Генетическая стабильность HA-, Na- и NS-генов рекомбинантного векторного вируса Flu-NS1-124-Omp16 (H5N1), экспрессирующего бруцеллезный ген

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Сконструирован рекомбинантный штамм вируса гриппа Flu-NS1-124-Omp16 (H5N1), экспрессирующий бруцеллезный ген Omp16, на основе технологии обратной генетики для создания векторной противобруцеллезной вакцины. Полученный рекомбинантный штамм является генетически стабильным. Стабильность подтверждена сравнительным анализом нуклеотидных последовательностей HA-, NA- и NS-генов рекомбинантного векторного вируса Flu-Ns1-124-Omp16 (H5N1), экспрессирующего ген Omp16 (GenBank: ААА59360.1) Brucella abortus. Сравнительный генетический анализ показал, что нуклеотидная последовательность гена NS 1-го и 5-го пассажных уровней вируса Flu-Ns1-124-Omp16 (H5N1) на 100% еоответствует исходному участку 12ААS2TC_124omp16g, содержащему химерный Ns1-124-Omp16 в составе ДнК-плазмиды pHW2000. в результате сравнительного генетического анализа установлена 100% идентичность нуклеотидных последовательностей НА- и NA-генов 1-го и 5-го пассажных уровней рекомбинантного штамма Flu-ns1-124-Omp16 (H5N1) с генами НА и NA штамма А/АstanaRG/6:2/2009 (H5N1). Было показано, что рекомбинантный векторный вирус Flu-Ns1-124-Omp16 (H5N1), экспрессирующий бруцеллезный ген Omp16, сохраняет генетическую стабильность на протяжении 5 пассажей на 10-суточных развивающихся куриных эмбрионах (РКЭ).

Об авторах

С. О. Садикалиева

НИИ проблем биологической безопасности

Автор, ответственный за переписку.
Email: t.m.tlenchieva@mail.ru

Садикалиева Сандугаш Оразбековна, мл. науч. сотр.

080409, пос. Гвардейский

Казахстан

К. Т. Султанкулова

НИИ проблем биологической безопасности

Email: fake@neicon.ru
080409, пос. Гвардейский Казахстан

К. А. Шораева

НИИ проблем биологической безопасности

Email: fake@neicon.ru
080409, пос. Гвардейский Казахстан

В. М. Строчков

НИИ проблем биологической безопасности

Email: fake@neicon.ru
080409, пос. Гвардейский Казахстан

О. В. Червякова

НИИ проблем биологической безопасности

Email: fake@neicon.ru
080409, пос. Гвардейский Казахстан

В. Л. Зайцев

НИИ проблем биологической безопасности

Email: fake@neicon.ru
080409, пос. Гвардейский Казахстан

К. К. Табынов

НИИ проблем биологической безопасности

Email: fake@neicon.ru
080409, пос. Гвардейский Казахстан

Н. Т. Сандыбаев

НИИ проблем биологической безопасности

Email: fake@neicon.ru
080409, пос. Гвардейский Казахстан

А. Р. Сансызбай

НИИ проблем биологической безопасности

Email: fake@neicon.ru
080409, пос. Гвардейский Казахстан

А. Ю. Егоров

HSC Development GmbH

Email: fake@neicon.ru
Tульн Австрия

Список литературы

  1. Racloz V., Schelling E., Chitnis N., Roth F., Zinsstag J. Persistence of brucellosis in pastoral systems. Rev. Sci. Tech. 2013; 32 (1): 61–70.
  2. Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO) (2010). Brucella melitensis in Eurasia and the Middle East. Proc. FAO technical meeting in collaboration with WHO and OIE, May 2009, Rome. FAO Animal Production and Health Proceedings No. 10. FAO, Rome. Available at: www.fao.org/docrep/012/i1402e/i1402e00.pdf ( Accessed on 5 April 2013).
  3. Egorov A., Brandt S., Sereinig S., Romanova J., Ferko B., Katinger D. et.al. Transfectant influenza A viruses with long deletions in the NS1 protein grow efficiently in Vero cells. J. Virol. 1998; 72(8): 6437–41.
  4. Fernandez-Sesma A. The influenza virus NS1 protein: inhibitor of innate and adaptive immunity. Infect. Disord. Drug Targets. 2007; 7(4): 336–43.
  5. Ferko B., Stasakova J., Romanova J., Kittel C., Sereinig S. Katinger H. et al. Immunogenicity and protection efficacy of replication-deficient influenza A viruses with altered NS1 genes. J. Virol. 2004; 78: 13037–45.
  6. Garcia-Sastre A., Biron C.A. Type 1 interferons and the virus-host relationship: a lesson in detente. Science. 2006; 312: 879–82.
  7. Строчков В.М., Червякова О.В., Султанкулова К.Т., Мамадалиев С.М., Зайцев В.Л., Шораева К.А. и др. Рекомбинантные штаммы А/AstanaRG/6:2/2009 и А/AstanaRG/5:3/2009 вируса гриппа, полученные методом обратной генетики. В кн.: Материалы международной конференции «Современное состояние генетики в Казахстане». Алматы; 2010; 63–5.
  8. Игнатьева А.В., Руднева И.А., Тимофеева Т.А., Шилов А. A., Забережный А.Д., Алипер Т.И. и др. Высокопродуктивный вирусреассортант, содержащий гемагглютинин и нейраминидазу пандемического вируса гриппа A/MOSCOW/01/2009(Н1N1). Вопросы вирусологии. 2011; 56 (4): 9–14.
  9. Гоцкина Т.М., Рыскельдинова Ш.Ж., Асанжанова Н.Н., Кыдырбаев Ж.К., Кожамкулов Е.М., Инкарбеков Д.И. и др. Возможность использования морских свинок как модельных животных для изучения иммунобиологических свойств рекомбинантных вирусов гриппа А, экспрессирующих бруцеллезные белки L7/L12 и Omp16. В кн.: Материалы международной научной конференции молодых ученых «Инновационное развитие науки в обеспечении биологической безопасности». Гвардейский; 2013; 47–54.
  10. De Wit E., Spronken M.I., Bestebroer T.M., Rimmelzwaan G.F., Osterhaus A.D., Fouchier R.A. Efficient generation and growth of influenza virus A/PR/8/34 from eight cDNA fragments. Virus Res. 2004; 103(1-2): 155–61.
  11. Hoffmann E., Neumann G., Kawaoka Y., Hobom G., Webster R.G. A DNA transfection system for generation of influenza A virus from eight plasmids. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010; 97(11): 6108–13.
  12. Ставицкий С.Б., Носков А.Н., Кравченко Т.Б. Молекулярная вакцина для профилактики бруцеллеза. Патент РФ № 2285538, 2006.
  13. WHO Guidance on development of influenza vaccine reference viruses by reverse genetics. Available at: whqlibdoc.who.int/hq/2005/WHO_CDS_CSR_GIP_2005.6.pdf.
  14. Leclercq S., Harms J.S., Oliveira S.C. Enhanced efficacy of DNA vaccines against an intracellular bacterial pathogen by genetic adjuvants. Curr. Pharm. Biotechnol. 2003; 4: 99–107.
  15. Pasquevich K.A., Estein S.M., Garcia Samartino C., Zwerdling A., Coria L.M., Barrionuevo P. et al. Immunization with recombinant Brucella spp. outer membrane proteins Omp16 or Omp19 in adjuvant induces specific CD41 and CD81 T cells as well as systemic and oral protection against Brucella abortus infection. Infect. Immun. 2008; 77(1): 436–45.
  16. Luo D., Ni B., Li P., Shi W., Zhang S., Han Y. et al. Protective immunity elicited by a divalentDNAvaccine encoding both the L7/L12 and Omp16 genes of Brucella abortus in BALB/c mice. Infect. Immun. 2006; 74: 2734–41.
  17. Wang X., Li M., Zheng H., Muster T., Palese P., Beg A.A. et al. Influenza A virus protein prevents activation of NFk-B and induction of alpha/bets interferon. J. Virol. 2000; 74(24): 11566–73.
  18. Kochs G., Martínez-Sobrido L., Lienenklaus S., Weiss S., GarcíaSastre A., Staeheli P. Strong interferon-inducing capacity of a highly virulent variant of influenza A virus strain PR8 with deletions in the NS1 gene. J. Gen. Virol. 2009; 90 (12): 2990–4.
  19. Liu M. Zhang Y., Liu C.G., Pan W.Q., Liu C.N., Yang T. Generation of High-yield vaccine strain wholly derived from Avian Influenza Viruses by Reverse Genetics. Chin. J. Biotech. 2006; 22: 720–6.
  20. Stech J., Garn H., Wegmann M., Wagner R., Klenk H.D. A new approach to an influenza live vaccine: modification of the cleavage site of hemagglutinin. Nat. Med. 2005; 11(6): 683–9.
  21. Hoffmann E., Webster R. G. Unidirectional RNA polymerase I-polymerase II transcription system for the generation of influenza A virus from eight plasmids. J. Gen. Virol. 2000; 81(12): 2843–7.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Садикалиева С.О., Султанкулова К.Т., Шораева К.А., Строчков В.М., Червякова О.В., Зайцев В.Л., Табынов К.К., Сандыбаев Н.Т., Сансызбай А.Р., Егоров А.Ю., 2015

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС77-77676 от 29.01.2020.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах