Analysis of the prevalence of HIV resistant strains to antiretroviral drug in Privolzhsky Federal District

Full Text

Введение Приволжский федеральный округ (ПФО) является территорией с очень высоким уровнем пораженности населения ВИЧ-инфекцией и показателями заболеваемости, распространенности и пораженности, превышающими среднероссийские значения, начиная с 2000 г. На 01.01.13 г. при анализе статистических отчетных форм «Сведения о мероприятиях по профилактике ВИЧ-инфекции, гепатитов В и С, выявлению и лечению больных ВИЧ», «Сведения о контингентах больных ВИЧ-инфекцией», поступивших из 14 территориальных центров по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями, в ПФО выявили 166 520 ВИЧ-инфицированных, что составляет около 1/4 общего числа ВИЧ-позитивных жителей России. Более 65% территорий ПФО имеют высокий и очень высокий уровень пораженности населения. В ходе реализации приоритетного национального проекта «Здоровье» в последние годы существенно увеличился охват лечением ВИЧ-инфицированных, их общее количество на 01.01.13 г. составило 44 803. Необходимо отметить, что около 30% лиц, живущих с ВИЧ (ЛЖВ) и получающих высокоактивную антиретровирусную терапию (АРТ), прерывали ее по разным причинам. В это число вошли и умершие пациенты, доля которых составила более 1/3 (39%) от прервавших. В 2010-2011 гг. наблюдался рост доли пациентов, которым заменялась схема терапии ввиду ее неэффективности, что составило 3,6 и 3,4% от числа получавших высокоактивную АРТ соответственно, в 2009 г. - 2,9%. Все это, несомненно, делает актуальным исследования резистентности ВИЧ к антиретровирусным (АРВ) препаратам. Материалы и методы В Приволжском окружном центре по профилактике и борьбе со СПИД исследования резистентности ВИЧ к АРВ-препаратам проводятся с 2008 г. Всего проанализировано 702 образца плазмы крови у ВИЧ-инфицированных, из них нуклеотидную последовательность определяли у 594 (84,6%). Свыше 15% образцов не подлежали исследованию в связи с нарушениями преаналитического этапа (несоответствие в сроках доставки, уровня вирусной нагрузки и прочее). Провели исследование 44 образцов плазмы крови у ВИЧ-инфицированных с недавней сероконверсией (предполагаемое заражение произошло в течение года), проживающих на территории ПФО и не получавших терапию ранее, с целью оценки уровня распространенности первичной резистентности. Большинство же анализируемых образцов поступало от лиц, получающих лечение. Всего исследовали 550 образцов плазмы у ВИЧ-позитивных пациентов, получающих АРТ с вирусологической и иммунологической неэффективностью. В том числе из Нижегородской области (135 образцов); Мордовии (12 образцов); Саратовской области (13 образцов); Самарской области (94 образца); Чувашии (58 образцов); Кировской области (31 образец); Марий Эл (13 образцов); Пензенской области (39 образцов); Удмуртии (22 образца); Ульяновской области (85 образцов); Оренбургской области (45 образцов); Башкортостана (3 образца). Исследования проводили методом секвенирования (автоматический секвенатор ABI Prism 3100 Applied Byosystems, США) с использованием коммерческой тест-системы ViroSeqTM HIV-1 Genotyping System v.2.0. фирмы Abbott (США) с применением программного обеспечения системы генотипирования ViroSeq «HIV-1 Y318F 1,3% К 103N 8,3% Y 181С 2,7% К101Е 7,2% K70R К 65R 0,8% V 1181 2,5% М 184V/I 20,6% Рис. 1. Частота выявления мутаций, влияющих на устойчивость к НИОТ. Рис. 2. Частота выявления мутаций, влияющих на устойчивость к ННИОТ. A 62V 34,4% G190S/A 13,8% Штриховкой отмечены мутации, определяющие высокий уровень устойчивости к НИОТ. Штриховкой отмечены мутации, определяющие высокий уровень устойчивости к ННИОТ. Genotyping System» v.2.8 и базы данных Стэнфордского университета. Результаты I50L L63P 4,5% V 771 13,1% L 101 9,5% АЛ ОСІ Рис. 3. Частота выявления мутаций, влияющих на устойчивость к ИП. Штриховкой отмечены мутации, определяющие высокий уровень устойчивости к ИП. Среди АРТ-наивных пациентов обнаружили высокую (64,7%) частоту встречаемости мутации А 62V в гене обратной транскриптазы. В гене протеазы спектр мутаций был представлен следующими позициями: M 36I (8,8%), V 77I (8,8%), L 10I (8,8%), A 71T (2,9%). В целом среди этой группы обследованных все выявленные мутации непосредственно не влияли на развитие устойчивости к АРВ-препаратам. Среди лиц, получающих лечение, у 85 (21,4%) выявили резистентные штаммы ВИЧ более чем к одному классу препаратов. В целом в данной группе пациентов частоту встречаемости мутаций высокого уровня устойчивости к нуклео-зидным ингибиторам обратной транскриптазы (НИОТ) отметили у 23,8% (рис. 1). У 20,6% больных идентифицировали мутацию M 184V/I, которая является причиной высокого уровня резистентности к ламивудину. Также наблюдали высокую частоту мутации А62У (34,4%) и множество мутаций, которые определили как мутации полиморфизма. Частота встречаемости мутаций высокого уровня устойчивости к ненуклеозидным НИОТ (ННИОТ) в целом составила 26,9%. Формирование резистентности к ННИОТ связано с наличием мутаций в следующих позициях: K103N, G190S[A, Y181C/V, которые определяли устойчивость вируса к делавердину, эфавиренцу, невирапину (рис. 2). Частота встречаемости мутаций высокого уровня устойчивости к ингибиторам протеазы (ИП) была значительно меньше, чем к предыдущим двум классам препаратов, - 1,2% (рис. 3), что, возможно, связано с относительно поздним по сравнению с ингибиторами обратной транскриптазы применением данных препаратов в схемах лечения. Выявленные мутации устойчивости определяли резистентность к вирасепту (нельфинавир) и атазанавиру. Отметили также высокую частоту встречаемости мутации М 36I (28,1%) в гене протеазы. В целом результаты нашего исследования согласуются с данными ряда авторов, полученными при изучении уровня первичной резистентности и резистентности на фоне приема АРВ-препаратов на территориях Дальневосточного, Южного и Северо-Кавказского федеральных округов России [1-3]. Выводы 1. Среди АРТ-наивных ВИЧ-позитивных пациентов мутаций, приводящих к развитию резистентности, не выявили. 2. У ВИЧ-позитивных пациентов, получающих лечение, отметили высокий уровень резистентности к лами-вудину, невирапину, эфавиренцу. 28,1% 3. Выявили высокую частоту встречаемости мутации А62У в гене обратной транскриптазы среди АРТ-наивных пациентов и у лиц, получающих лечение. 4. Установили, что частота встречаемости мутаций высокого уровня устойчивости к ингибиторам протеазы ниже, чем к ингибиторам обратной транскриптазы. 5. Множественная устойчивость к двум классам препаратов или более встречалась в 21,4% случаев. 6. Необходимо систематическое проведение исследований по определению первичной резистентности в связи с увеличением числа больных, получающих терапию, и количеством регионов с длительным опытом применения высокоактивной АРТ. 7. При неэффективности терапии определение резистентности ВИЧ к АРВ-препаратам необходимо для выбора оптимальной схемы лечения.

References

Supplementary files