УСИЛЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ ФОКУСОВ ФОСФОРИЛИРОВАННОГО ГИСТОНА Н2АХ В ЯДРАХ КЛЕТОК ПРИ ИНФЕКЦИИ ВИРУСАМИ ГЕПАТИТА В И D

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Исходами хронического гепатита В (ХГВ) являются цирроз печени и гепатоцеллюлярная карцинома. Гибель и трансформация гепатоцитов при ХГВ связаны с влиянием вируса гепатита В (HBV) на клетку. Самым опасным видом повреждения генома клеток является образование двухцепочечных разрывов ДНК (ДЦР). Ранее было показано, что образование фокусов фосфорилированного гистона Н2АХ (уН2АХ) является надёжным индикатором ДЦР. Целью работы было изучение формирования фокусов уН2АХ при инфекции, вызванной HBV и HDV, на модели HBV in vitro, а также в биоптатах пациентов с ХГВ и ХГВ с дельта-агентом в биоптатах печени. Клетки гепатомы человека HepG2-1.1merHBV с активным циклом HBV были использованы для оценки экспрессии прегеномной РНК, уровней ДНК и кольцевой ковалентно-замкнутой ДНК (ккзДНК) HBV и иммуноцитохимического анализа образования yH2AX-гистона. Срезы биоптатов печени пациентов с ХГВ и ХГВ + D использовали для подтверждения результатов по генерации уН2АХ-гистона. В результате показано, что HBV вызывает образование многочисленных фокусов уН2АХ в культуре клеток HepG2-1.1merHBV in vitro и гепатоцитах пациентов с ХГВ и ХГB + D. В гепатоцитах пациента с ХГВ доля клеток без фокусов значительно ниже (49,9 ± 12,3% против 85,5 ± 0,9%; p < 0,05), а доля клеток с 1-10 фокусами уН2АХ выше (49,3 ± 12,6% против 14,5 ± 0,9%; p < 0,05) в сравнении со здоровым донором. При ХГВ + D происходит увеличение среднего числа уН2АХ-фокусов (3,5 ± 1,1 и 5,5 ± 1,5 против 0,5 ± 0,16 в контроле; p < 0,05). У пациентов c ХГВ и ХГВ + D снижается доля гепатоцитов без уН2АХ, возрастает доля клеток с 1-10 уН2АХ, появляются клетки с многочисленными (11-30 уН2АХ/клетку) фокусами. Таким образом, yH2AX-фокусы образуются при инфекции HBV in vitro, в гепатоцитах пациентов с ХГВ и ХГB + D и могут использоваться для оценки повреждения генома, связанного с HBV и HDV.

Об авторах

Д. С. Костюшев

ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора

Автор, ответственный за переписку.
Email: dk@rcvh.ru
Россия

С. А. Брезгин

ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора; ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

А. П. Костюшева

ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора; ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова»

Email: noemail@neicon.ru
Россия

А. Д. Липатников

ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора; ФГБОУ ВПО «Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева»

Email: noemail@neicon.ru
Россия

В. Н. Симирский

ФГБУН «Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова» РАН

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Н. А. Мамонова

ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Е. В. Волчкова

ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

В. В. Малеев

ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора

Email: noemail@neicon.ru
Россия

В. П. Чуланов

ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора; ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Список литературы

  1. Bahcecioglu I.H., Sahin A. Treatment of delta hepatitis: today and in the future - a review. Infect. Dis. (Lond). 2017; 49(4): 241-50.
  2. Mallet V., Hamed K., Schwarzinger M. Prognosis of patients with chronic hepatitis B in France (2008-2013): A nationwide, observational and hospital-based study. J. Hepatol. 2017; 66(3): 514-520.
  3. Kim S., Lee H.S., Ji J.H., Cho M.Y., Yoo Y.S., Park Y.Y., et al. Hepatitis B virus X protein activates the ATM-Chk2 pathway and delays cell cycle progression. J. Gen. Virol. 2015; 96(8): 2242-51.
  4. Maréchal A., Zou L. DNA Damage Sensing by the ATM and ATR Kinases. Cold Spring Harb. Perspect. Biol. 2013; 5(9): a012716.
  5. Zhao F., Hou N.B., Song T., He X., Zheng Z.R., Ma Q.J., et al. Cellular DNA Repair Cofactors Affecting Hepatitis B Virus Infection and Replication. World. J. Gastroenterol. 2008; 14(32): 5059-65.
  6. Matsuda Y., Wakai T., Kubota M., Osawa M., Takamura M., Yamagiwa S., et al. DNA Damage Sensor γ-H2AX Is Increased in Preneoplastic Lesions of Hepatocellular Carcinoma. Sci. World J. 2013; 2013: 597095.
  7. Syed Abdul Rahman S.N., Abdul Wahab N., Abd Malek S.N. In Vitro Morphological Assessment of Apoptosis Induced by Antiproliferative Constituents from the Rhizomes of Curcuma zedoaria. Evid. Based Complement Alternat. Med. 2013; 2013: 257108.
  8. Wlodkowic D., Skommer J., Darzynkiewicz Z. Flow Cytometry-Based Apoptosis Detection. Methods Mol. Biol. 2009; 559: 19-32.
  9. Rogakou E.P., Nieves-Neira W., Boon C., Pommier Y., Bonner W.M. Initiation of DNA fragmentation during apoptosis induces phosphorylation of H2AX histone at serine 139. J. Biol. Chem. 2000; 275(13): 9390-5.
  10. Lee W.P., Lan K.H., Li C.P., Chao Y., Lin H.C., Lee S.D. Pro-apoptotic or anti-apoptotic property of X protein of hepatitis B virus is determined by phosphorylation at Ser31 by Akt. Arch. Biochem. Biophys. 2012; 528(2): 156-62.
  11. Turinetto V., Giachino C. Multiple facets of histone variant H2AX: a DNA double-strand-break marker with several biological functions. Nucleic. Acids Res. 2015; 43(5): 2489-98.
  12. Kim S., Lee H.S., Ji J.H., Cho M.Y., Yoo Y.S., Park Y.Y., et al. Hepatitis B virus X protein activates the ATM-Chk2 pathway and delays cell cycle progression. J. Gen. Virol. 2015; 96(8): 2242-51.
  13. Dan Y., Zhang Y., Cheng L., Ma J., Xi Y., Yang L., et al. Hepatitis B virus X protein (HBx)-induced abnormalities of nucleic acid metabolism revealed by 1H-NMR-based metabonomics. Sci. Rep. 2016; 6: 24430.
  14. Zhao F., Hou N.B., Song T., He X., Zheng Z.R., Ma Q.J., et al. Cellular DNA repair cofactors affecting hepatitis B virus infection and replication. World J. Gastroenterol. 2008; 14(32): 5059-65.
  15. Shah G.A., O’Shea C.C. Viral and Cellular Genomes Activate Distinct DNA Damage Responses. Cell. 2015; 162(5): 987-1002.
  16. Arribas J.R., González-García J.J., Lorenzo A., Montero D., Ladrón de Guevara C., Montes M., et al. Single (B or C), dual (BC or BD) and triple (BCD) viral hepatitis in HIV-infected patients in Madrid, Spain. AIDS. 2005; 19(13): 1361-5.
  17. Chen W.D.P. Chronic inflammation injury promotes hepatocellular carcinoma development via up-regulation of y-H2AX. Int. J. Clin. Exp. Pathol. 10(4); 4431-40.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Костюшев Д.С., Брезгин С.А., Костюшева А.П., Липатников А.Д., Симирский В.Н., Мамонова Н.А., Волчкова Е.В., Малеев В.В., Чуланов В.П., 2018

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС77-77676 от 29.01.2020.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах