WSN/33).

Анализ научной литературы свидетельствует о большом потенциале механизмов РНК-интерференции для создания специфических противогриппозных препаратов. Учитывая, что на данный момент ни один лекарственный или профилактический препарат не обеспечивает полной защиты от гриппа, метод РНК-интерференции продолжает привлекать внимание исследователей. Однако следует понимать, что важным фактором, снижающим эффективность РНК-интерференции, является формирование резистентности вирусов к действию миРНК, направленных к вирусным генам. С точки зрения преодоления лекарственной устойчивости вируса гриппа большого внимания заслуживает применение миРНК, направленных к факторам клетки-хозяина, которые необходимы для репродукции вируса.

About the authors

E. A. Pashkov

I.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University); I.I. Mechnikov Research Institute for Vaccines and Sera

Author for correspondence.
Email: pashckov.j@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-5682-4581

Evgeny A. Pashkov – postgraduate of microbiology, virology and immunology department of Sechenov University; junior researcher of I. Mechnikov RI of Vaccines and Sera.

105064, Moscow

Россия

E. B. Faizuloev

I.I. Mechnikov Research Institute for Vaccines and Sera

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0001-7385-5083

Evgeny B. Faizuloev – Ph. D., The Head of Molecular Virology of I. Mechnikov RI of Vaccines and Sera.

105064, Moscow

Россия

O. A. Svitich

I.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University); I.I. Mechnikov Research Institute for Vaccines and Sera

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0003-1757-8389

Oxana A. Svitich – Corresponding member of RAS, MD, The head of I. Mechnikov RIof Vaccines and Sera; Professor of Microbiology, Virology and Immunology department of Sechenov University.

Moscow

Россия

O. V. Sergeev

I.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University); National Research Centre for Epidemiology and Microbiology named after the honorary academician N.F. Gamaleya

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0003-3407-2224

Oleg V. Sergeev – MD, Professor of Microbiology, Virology and Immunology department of Sechenov University;leading researcher of Comparative virology department of Central RI for Epidemiology.

Moscow

Россия

V. V. Zverev

I.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University); I.I. Mechnikov Research Institute for Vaccines and Sera

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-0017-1892

Vitaliy V. Zverev  – Corresponding Member of RAS, Doctor of Biological Sciences, Scientific Adviser of I. Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera; Professor, The Leader of Microbiology, Virology and Immunology department of Sechenov University.

Moscow Россия

References

Supplementary files