Том 49, № 3 (2004)

Как показали исследования, эпидемический подъем заболеваемости гриппом в сезоне 2002-2003 гг. в России был обусловлен циркуляцией вирусов гриппа А(Н1 N1), А(НЗ№) и В. Центром экологии и эпидемиологии гриппа изучено 178 эпидемических штаммов, среди них 41 штамм A(H1N1), 116 - A(H3N2), 21 - гриппа В. Все штаммы были изолированы на культуре клеток MDCK. Параллельная изоляция на куриных эмбрионах, а также перевод с MDCK на куриные эмбрионы были эффективны только для вирусов гриппа A(H1N1). Антигенный анализ показал, что все вирусы A(H1N1) были вариантами эталона А/Новая Каледония/20/99. Вирусная популяция штаммов A(H3N2) была гетерогенна по антигенным свойствам: среди изолятов встречались варианты, подобные эталонам А/Москва/10/99, А/Панама/2007/99, и штаммы, слабо реагирующие с сыворотками обоих эталонов, возможно, близкие к эталону А/Фуцзянь/411/02. Все эпидемические штаммы вируса гриппа В по антигенным свойствам гемагглютинина входили в группу вирусов, подобных В/Виктория/2/87, и были антигенными вариантами эталона В/Гонконг/22/01. Это свидетельствует о возврате в активную циркуляцию вирусов гриппа В с антигенной структурой гемагглютинина группы вирусов, подобных В/Виктория/2/87, отсутствовавших в России более 10 лет. Анализ антигенных свойств нейраминидаз (NA) этих эпидемических штаммов выявил различную степень родства с NA эталонов обеих эволюционных групп - подобных В/Виктория/2/87 и В/Ямагата/16/88. Исследование парных сывороток от больных выявило прирост антител к эталонам вирусов гриппа A(H1N1), A(H3N2) и В данного сезона, что подтвердило вирусологические данные.

Рецепторные свойства вирусов гриппа (ВГ) Н1 и НЗ, изолированных от уток, свиней и людей, изучены с использованием природных и синтетических сиалогликоконъюгатов. Показано, что вирусы, изолированные от разных хозяев, адаптируются к рецепторам клеток хозяина. У ВГ человека увеличивается сродство к б'-сиалиллактозамину по мере замен аминокислот (в позициях 138,190,194 и 225), константных у ВГ птиц. Некоторые вирусы свиней обнаруживают адаптацию к человеческому рецептору - б'-сиалиллактозамину. Однако еще большее сродство все тестированные вирусы гриппа свиней, относящиеся к различным эволюционным ветвям, приобрели к сульфатированному и фукозилированному производному З'-сиалиллактозамина (Neu5Aca2-3Gaipi-4(Fuca1- 3){6-sulfo)GlcNAcp).

Приведены современные данные по этиотропной лекарственной терапии (химиотерапии) распространен- ных и социально значимых вирусных инфекций (гриппа, острых респираторных заболеваний, герпесви- русных инфекций, гепатитов, СПИДа, особо опасных вирусных инфекций). В обзоре отражен вклад отече- ственных ученых в создание противовирусных химиопрепаратов.

Проведены, комплексные вирусологические, серологические и молекулярно-генетические исследования экологии вируса Западного Нила (ВЗН) и некоторых других арбовирусов в различных экосистемах на территории Астраханской области и Республики Калмыкия. Выявлены основные виды переносчиков (комаров и клещей, птиц и млекопитающих), участвующих в циркуляции вируса в природных и антропогенных биоценозах. Фиологенетическое изучение выделенных штаммов и проб, положительных в ОТ-ПЦР, показало абсолютное доминирование I генотипа вируса, наиболее близкого к штаммам из США и Израиля. Вместе с тем эпидемические штаммы имели до 6% нуклеотидных различий с историческими штаммами, выделенными в этом же регионе 20-30 лет назад. Выявлена также циркуляция IV генотипа вируса, обладающего сниженной патогенностью. Это, возможно, обеспечивает формирование выраженной иммунной прослойки без эпидемических последствий. Анализ результатов комплексных исследований по экологии ВЗН указывает на то, что эпицентр эндемичной территории находится в средней части дельты Волги.

С целью выявления потенциальных генетических детерминант вирулентности представителей рода Arterivirus проводили сравнение первичной структуры геномов 3 вариантов североамериканского вирулентного штамма вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней (РРСС) NADC-8. Кроме вирулентного, исследовали аттенуированный вариант, полученный после 251-го пассажа в культуре клеток, а также промежуточный вариант, выделенный от свиньи после частичной реверсии аттенуированного вируса. Геном аттенуированного варианта приобрел 3-нуклеотидную делецию и 50 мутаций по сравнению с вирулентным предшественником. Сравнение аттенуированного и промежуточного вариантов вируса выявило 8 нуклеотидных мутаций, приводящих к замене 6 аминокислот в 3 открытых рамках считывания (ORF1a, ORF1b и ORF6). С целью экспериментальной проверки функциональной роли найденных мутаций была получена библиотека из 32 клонов в Е. coli в плазмидном векторе pACYC177, содержащая полноразмерные копии генома аттенуированного варианта штамма NADC-8 (251) вируса РРСС. На основе клонированной ДНК были получены in vitro полноразмерные аналоги (+-цепи РНК) вирусного генома, содержащие КЭП- структуры и полиаденилированные. Из 8 проанализированных клонов 7 копий вирусного генома оказались инфекционными и их введение в клетки MARC-145 привело к получению инфекционных вирусов РРСС; 4 полученных рекомбинантных вируса имели сниженные ростовые характеристики, а 3 были схожи с родительским штаммом. Данная технология (обратная генетика) позволит вносить изменения в вирусный геном для проведения прикладных и фундаментальных исследований артеривирусов.