Том 48, № 5 (2003)

Наиболее перспективными направлениями использования моноклональных антител (МКАт) в вирусологических исследованиях с возбудителями вирусных геморрагических лихорадок являются изучение антигенной структуры вирусов и создание диагностических препаратов для индикации и идентификации возбудителей этих заболеваний. Рассмотрены методические особенности получения МКАт к возбудителям вирусных геморрагических лихорадок и данные по их практическому использованию.

Приведены результаты изучения распределения различных генетических вариантов (субтипов) вируса гепатита С (ВГС), циркулирующих на территории Екатеринбурга и Челябинска среди заболевших разных социально-возрастных групп населения. Показано преобладание субтипа 1Ь среди инфицированных гепатитом С пациентов отделений гемодиализа (83,3%) и Детского онкогематологического центра (84,6%). Обобщенные результаты обследования больных гепатитом С в инфекционных отделениях (97 человек) не выявили существенных отличий от данных по Москве и Санкт-Петербургу в распределении субтипов ВГС. Однако анализ по городам Уральского региона показал, что в Челябинске встречаемость субтипа 1Ь в 2 раза выше, чем субтипа За, тогда как в Екатеринбурге их соотношение составило 1:1. Также зарегистрирована неравномерность в распределении субтипов ВГС в зависимости от возраста пациентов. В возрастной группе от 15 до 27 лет отмечено доминирование субтипа За, в то время как у лиц до 15 лет и старше 27 лет сохраняется преобладание субтипа 1Ь. Это позволяет сделать вывод о перераспределении частот встречаемости отдельных субтипов ВГС при сохранении их спектра на данных территориях, связанном с ростом числа наркоманов среди молодежи, в среде которых преобладает субтип За.

Получены новые водорастворимые антивирусные химиопрепараты, содержащие от 10 до 30% производных адамантана (амино-, аменометил-, аминоэтил-, аминопропиладамантан и ремантадин), конъюгированные с поликарбоксилатными матрицами сополимеров дивинилового эфира и малеинового ангидрида (ДИВЭМА). Установлены низкая цитотоксичность полимерных препаратов (в 4-10 раз ниже, чем у ремантадина) и широкий спектр антивирусного действия в отношении вирусов гриппа, в том числе резистентных к реманта- И дину штаммов A/PR/8/34 (H1N1) и В/Санкт-Петербург/71/77, вирусов герпеса типа 1, парагриппа типов 1 и 3 А респираторно-синцитиального вируса. Снижение инфекционного титра вирусов при репродукции в чувст- $ вительных клетках составляло более 2,0 ТИД50; при низких дозах заражения от 1 до 100 ИДМ наблюдается 100% подавление вирусспецифических синтезов, регистрируемое ИФА или в реакции гемагглютинации. . Эффективность антивирусного действия зависит от молекулярной массы препарата и структуры химиче- £, ской связи между ядром адамантана и полимерной матрицей.

Представлены экспериментальные данные о противовирусной активности иммуномодулятора пептидной природы "Гепон" при инфекциях, обусловленных вирусами простого герпеса типов 1 и 2 в опытах in vitro и in vivo. Препарат оказался нетоксичным и не обладал вирулицидными свойствами. В опытах в культуре клеток Vero на фоне низкой множественности инфицирования было отмечено противовирусное действие препарата "Гепон". Максимальный эффект состоял в 100-кратном снижении титра вируса при использовании концентрации 6,25 мкг/мл и выше в варианте профилактического введения за 24 ч до заражения. Противовирусный эффект при профилактическом методе применения препарата был достоверно выше, чем при его использовании по лечебной схеме (через 1 ч после инфицированиях). В опытах на мышах при внутрибрюшинном введении инфицирующей дозы 10 ЛД50/мышь вируса простого герпеса типа 2 препарат "Гепон" в дозах 0,1 и 1 мкг/мышь обладал достоверными защитными свойствами (36% защиты при увеличении средней продолжительности жизни инфицированных мышей на 1,9 дня).

Представлены данные об изменениях содержания субпопуляций лимфоцитов крови у больных офтальмогерпесом. Они характеризовались увеличением количества клеток крови, экспрессирующих поверхностные антигены активации HLA-DR*, CD71* и CD95*, снижением числа T-хелперов, величины иммунорегуляторного индекса. Более значимое увеличение числа С095*-лимфоцитов при глубоких формах офтальмогерпеса по сравнению с менее тяжелым течением этой инфекции глаз может служить прогностическим критерием. Значительные сдвиги, происходящие в популяции Т-клеток, указывают на состояние напряженности иммунного ответа, вызванного усилением репродукции вируса простого герпеса, и свидетельствуют об определенном дефиците механизмов клеточной защиты.

Показана возможность использования амплификации фрагмента гена HN в сочетании с нуклеотидным секвенированием кДНК для индикации и штаммовой дифференциации вируса парагриппа-3 крупного рогатого скота. Сравнительный анализ первичной структуры изучаемого фрагмента гена HN показал, что среди исследованных штаммов и изолятов вируса выделяются 2 генетические группы. Одну из них образуют североамериканские штаммы вируса и российские изоляты, первичная структура которых имеет высокий уровень гомологии с первичной структурой штамма SF-4/32, а другую - российские изоляты вируса, имеющие высокий уровень гомологии данного фрагмента с последовательностями японских штаммов. Наибольший уровень различий между исследованными штаммами и изолятами вируса составил около 8% при сравнении нуклеотидных последовательностей и около 4% при сравнении соответствующих им аминокислотных последовательностей.