Определение уровня иммунной прослойки населения Гвинейской Республики к некоторым арбовирусам

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Ежегодно в странах Западной Африки от острых лихорадочных заболеваний погибают свыше 250 тыс. человек. Бо́льшую часть в общей структуре регистрируемых лихорадок традиционно занимают малярия и брюшной тиф. Однако эти сведения не в полной мере отражают реальные данные обо всей конъюнктуре заболеваемости в западноафриканском регионе. Это связано с тем, что в качестве критериев постановки диагноза используются только клинические признаки инфекционного процесса, и не исключена вероятность того, что некоторое количество заболеваний может быть вызвано арбовирусами. Выявление специфических антител (АТ) к возбудителям инфекционных болезней в сыворотках крови жителей той или иной местности является достоверным показателем циркуляции этих патогенов на определённой территории.

Цель работы – определение уровня иммунной прослойки населения Гвинейской Республики (Гвинеи) к ряду арбовирусов: денге (DENV), Западного Нила (WNV, ВЗН) (семейство Flaviviridae); Крымской-Конго геморрагической лихорадки (CCHFV, ККГЛ), Батаи (Batai virus), Бханджа (BHAV) (порядок Bunyavirales); чикунгунья (CHIKV) и Синдбис (SINV) (семейство Togaviridae).

Материал и методы. Для работы собрана панель из 2620 образцов сывороток крови людей, проживающих во всех ландшафтно-географических зонах Гвинеи. Выявление АТ класса IgG проводилось с помощью иммуноферментного анализа (ИФА).

Результаты. Всего за период исследования АТ к вирусу Батаи выявлены в 144 (5,5%) образцах; Бханджа – в 58 (2,2%); ВЗН – в 892 (34,0%); денге – в 659 (25,2%); ККГЛ – в 58 (2,2%); чикунгунья – в 339 (12,9%) и Синдбис – в 52 образцах (2,0%).

Обсуждение. Полученные результаты указывают на наличие иммунной прослойки населения всех ландшафтно-географических зон Гвинейской Республики к данному спектру арбовирусов, что является подтверждением их активной циркуляции на этой территории.

Заключение. С учётом эпидемиологической значимости арбовирусных инфекций сохраняется актуальность дальнейшего изучения вопроса о доле инфекционных агентов этой экологической группы в общей структуре лихорадочных заболеваний, зарегистрированных на территории Гвинеи.

Полный текст

Введение

Согласно официальным данным, представленным Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ), в странах Западной Африки от острых лихорадочных заболеваний каждый год погибают более 250 тыс. человек [1]. При этом основную долю в общей структуре нозологий регистрируемых лихорадок традиционно занимают малярия и брюшной тиф. Однако указанные данные не дают полного представления обо всей конъюнктуре заболеваемости в западноафриканском регионе. Это чаще всего связано с тем, что в качестве критериев постановки диагноза используются только клинические признаки инфекционного процесса. Лабораторные исследования при этом либо отсутствуют, либо используются недостаточно [2][3]. После завершения эпидемии болезни, вызванной вирусом Эбола (Filoviridae; Ebolavirus: Zaire ebolavirus) (БВВЭ), которая охватила территории Гвинейской Республики (Гвинеи), Республики Либерии и Республики Сьерра-Леоне в 2014–2016 гг., уровень лабораторной диагностики инфекционной патологии в данном регионе значительно повысился. В то же время, несмотря на отработанную схему индикации отдельных возбудителей, часто регистрируются случаи заболеваний, этиологический агент которых установить не удаётся. Возможно, это объясняется отсутствием осведомлённости медицинского персонала в отношении других инфекций, а также ограниченным набором диагностических препаратов. При этом не исключена вероятность того, что определённое количество лихорадочных заболеваний может быть вызвано арбовирусами, которые нередко даже не рассматриваются в качестве возможного инфекционного агента [4]. В связи с этими причинами научные данные о распространении вирусов данной экологической группы в Западной Африке, а также достоверные и актуальные сведения по заболеваемости арбовирусными инфекционными болезнями среди населения этого региона в настоящее время отсутствуют.

Государство Гвинея находится в западной части Африканского континента. Население страны по данным на август 2021 г. составляет около 14 млн человек и очень разнообразно по этническому составу [5]. Территорию государства условно разделяют на 4 ландшафтно-географические зоны (рис. 1). Нижняя, или Приморская Гвинея, расположенная на побережье Атлантического океана, представляет собой плоскую низменность с высотами <150 м над уровнем моря. Через другую зону – Среднюю Гвинею – проходит большой песчаниковый массив Фута-Джаллон с пиками, достигающими 1400 м. Это природное образование пересекает страну с севера на юг. В данном регионе преобладают ландшафты саванн, встречаются горные луга. К востоку от Фута-Джаллон, на равнинах бассейна верхнего течения р. Нигер, находится Верхняя Гвинея – район африканской саванны. В Лесной Гвинее, располагающейся на юго востоке страны, большинство ландшафтов также составляют саванны, но в долинах рек сохранились и участки тропического леса. Для Гвинеи характерна чётко выраженная сезонность климата. Влажный сезон длится с июня по октябрь (на побережье несколько дольше, чем в глубине страны), сухой – с ноября по май. Влажность воздуха зависит от местности. Так, на побережье, в районе г. Конакри, среднегодовое количество осадков достигает 4300 мм, при этом в регионах внутри страны выпадает в среднем 1300 мм в год. Среднемесячные температуры на большей части территории составляют от 18 до 28 °С [6].

Рис. 1. Ландшафтно-географические зоны Гвинеи.
Fig. 1. Landscape and geographical zones of Guinea.

На территории Гвинейской Республики в 70-е – 80-е гг. прошлого столетия на базе советско-гвинейской научно-исследовательской вирусологической и микробиологической лаборатории была начата работа по изучению распространения арбовирусов. Выявлена циркуляция вирусов денге (DENV), жёлтой лихорадки (YFV), Западного Нила (WNV, ВЗН), Зика (ZIKV) (семейство Flaviviridae); Крымской-Конго геморрагической лихорадки (CCHFV, ККГЛ) (семейство Nairoviridae); лихорадки долины Рифт (Рифт-Валли) (RVFV), Батаи (Batai virus) (семейство Peribunyaviridae, порядок Bunyavirales); чикунгунья (CHIKV) (семейство Togaviridae) и других вирусных агентов, которые способны вызывать лихорадочные заболевания и гибель людей [7]. Маркёры арбовирусов также обнаружены в биоматериалах от носителей и переносчиков, отловленных в разных географических зонах Гвинеи [7][8]. Однако в связи с тяжёлой экономической ситуацией, складывавшейся в стране в последние десятилетия, работа по изучению циркуляции возбудителей арбовирусных инфекций на её территории была прервана более чем на 30 лет. В настоящее время исследования в этом направлении возобновлены.

Одним из основных показателей циркуляции арбовирусов в определённом регионе и наличия природных очагов арбовирусных инфекционных болезней является выявление специфических антител (АТ) к возбудителю в сыворотках крови людей, проживающих в данной местности [9]. В предыдущих исследованиях проведена работа по определению уровня иммунной прослойки к арбовирусам населения провинции Киндиа (Гвинейская Республика). В результате получены данные, указывающие на достаточно высокий уровень содержания специфических АТ к ВЗН, вирусам денге, ККГЛ и чикунгунья [10][11]. В последующем исследования осуществляли уже на всей территории Гвинеи, а спектр изучаемых арбовирусов был расширен.

Таким образом, целью настоящей работы было определение уровней иммунной прослойки населения различных ландшафтно-географических зон Гвинейской Республики к ряду арбовирусов: денге, Западного Нила (сем. Flaviviridae), ККГЛ (сем. Nairoviridae), Батаи (сем. Peribunyaviridae), Бханджа (семейство Phenuiviridae), Чикунгунья и Синдбис (семейство Togaviridae) методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Материал и методы

Исследования осуществлялись российскими и гвинейскими специалистами на базе Российско-гвинейского центра эпидемиологии и профилактики инфекционных болезней, который открыт в 2017 г. и расположен на территории Исследовательского института прикладной биологии в г. Киндиа, Гвинейская Республика [12].

Сыворотки крови практически здоровых людей были собраны в региональных госпиталях гвинейскими специалистами и доставлены в лабораторию с соблюдением правил биологической безопасности и температурного режима. Сбор материала проводили по предварительной договорённости после подписания соответствующих документов. В связи с тем, что на территории Гвинеи в 2014– 2016 гг. отмечалась эпидемия БВВЭ, а также с целью обеспечения биобезопасности при проведении научных исследований полученные образцы крови протестировали методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) с использованием набора реагентов «АмплиCенс EBOV Zaire-FL» (ООО «Интерлабсервис», Россия). Во всех случаях РНК вируса Эбола не обнаружена. Материал исследовали также методом иммунохроматографического анализа (ИХА) для выявления антигенов малярийных плазмодиев (Plasmodium malariae, Pl. vivax, Pl. falciparum, Pl. ovale) с наборами реагентов SD BIOLINE Malaria Ag P.f/Pan (Standart Diagnostics, Inc., Южная Корея). Образцы, в которых присутствовали антигены возбудителей малярии, в последующую работу не вошли.

Таким образом, для исследования была составлена панель из 2620 сывороток крови людей, проживающих во всех 4 ландшафтно-географических зонах Гвинеи. В протокол включили представителей возрастных групп от 1 до 90 лет: 1224 (46,7%) женщин и 1396 (53,3%) мужчин.

Полученные сыворотки изучали методом ИФА с целью выявления специфических АТ класса IgG к вирусам денге, ВЗН, ККГЛ, Батаи, Бханджа, Синдбис и чикунгунья. Образцы тестировали с применением комплектов реагентов производства ЗАО БТК «Биосервис» (Россия) в соответствии с инструкциями, прилагаемыми к препаратам. Для исключения наличия острой стадии заболевания и вероятности получения неспецифических результатов все сыворотки дополнительно исследовали методом ИФА на наличие иммуноглобулинов класса IgM ко всем перечисленным выше вирусам с использованием наборов того же производителя. Образцы, в которых выявляли одновременно АТ класса IgG к 3 и более возбудителям, в дальнейшее исследование не включали. В связи с большим количеством положительных образцов и возможностью перекрёстных реакций все пробы, в которых обнаруживали специфические АТ к ВЗН и вирусам денге, дополнительно протестировали с наборами реагентов «Anti-West Nile Virus ELISA (IgG)» и «Anti-Dengue Virus ELISA (IgG)» (Euroimmun, Германия). Во всех случаях результаты совпали с полученными ранее. Из указанного перечня диагностических препаратов регистрационные удостоверения оформлены для наборов «БиоСкрин-ВЗН (IgM)», «БиоСкрин-ВЗН (IgG)» (№ ФСР 2012/13840), выпускаемые ЗАО «Биосервис» и «Anti-West Nile Virus ELISA (IgG)» «Anti-Dengue Virus ELISA (IgG)» (ФСЗ 2010/07294), производства «Euroimmun» (Германия), остальные предназначены для научных исследований.

При проведении статистической обработки результатов рассчитывали долю положительных ответов в каждой выборке и 95% доверительные интервалы (ДИ) для долей иммунной прослойки по методу Уилсона [13]. Статистически значимые различия уровня иммунной прослойки жителей Лесной Гвинеи со средним показателем по стране оценивали с использованием критерия согласия Пирсона χ2 (р = 0,05). Наличие или отсутствие статистически значимых различий выявляли путём сопоставления величин ДИ.

Исследование проводилось при информированном согласии пациентов. Протокол исследования одобрен решением Национального этического комитета Министерства Здравоохранения Гвинейской Республики (Протокол № 129/CNERS/16 от 31.08.2015 г.).

Результаты

При исследовании 2620 образцов сывороток крови людей АТ класса IgG к арбовирусам обнаружены в 1595 (60,9% от общего количества) случаях, что не исключает факт заражения и свидетельствует о контакте обследованных лиц с возбудителями. Положительные пробы получены во всех возрастных группах, при этом чёткой зависимости уровня иммунной прослойки от гендерной принадлежности не наблюдалось. Данные по выявлению АТ к различным арбовирусам представлены в таблице.

Следует обратить внимание на то, что чаще всего исследуемые сыворотки содержали специфические АТ к 3 возбудителям (34,0% к ВЗН, 25,2% к вирусам денге и 12,9% – к вирусу чикунгунья) (рис. 2).

Рис. 2. Распределение специфических антител к арбовирусам в разных ландшафтно-географических зонах Гвинейской Республики.
Fig. 2. Distribution of detection rates of specific antibodies to arboviruses in different landscape and geographical zones of the Republic of Guinea.

Обсуждение

На территории Гвинеи один из самых высоких уровней иммунной прослойки населения регистрировался в отношении ВЗН (34,0% всех исследованных сывороток). Такая частая встречаемость АТ к данному возбудителю статистически значима по сравнению с тем же показателем для иммуноглобулинов класса IgG к другим арбовирусам, что подтверждается отсутствием трансгрессии ДИ (таблица).

Результаты выявления антител к арбовирусам в различных ландшафтно-географических зонах Гвинейской Республики
Results of detection of antibodies to arboviruses in various landscape and geographical zones of the Republic of Guinea


Примечание. ВККГЛ – вирус Крымской-Конго геморрагической лихорадки; ДИ – доверительный интервал.
Note. CCHFV, Crimean-Congo hemorrhagic fever (orthonairo)virus; CI is the confidence interval.

Обращает на себя внимание тот факт, что АТ класса IgG к ВЗН в районе Лесной Гвинеи встречались значительно чаще (в 39,5%), чем на территории всей страны. Отсутствие трансгрессии ДИ также свидетельствует о статистической достоверности наблюдаемых различий. В то же время среди жителей Верхней Гвинеи АТ к этой инфекции обнаруживались значительно реже, чем в целом по стране (25,1%).

Одно из ведущих мест по уровню иммунной прослойки населения к арбовирусам занимают вирусы денге. Из таблицы видно, что частота выявления специфических АТ к ним составляет 25,2% от общего количества сывороток. В этом случае наибольшая доля полученных положительных результатов также отмечалась в образцах, собранных на территории Лесной Гвинеи (32,8% случаев). Наименьшее же число проб, содержащих АТ к вирусам денге, зарегистрировано в Верхней Гвинее (16,5%). Как и в случае ВЗН, выявлены статистически значимые различия в уровнях иммунной прослойки к этому возбудителю у населения Лесной Гвинеи (достоверно выше) и Верхней Гвинеи (достоверно ниже, чем в среднем по стране).

Достаточно высокий уровень иммунной прослойки населения страны выявлен и к вирусу чикунгунья (12,9% от общего количества проб). В этой связи следует отметить, что наибольшее количество положительных результатов (18,2%) зафиксировано в сыворотках лиц, проживающих в Лесной Гвинее (значимо выше, чем среднестатистический показатель по стране), а наименьшее – в Нижней (9,4%).

Относительно изучения распространённости АТ к вирусу Батаи (5,5% от общего количества проб) показано, что процент их выявления на территории Лесной Гвинеи существенно выше, чем в других регионах, и составляет 8,2%. В сравнении с другими территориями отличия статистически достоверны, поскольку трансгрессия ДИ также не наблюдается.

При изучении уровней гуморального иммунитета к остальным арбовирусам в целом по стране получены следующие данные: иммуноглобулины класса IgG к вирусам ККГЛ и Бханджа содержали по 2,2 % исследованных образцов, а к вирусу Синдбис – 2,0%. Несмотря на то что всех случаях наибольшее количество позитивных проб также выявлено в сыворотках крови жителей Лесной Гвинеи (что свидетельствует о наибольшей вероятности встречи людей с возбудителями), наличие трансгрессии ДИ показателей встречаемости АТ не позволяет говорить о статистически достоверных различиях.

Заключение

Таким образом, полученные результаты позволяют сделать вывод о распространении широкого спектра арбовирусов на всей территории Гвинейской Республики. Следует отметить, что наиболее активная циркуляция возбудителей арбовирусных инфекций регистрируется в Лесной Гвинее, где уровни специфических АТ класса IgG к ВЗН, вирусам денге, Батаи и чикунгунья достоверно выше среднестатистических значений по стране, а самая низкая – в Верхней Гвинее. Этот факт можно объяснить различием климатических условий, доли населения и видового состава носителей и переносчиков в указанных регионах.

Учитывая большую эпидемическую значимость вызываемых арбовирусами инфекций, актуальной задачей остаётся дальнейшее изучение вопроса об их месте в общем количестве лихорадочных заболеваний, зарегистрированных в Гвинее. Кроме того, необходимо проведение регулярного эпизоотологического мониторинга с целью выявления и определения видов носителей/переносчиков арбовирусов на территории различных ландшафтно-географических зон Гвинейской Республики.

×

Об авторах

Е. В. Найденова

ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Роспотребнадзор)

Автор, ответственный за переписку.
Email: katim2003@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-6474-3696

Найденова Екатерина Владимировна, канд. биол. наук, ведущий научный сотрудник лаборатории вирусологии отдела диагностики инфекционных болезней

410005, Саратов, Россия

Россия

М. Ю. Карташов

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Роспотребнадзор)

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-7857-6822

630559, Новосибирская область, Кольцово, Россия

Россия

К. С. Захаров

ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Роспотребнадзор)

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-4726-309X

410005, Саратов, Россия

Россия

А. П. Шевцова

ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Роспотребнадзор)

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0001-9600-3801

410005, Саратов, Россия

Россия

М. Г. Диалло

Региональный Университет Киндиа

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0003-4507-4575

Киндиа, Гвинейская Республика

Гвинея

И. Нурдин

Исследовательский институт прикладной биологии Гвинеи

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-2970-9676

Киндиа, Гвинейская Республика

Гвинея

М. Б. Ба

Исследовательский институт прикладной биологии Гвинеи

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-4565-269X

Киндиа, Гвинейская Республика

Россия

С. Бумбали

Исследовательский институт прикладной биологии Гвинеи

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-4506-6033

Киндиа, Гвинейская Республика

Гвинея

С. А. Щербакова

ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Роспотребнадзор)

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0003-1143-4069

410005, Саратов, Россия

Россия

В. В. Кутырев

ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Роспотребнадзор)

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0003-3788-3452

410005, Саратов, Россия

Россия

Список литературы

  1. ВОЗ. Болезнь, вызванная вирусом Эбола. Available at: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs103/ru/ (accessed October 4, 2021).
  2. Park S.E., Pak G.D., Aaby P., Adu-Sarkodie Y., Ali M., Aseffa A., et al. The relationship between invasive nontyphoidal Salmonella disease, other bacterial bloodstream infections, and Malaria in Sub-Saharan Africa. Clin. Infect. Dis. 2016; 62(Suppl. 1): S.23–31. https://doi.org/10.1093/cid/civ893
  3. Schoepp R.J., Rossi C.A., Khan S.H., Goba A., Fair J.N. Undiagnosed acute viral febrile illnesses, Sierra Leone. Emerg. Infect. Dis. 2014; 20(7): 1176–82. https://doi.org/10.3201/eid2007.131265
  4. Jentes E.S., Robinson J., Johnson B.W., Conde I., Sakouvougui Y., Iverson J., et al. Acute arboviral infections in Guinea, West Africa, 2006. Am. J. Trop. Med. Hyg. 2010; 83(2): 388–94. https://doi.org/10.4269/ajtmh.2010.09-0688
  5. Countrymeters. Население Гвинеи. Available at: https://countrymeters.info/ru/guinea (accessed October 4, 2021).
  6. Черч Гаррисон Р.Д. Западная Африка. Природная среда и ее хозяйственное использование. М.: Изд-во иностр. лит.; 1959.
  7. Бутенко А.М. Изучение циркуляции арбовирусов в Гвинейской Республике. Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1996; 2: 40–5.
  8. Константинов О.К., Диалло С.М., Инапоги А.П., Ба А., Камара С.К. Млекопитающие Гвинеи как резервуары и носители арбовирусов. Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2006; (1): 34–9.
  9. Титенко А.М. Факторы, способствующие появлению и обнаружению новых вирусных инфекций. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2004; (1): 51–5.
  10. Найденова Е.В., Пьянков С.А., Крицкий А.А., Касьян Ж.А., Раздорский А.С., Лопатин А.А., и др. Выявление специфических антител к арбовирусам в сыворотках крови людей, проживающих в провинции Киндиа, Гвинейская Республика. Проблемы особо опасных инфекций. 2016; (3): 62–5. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2016-3-62-65
  11. Naidenova E.V., Zakharov K.S., Agafonov D.A., Senichkina A.M., Shcherbakova S.A., Kutyrev V.V., et al. Prevalence of Crimean-Congo hemorrhagic fever virus in rural areas of Guinea. Ticks Tick Borne Dis. 2020; 11(5): 101475. https://doi.org/10.1016/j.ttbdis.2020.101475
  12. Найденова Е.В., Лопатин А.А., Сафронов В.А., Коломоец Е.В., Левковский А.Е., Силла А.Л., и др. Обеспечение биологической безопасности при проведении противоэпидемических мероприятий в период ликвидации эпидемии лихорадки Эбола в Гвинейской Республике. Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2018; 7(3): 102–8. https://doi.org/10.24411/2305-3496-2018-13015
  13. PEDro. Confidence interval calculator. Available at: https://pedro.org.au/english/resources/confidence-interval-calculator (accessed October 4, 2021).

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Найденова Е.В., Карташов М.Ю., Захаров К.С., Шевцова А.П., Диалло М.Г., Нурдин И., Ба М.Б., Бумбали С., Щербакова С.А., Кутырев В.В., 2021

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС77-77676 от 29.01.2020.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах