Оценка иммуногенной активности клонированного штамма WA ротавируса А человека

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Ротавирусная инфекция (РВИ), этиологическим агентом которой является дцРНК-содержащий вирус рода Rotavirus семейства Reoviridae, относящийся к группе А (РВА), служит причиной тяжёлых диарей у человека и различных видов млекопитающих. Вакцинопрофилактика - наиболее эффективный способ снижения уровня заболеваемости РВИ. В настоящее время экспериментально доказана эффективность использования поросят-гнотобиотов в качестве универсальной модели для воспроизведения РВИ человека и оценки качества вакцинных препаратов против РВИ.

Цели и задачи. Оценка иммуногенной активности клонированного штамма Wa РВА в опыте на новорождённых поросятах вьетнамской вислобрюхой породы.

Материал и методы. Получение клонированного штамма Wa РВА человека, rVP6 РВА человека. Иммуноферментный анализ и полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией для выявления РВА человека. Иммунизация и экспериментальное заражение новорожденных поросят.

Результаты. В статье представлены результаты опыта по двукратной иммунизации новорождённых поросят препаратами нативного вируса с инфекционной активностью 5,5 lg ТЦИД50/мл в дозе 3 см3, HRV с адъювантом в дозе 500 мкг и плацебо (контроль) с последующим экспериментальным заражением всех животных вирусом вирулентного штамма WaG1P[8] РВА человека с инфекционной активностью 5,5 lg ТЦИД50/мл в дозе 5 см3. Клинические признаки болезни и гибель наблюдали только у контрольных животных. Разработан метод детекции РНК РВА с помощью ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) в ректальных смывах, пробах тонкого отдела кишечника и периферических лимфатических узлах. На основе полученного rVP6 РВА человека разработан метод выявления специфических IgG-антител к РВА с помощью иммуноферментного анализа (ИФА), и приведены результаты выявления РВА в сыворотке крови подопытных поросят.

Заключение. В ходе проведённых исследований установлена высокая иммуногенная активность нативного и очищенного вируса клонированного штамма Wa РВА и подтверждена возможность его применения в качестве основного компонента вакцины против РВИ. Показана возможность использования конвенционных новорождённых поросят вместо поросят-гнотобиотов в качестве опытной модели.

Об авторах

О. Е. Латышев

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: oleglat80@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5757-3809

Латышев Олег Евгеньевич - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной диагностики.

123098, Москва.

Россия

О. В. Елисеева

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава России

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-0723-9749

123098, Москва.

Россия

Л. В. Костина

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава России

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-9556-1454

123098, Москва.

Россия

К. П. Алексеев

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава России

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0001-9536-3127

123098, Москва.

Россия

К. М. Хаметова

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава России

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-8461-600X

123098, Москва.

Россия

Е. Г. Алтаева

Научно-исследовательский институт диагностики и профилактики болезней человека и животных

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0001-7188-1704

123098, Москва.

Россия

О. А. Верховский

Научно-исследовательский институт диагностики и профилактики болезней человека и животных

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0003-0784-9341

123098, Москва.

Россия

Т. И. Алипер

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава России

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-5876-2425

123098, Москва.

Россия

Т. В. Гребенникова

Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава России; Росийский университет дружбы народов

Email: fake@neicon.ru

123098, Москва; 117198, Москва.

Россия

Список литературы

  1. Львов Д.К., ред. Руководство по вирусологии: Вирусы и вирусные инфекции человека и животных. М.: МИА; 2013.
  2. Алипер Т.И., ред. Актуальные инфекционные болезни свиней: Руководство для студентов, научных и практических специалистов. М.: ЗооВетКнига; 2019.
  3. Gentsch J.R., Laird A.R., Bielfelt B., Griffin D.D., Banyai K., Ramachandran M., et al. Serotype diversity and reassortment between human and animal rotavirus strains: implications for rotavirus vaccine programs. J. Infect. Dis. 2005; 192(Suppl. 1): 146-59. Doi: https://doi.org/10.1086/431499
  4. Matthijnssens J., Heylen E., Zeller M., Rahman M., Lemey P., Van Ranst M. Phylodynamic analyses of rotavirus genotypes G9 and G12 underscore their potential for swift global spread. Mol. Biol. Evol. 2010; 27(10): 2431-6. Doi: https://doi.org/10.1093/molbev/msq137
  5. Зайцева Е.В., Ольнева Т.А., Кулешов К.В., Подколзин А.Т., Шипулин Г.А., Кондратьева Л.М. и др. Результаты мониторинга антигенных типов ротавирусов гр. А на территории Российской Федерации в период 2011-2015 гг. Клиническая лабораторная диагностика. 2016; 61(7): 445-8. Doi: https://doi.org/10.18821/0869-2084-2016-61-7-445-448
  6. Алексеев К.П., Кальнов С.Л., Гребенникова Т.В., Алипер Т.И. Ротавирусная инфекция человека. Стратегии вакцинопрофилактики. Вопросы вирусологии. 2016; 61(3): 154-9.
  7. Денисюк Н.Б. Генетическая характеристика ротавирусов группы А, циркулирующих в Оренбургском регионе в сезон 2016¬2017 гг. Детские инфекции. 2017; 16(4): 42-5. Doi: https://doi.org/10.22627/2072-8107-2017-16-4-42-45 15.
  8. Zhang J., Liu H., Jia L., Payne D.C., Hall A.J., Xu Z., et al. Active, population-based surveillance for rotavirus gastroenteritis in Chinese children: Beijing Municipalityand Gansu Province, China. Pediatr. Infect. Dis. J. 2015; 34(1): 40-6. Doi: https://doi.org/10.1097/INF.0000000000000505
  9. Gomez M.M., da Silva M.F.M., Volotao E.M., Fialho A.M., Mazzoco C.S., Rocha M.S., et. al. G26P[19] rotavirus A strain causing acute gastroenteritis in the American continent. Mem. Inst. Oswaldo Cruz. 2018; 113(12): e180344. Doi: http://dx.doi.org/10.1590/0074-02760180344
  10. My P.V., Rabaa M.A., Donato C., Cowley D., Phat V.V., Dung T.T., et. al. Novel porcine-like human G26P[19] rotavirus identified in hospitalized paediatric diarrhoea patients in Ho Chi Minh City, Vietnam. J. Gen. Virol. 2014; 95(12): 2727-33. Doi: https://doi.org/10.1099/vir.0.068403-0
  11. PATH (2011-2016). Available at: https://www.path.org/programs/center-for-vaccine-innovation-and-access/rotaflash/
  12. Burnett E., Jonesteller C.L., Tate J.E., Yen C., Parashar U.D. Global impact of rotavirus vaccination on childhood hospitalizations and mortality from diarrhea. J. Infect. Dis. 2017; 215(11): 1666-72. Doi: https://doi.org/10.1093/infdis/jix186
  13. Crawford S.E., Ramani S., Tate J.E., Parashar U.D., Svensson L., Hagbom M., et al. Rotavirus infection. Nat. Rev. Dis. Primers. 2017; 3: 17083. Doi: https://doi.org/10.1038/nrdp.2017.83
  14. Tate J.E., Parashar U.D. Rotavirus vaccines in routine use. Clin. Infect. Dis. 2014; 59(9): 1291-301. Doi: https://doi.org/10.1093/cid/ciu564
  15. Хаметова К.М., Алексеев К.П., Южаков А.Г., Костина Л.В., Раев С.А., Мусиенко М.И. и др. Молекулярно-биологические свойства клонированного штамма Wa ротавируса А человека. Вопросы вирусологии. 2019; 64(1): 16-22.
  16. Ward L.A., Rosen B.I., Yuan L., Saif L.J. Pathogenesis of an attenuated and a virulent strain of group A human rotavirus in neonatal gnotobiotic pigs. J. Gen. Virol. 1996; 77(Pt. 7): 1431-41. Doi: https://doi.org/10.1099/0022-1317-77-7-1431
  17. Friess A.E., Sinowatz F., Skolek-Winnisch R., Trautner W. The placenta of the pig. II. The ultrastructure of the areolae. Anat. Embryol. (Berl.). 1981; 163(1): 43-53. Doi: https://doi.org/10.1007/bf00315769
  18. Lala P.K., Chatterjee-Hasrouni S., Kearns M., Montgomery B., Colavincenzo V. Immunobiology of the feto-maternal interface. Immunol. Rev. 1983; 75: 87-116. Doi: https://doi.org/104111/j.1600-065X.1983.tb01092.x
  19. Butler J.E., Lemke C.D., Weber P., Sinkora M., Lager K.M. Antibody repertoiredevelopment in fetal and neonatal piglets: XIX. Undiversified B cells with hydrophobic HCDR3s preferentially proliferate in the porcine reproductive and respiratory syndrome. J. Immunol. 2007; 178(10): 6320-31. Doi: https://doi.org/10.4049/jimmunol.178.10.6320
  20. Saif L.J., Fernandez F.M. Group A rotavirus veterinary vaccines. J. Infect. Dis. 1996; 174(Suppl. 1): 98-106. Doi: https://doi.org/10.1093/infdis/174.Supplement_1.S98
  21. Yuan L., Saif L.J. Induction of mucosal immune responses and protection against enteric viruses: rotavirus infection of gnotobiotic pigs as a model. Vet. Immunol. Immunopathol. 2002; 87(3-4): 147-60. Doi: https://doi.org/10.1016/S0165-2427(02)00046-6
  22. Hammerberg C., Schurig G.G., Ochs D.L. Immunodeficiency in young pigs. Am. J. Vet. Res. 1989; 50(6): 868-74.
  23. Azevedo M.P., Vlasova A.N., Saif L.J. Human rotavirus virus-like particle vaccines evaluated in a neonatal gnotobiotic pig model of human rotavirus disease. Expert. Rev. Vaccines. 2013; 12(2): 169-81. Doi: https://doi.org/10.1586/erv.13.3
  24. Babji S., Arumugam R., Sarvanabhavan A., Gentsch J.R., Kang G. Approach to molecular characterization of partially and completely untyped samples in an Indian rotavirus surveillance program. Vaccine. 2014; 32(Suppl. l): A84-8. Doi: https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2014.04.024
  25. Gentsch J.R., Glass R.I., Woods P., Gouvea V, Gorziglia M., Flores J., et al. Identification of group A rotavirus gene 4 types by polymerase chain reaction. J. Clin. Microbiol. 1992; 30(6): 1365-73.
  26. Close B., Banister K., Baumans V, Bernoth E.M., Bromage N., Bunyan J., et al. Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 2. DGXT of the European Commission. Lab. Anim. 1997; 31(1): 1-32. Doi: https://doi.org/10.1258/002367797780600297
  27. Сергеев В.А., Непоклонов Е.А., Алипер Т.И. Вирусы и вирусные вакцины. М.: Библионика; 2007.
  28. Yuan L., Ward L.A., Rosen B.I., To T.L., Saif L.J. Systematic and intestinal antibodysecreting cell responses and correlates of protective immunity to human rotavirus in a gnotobiotic pig model of dis-ease. J. Virol. 1996; 70(5): 3075-83.
  29. Burns J.W., Krishnaney A.A., Vo P.T., Rouse R.V., Anderson L.J., Greenberg H.B. Analyses of homologous rotavirus infection in the mouse model. Virology. 1995; 207(1): 143-53. Doi: https://doi.org/10.1006/viro.1995.1060
  30. Patel M., Shane A.L., Parashar U.D., Jiang B., Gentsch J.R., Glass R.I. Oral rotavirus vaccines: how well will they work where they are needed most? J. Infect. Dis. 2009; 200(Suppl. 1): 39-48. Doi: https://doi.org/10.1086/605035
  31. Wagstrom E.A., Yoon K.J., Zimmerman J.J. Immune components in porcine mammary secretions. Viral Immunol. 2000; 13(3): 383-97. Doi: https://doi.org/10.1089/08828240050144699

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Латышев О.Е., Елисеева О.В., Костина Л.В., Алексеев К.П., Хаметова К.М., Алтаева Е.Г., Верховский О.А., Алипер Т.И., Гребенникова Т.В., 2019

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС77-77676 от 29.01.2020.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах