Результаты выявления специфических антител класса IgG к возбудителю болезни, вызванной вирусом Эбола (Filoviridae: Orthoebolavirus), у жителей Гвинейской Республики после завершения эпидемии
- Авторы: Найденова Е.В.1, Карташов М.Ю.2, Шульгина И.С.2, Пьянков С.А.2, Кулагин М.А.1, Ба М.Б.3, Нурдин И.4, Н’Фалли М.4, Коному В.5, Траоре М.З.3, Бумбали С.4, Кутырев В.В.1
-
Учреждения:
- ФКУН Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора
- ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
- Исследовательский институт прикладной биологии Гвинеи
- Лаборатория вирусных геморрагических лихорадок
- Научный клинико-диагностический центр эпидемиологии и микробиологии
- Выпуск: Том 70, № 2 (2025)
- Страницы: 154-163
- Раздел: ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
- URL: https://virusjour.crie.ru/jour/article/view/16710
- DOI: https://doi.org/10.36233/0507-4088-288
- EDN: https://elibrary.ru/ukfplk
- ID: 16710
Цитировать
Аннотация
Введение. В 2014–2016 гг. на территории Гвинеи была зарегистрирована эпидемия болезни, вызванной вирусом Эбола (БВВЭ). В 2021 г. случаи БВВЭ в регионе повторились. Важность изучения длительности постинфекционного иммунитета к вирусу Эбола в организме реконвалесцентов обусловлена тем, что после завершения эпидемии эти лица могут являться основными источниками заражения. Один из показателей циркуляции возбудителя на определенной территории – обнаружение специфических иммуноглобулинов класса G (IgG) в сыворотках крови населения.
Цель работы – выявление антител класса IgG к вирусу Эбола в сыворотках крови переболевших и практически здоровых жителей Гвинейской Республики после завершения эпидемии.
Материалы и методы. Методом иммуноферментного анализа протестированы сыворотки крови 9 пациентов, проходивших лечение в госпитале НКДЦЭМ (г. Киндиа, Гвинея), взятые после окончания болезни и до 72 мес после выздоровления, и 3939 проб крови практически здоровых жителей Гвинеи.
Результаты. Антитела класса IgG в сыворотках крови переболевших через месяц после выздоровления выявляли в титре до 1 : 800. К 12 мес уровень антител снизился до 1 : 100 и держался на таком уровне до 48 мес. После 72 мес наблюдений антитела не регистрировались. Из 3939 образцов крови здоровых жителей антитела класса IgG к вирусу Эбола выявлены в 5,6%. Бо́льшая часть положительных образцов собрана в Лесной Гвинее (7,7%), а меньшая – в Верхней (4,5%). Максимальное количество позитивных проб выявлено у лиц старше 70 лет (12,3%).
Заключение. В настоящем исследовании высокий уровень постинфекционного иммунитета в сыворотках крови переболевших БВВЭ сохранялся первые 6 мес, что соответствует данным, полученным другими авторами, и не исключает возможность повторного заражения. Самый высокий уровень иммунной прослойки населения зарегистрирован в Лесной Гвинее. Это может свидетельствовать об активной циркуляции возбудителя и постоянном контакте с ним жителей региона, что приводит к эпидемиологическим осложнениям.
Полный текст
Введение
Болезнь, вызванная вирусом Эбола (БВВЭ), или лихорадка Эбола, известна с 1976 г., когда первые документально подтвержденные случаи были зарегистрированы на границе Южного Судана и северного Заира (в настоящее время – Демократическая Республика Конго (ДРК)). В течение последующих десятилетий были зафиксированы периодические вспышки болезни в странах Центральной Африки (ДРК, Судан, Габон, Уганда). Общее количество больных в те годы составило 2433 человека, летальность в среднем – 65% [1, 2].
Ситуация резко изменилась в декабре 2013 г., когда БВВЭ в короткие сроки охватила 3 страны Западной Африки (Гвинея, Либерия, Сьерра-Леоне), где ранее случаев заболевания не было. К 2014 г. вспышка инфекции достигла масштабов эпидемии, которая завершилась только в июне 2016 г. Общее количество больных, выявленных во время этих событий, составило около 28 тыс. человек, более 11 тыс. из которых погибли. При проведении молекулярно-генетических исследований установлено, что вирус Эбола (Filoviridae: Orthoebolavirus, Orthoebolavirus zairense), явившийся причиной чрезвычайной ситуации международного масштаба, был занесен из Центральной Африки, но пути заноса так и не удалось выяснить1 [2].
В начале 2021 г. правительство Гвинейской Республики объявило о новой вспышке БВВЭ, зафиксированной на территории страны, когда лабораторными методами было подтверждено 16 случаев, 12 из которых закончились летальным исходом [3, 4]. При изучении генетических последовательностей вируса Эбола, выделенных во время этих событий, было установлено, что их профиль практически не отличается от штаммов, обнаруженных в 2013–2016 гг., и находится с ними в одном филогенетическом кластере. Эти данные позволили сделать предположение о длительной персистенции вируса в организме людей, перенесших БВВЭ [5].
В связи с вышесказанным актуальным является вопрос о длительности полученного иммунитета у переболевших лиц. Необходимость определения сроков циркуляции специфических иммуноглобулинов класса G (IgG) к вирусу Эбола в организме реконвалесцентов подчеркивается тем, что после завершения эпидемии именно эти лица могут являться основными источниками инфекции, сохраняя способность передавать возбудитель с грудным молоком или семенной жидкостью [6–8]. Также имеются сведения о повторном инфицировании вирусом Эбола двух пациентов в Конго. Заражение произошло через 11 и через 5 мес после первичного заболевания. Вирусный менингоэнцефалит, который развился у обоих пациентов, привел к летальным исходам. Было высказано предположение, что жизнеспособный вирус мог сохраниться в центральной нервной системе переболевших. В обоих случаях во время повторного заболевания БВВЭ в первые несколько дней после появления клинических признаков инфекции в сыворотке крови и спинномозговой жидкости выявлены специфические антитела класса IgG [9]. Установлена высокая концентрация IgG к вирусу Эбола в сыворотках крови новорожденных в Либерии, родившихся от матерей, перенесших инфекцию [10].
Исследования, направленные на изучение длительности сохранения специфических антител в сыворотках крови переболевших БВВЭ, проводились в разные годы. При обследовании методом иммуноферментного анализа (ИФА) 29 жителей провинции Кикивит (ДРК), выживших после вспышки инфекции в 1995–1996 гг., было выявлено, что антитела к возбудителю в некоторых случаях сохранялись до 749 сут (срок наблюдения) [11]. Согласно экспериментальным данным, полученным с использованием микрочипа, устойчивые уровни специфических антител IgG к вирусным белкам GP, NP и VP40 в сыворотках крови переболевших БВВЭ сохранялись в течение 14 лет после заражения, но перекрестно реагировали и с другими филовирусами, использованными в исследовании [12]. В некоторых работах показано, что часть антител в сыворотке крови пациентов, перенесших БВВЭ, может нейтрализовать живой вирус и через 40 лет после заражения [13]. При массовом обследовании сывороток крови выживших после БВВЭ в Гвинейской Республике с использованием авторского варианта мультиплексного анализа, основанного на технологии Luminex, было показано, что наличие антител класса IgG к одному или нескольким антигенам вируса Эбола сохранялось до 60 мес наблюдения, хотя примерно у 25% исследованных лиц антитела не определялись. Это не исключает возможность снижения иммунитета населения и возникновения новых вспышек болезни в том же регионе [14]. Однако четких данных об уровне специфических антител, способном обеспечить защиту от последующих заражений ранее переболевших лиц, в доступных источниках найти не удалось.
Также известно, что одним из показателей циркуляции возбудителя на определенной территории является выявление антител класса IgG к возбудителю в сыворотках крови лиц, проживающих в данной местности. В разные периоды времени были проведены исследования по изучению иммунной прослойки населения разных африканских стран к вирусу Эбола.
Например, в период с 1985 по 1987 г. при массовом обследовании жителей стран Центральной Африки (Габон, Камерун, Конго, Центральноафриканская Республика (ЦАР), Чад и Экваториальная Гвинея) с целью выявления специфических антител класса IgG к возбудителям вирусных геморрагических лихорадок, актуальных для данного региона, антитела к вирусу Эбола обнаружены в среднем в 12,4% образцов [15].
В последующие годы проведены еще несколько исследований среди населения стран, где были зафиксированы вспышки БВВЭ (ДРК и Габон) и где случаев заболевания на тот момент зарегистрировано не было (Камерун, ЦАР и Мали) [16–21].
При изучении образцов сывороток крови городских и сельских жителей провинции Киквит (ДРК), доля лиц, у которых были выявлены специфические антитела к вирусу Эбола, составила 2,2 и 9,3% соответственно [17]. С использованием метода ИФА было также проведено масштабное серологическое обследование сельского населения Габонской Республики, специфичные антитела класса IgG в данном случае были обнаружены в 15,3% случаев. Уровень иммунной прослойки оказался значительно выше для жителей лесных районов (19,4%), чем у лиц, проживающих в саванне [18].
Другими авторами с помощью непрямой иммунофлуоресценции было проверено наличие антител к вирусу Эбола у 1517 практически здоровых людей в 5 регионах Камеруна. Положительный результат был получен в 9,7% случаев, что подтверждает циркуляцию вируса в регионе при отсутствии клинических случаев. Самые высокие показатели были зафиксированы среди племен пигмеев, живущих в тропических лесах [20]. При проведении эпидемиологического мониторинга в ЦАР также было показано, что пигмеи имеют значительно более высокую серопревалентность к вирусу Эбола (7,02%), чем представители других этнических групп (4,2%) [20]. Исследования, проведенные в Мали, свидетельствуют о том, что население южной части страны, граничащей с Гвинеей и Кот-д’Ивуаром, также контактирует с представителями филовирусов (6,1% от общего количества исследованных проб) [21].
Первые данные по изучению иммунной прослойки к возбудителю БВВЭ населения некоторых регионов Гвинеи были начаты в 1982 г. на базе Советско-Гвинейской вирусологической и микробиологической лаборатории. Специфические антитела класса IgG к вирусу Эбола в тот период были обнаружены у 8% местных жителей, что подтверждало возможную циркуляцию возбудителя на данной территории [22, 23]. В 90-е гг. прошлого столетия исследования были прекращены в связи с закрытием лаборатории, и вопрос о распространении вируса Эбола на территории различных регионов Гвинеи так и остался не изученным.
После завершения эпидемии БВВЭ на территории Гвинейской Республики, в ликвидации которой принимали участие и российские специалисты, правительством Российской Федерации было принято решение об открытии Российско-Гвинейского научно-исследовательского центра эпидемиологии и профилактики инфекционных болезней (далее Центр), который функционирует на базе Института прикладной биологии Гвинеи в г. Киндиа (Гвинейская Республика) и имеет разрешение на работу с возбудителями I–II групп патогенности [24]. Исследования по выявлению специфических антител к вирусу Эбола были продолжены на базе лаборатории Центра.
Целью данной работы было выявление специфических антител класса IgG к вирусу Эбола в сыворотках крови переболевших, а также практически здоровых жителей Гвинейской Республики после завершения эпидемии БВВЭ.
Материалы и методы
Сбор образцов клинического и биологического материала и последующие исследования проводили на базе лаборатории Центра российские и гвинейские специалисты, прошедшие специальную подготовку и имеющие опыт работы с особо опасными вирусами, руководствуясь требованиями санитарных правил и норм СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней». Актуальных документов, в соответствии с которыми принято работать с возбудителями особо опасных инфекционных болезней в Гвинее, в настоящее время нет.
Сыворотки крови переболевших лиц и практически здоровых людей были получены в региональных госпиталях Гвинейской Республики местными специалистами. Забор крови производили в утренние часы натощак из локтевой вены в количестве 5–10 мл в одноразовую стерильную вакуумную пробирку с активатором образования сгустка для проведения иммуносерологических исследований и с 3,8% цитратом натрия – для молекулярно-генетических. В последующем образцы доставляли в лабораторию Центра с соблюдением условий биологической безопасности и температурного режима.
С целью изучения напряженности иммунитета после перенесенной БВВЭ был собран клинический материал от 9 пациентов (6 мужчин и 3 женщины) госпиталя Научного клинико-диагностического центра эпидемиологии и микробиологии (НКДЦЭМ) (г. Киндиа, Гвинейская Республика) [24], проходивших лечение в мае–июле 2015 г. Исследуемые лица с подтвержденным диагнозом БВВЭ получали только поддерживающую терапию, никакие экспериментальные препараты и иммунные сыворотки во время острой фазы инфекции не использовались. Образцы крови забирали после выписки пациентов при отсутствии клинических проявлений заболевания и двукратным (с разницей 48 ч) отрицательным результатом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР), а затем через 1, 3, 6, 12, 24, 36, 48, 60, 72 мес (примерно в одни и те же сроки, с разницей ± 5 сут) после начала заболевания (табл. 1). Всего за время проведения эксперимента было исследовано 88 образцов крови, т.к. на последнем этапе работы два участника выбыли.
Таблица 1. Выявление специфических антител класса IgG к вирусу Эбола в сыворотках крови пациентов госпиталя НКДЦЭМ в разные сроки от начала заболевания
Table 1. Detection of specific IgG antibodies to Ebola virus in the blood sera of patients at the SCDCEM hospital at different times from the onset of the disease
Пол Gender | Возраст (на момент начала заболевания), лет Age (at the time of the onset of the disease), years | Результаты выявления антител в зависимости от сроков наблюдения (месяцы ± 5 сут) Antibody detection results depending on the time of observation (months ± 5 days) | |||||||||
0* | 1 | 3 | 6 | 12 | 24 | 36 | 48 | 60 | 72 | ||
М | 33 | 1 : 800 | 1 : 400 | 1 : 200 | 1 : 200 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | н.и. / n.i. |
М | 28 | 1 : 400 | 1 : 400 | 1 : 400 | 1 : 200 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 0 | 0 | 0 |
М | 45 | 1 : 400 | 1 : 400 | 1 : 400 | 1 : 200 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 0 |
М | 25 | 1 : 400 | 1 : 400 | 1 : 400 | 1 : 200 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 0 |
М | 30 | 1 : 800 | 1 : 800 | 1 : 400 | 1 : 200 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 0 |
М | 26 | 1 : 400 | 1 : 400 | 1 : 200 | 1 : 200 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | н.и. / n.i. |
Ж / F | 30 | 1 : 800 | 1 : 400 | 1 : 400 | 1 : 200 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 0 |
Ж / F | 22 | 1 : 1600 | 1 : 1600 | 1 : 800 | 1 : 400 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 0 |
Ж / F | 49 | 1 : 400 | 1 : 400 | 1 : 400 | 1 : 200 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 1 : 100 | 0 | 0 |
Примечание. * ‒ при выписке. Все пациенты с диагнозом БВВЭ, принимавшие участие в исследовании, проходили лечение в госпитале в мае–июле 2015 г.; н.и. – не исследовали.
Note. * ‒ at discharge. All patients diagnosed with EVD who participated in the study were treated at the hospital in May–July 2015; n.t. – not tested.
Для определения уровня иммунной прослойки населения Гвинейской Республики к возбудителю БВВЭ была подготовлена панель из 3939 сывороток крови лиц, проживающих во всех 4 ландшафтно-географических зонах страны, из которых 1953 (49,6%) – женщины, а 1986 (50,4%) – мужчины (табл. 2). Материал для исследования был собран в 2022–2024 гг., т.е. после завершения эпидемии.
Таблица 2. Выявление специфических антител класса IgG к вирусу Эбола в сыворотках крови практически здоровых жителей Гвинейской Республики
Table 2. Detection of specific IgG class antibodies to the Ebola virus in the blood sera of practically healthy residents of the Republic of Guinea
Возрастная группа (лет) Age group (years old) | Количество образцов; из них положительных; % (95% ДИ) Number of samples; of them positive; % (95% CI) | ||
общее количество образцов total number of samples | мужчины men | женщины women | |
Нижняя (Приморская) Гвинея / Lower (Maritime) Guinea | |||
< 10 | 71; 0; 0 (0–5,1) | 38; 0; 0 (0–9,1) | 33; 0; 0 (0–10,4) |
10–20 | 111; 2; 1,8 (0,5–6,3) | 51; 1; 1,9 (0,4–10,3) | 60; 1; 1,7 (0,3–8,7) |
20–30 | 246; 8; 3,2 (1,7–6,3) | 133; 5; 3,8 (1,6–8,5) | 113; 3; 2,6 (0,9–7,5) |
30–40 | 242; 15; 6,2 (3,8–9,9) | 112; 9; 8,0 (4,3–14,5) | 130; 6; 4,6 (2,1–9,7) |
40–50 | 229; 14; 6,1 (3,7–10,0) | 98;7; 7,1 (3,5–14,0) | 131; 7; 5,3 (2,6–10,6) |
50–60 | 122; 8; 6,6 (3,4–12,4) | 63; 4; 6,3 (2,5–15,2) | 59; 4; 6,8 (2,7–16,1) |
> 60 | 80; 7; 8,7 (4,3–16,9) | 33; 3; 9,1 (3,1–23,5) | 47; 4; 8,5 (3,4–19,9) |
Всего / Total | 1101; 54; 4,9 (3,8–6,3) | 528; 29; 5,5 (3,8–7,8) | 573; 25; 4,7 (3,2–6,8) |
Средняя Гвинея / Middle Guinea | |||
< 10 | 57; 4; 7,0 (2,7–16,7) | 24; 2 ;8,3 (2,3–25,8) | 33; 2; 6,1 (1,7–19,6) |
10–20 | 123; 9; 7,3 (3,9–13,3) | 57; 5; 8,7 (3,8–18,9) | 66; 4; 6,1 (2,4–14,5) |
20–30 | 226; 10; 4,4 (2,4–7,9) | 101; 5; 4,9 (2,1–11,0) | 125; 5; 4,0 (1,7–9,0) |
30–40 | 239; 10 4,2 (2,3–7,5) | 110; 6; 5,4 (2,5–11,4) | 129; 4; 3,1 (1,2–7,7) |
40–50 | 165; 7; 4,5 (2,2–8,9) | 87; 5; 5,7 (2,5–12,7) | 78; 2; 2,6 (0,7–8,8) |
50–60 | 101; 7; 6,9 (3,4–13,6) | 46; 4; 8,7 (3,4–20,3) | 55; 3; 5,4 (1,9–14,8) |
> 60 | 62; 7; 11,3 (5,6–21,5) | 37; 4; 10,8 (4,3–24,7) | 25; 3; 12,0 (4,2–29,9) |
Всего / Total | 973; 54; 5,5 (4,3–7,2) | 462; 31; 6,7 (4,7–9,3) | 511; 23; 4,5 (3,0–6,7) |
Верхняя Гвинея / Upper Guinea | |||
< 10 | 49; 0; 0 (0–7,2) | 28; 0; 0 (0–12,1) | 21; 0; 0 (0–15,5) |
10–20 | 128; 0; 0 (0–2,9) | 68; 0; 0 (0–5,3) | 60; 0; 0 (0–6,0) |
20–30 | 199; 7; 3,5 (1,7–7,1) | 102; 3; 2,9 (1,1–8,2) | 97; 4; 4,1 (1,6–10,1) |
30–40 | 190; 8; 4,2 (2,1–8,1) | 100; 5; 5,0 (2,1–11,2) | 90; 3; 3,3 (1,1–9,3) |
40–50 | 188; 11; 5,8 (3,3–10,2) | 104; 6; 5,7 (2,7–12,0) | 84; 5; 5,9 (2,6–13,1) |
50–60 | 90; 9; 10,0 (5,3–17,9) | 51; 4; 7,8 (3,1–18,5) | 39; 5; 12,8 (5,6–26,7) |
> 60 | 72; 6; 8,3 (3,9–17,0) | 39; 3; 7,7 (2,6–20,3) | 33; 3; 9,1 (3,1–23,5) |
Всего / Total | 916; 41; 4,5 (3,3–6,0) | 492; 21; 7,2 (2,8–6,4) | 424; 20; 4,7 (3,1–7,1) |
Лесная Гвинея / Forest Guinea | |||
< 10 | 51; 5; 9,8 (4,3–20,9) | 28; 2; 7,1 (1,9–22,6) | 23; 3; 13,0 (4,5–32,1) |
10–20 | 200; 7; 3,5 (1,7–7,0) | 107; 4; 3,7 (1,4–9,2) | 93; 3; 3.2 (1,1–9,0) |
20–30 | 239; 12; 5,0 (2,9–8,6) | 129; 6; 4,6 (2,1–9,7) | 110; 6; 5,4 (2,5–11,4) |
30–40 | 190; 10; 5,3 (2,9–9,4) | 95; 6; 6,3 (2,9–13,1) | 95; 4; 4,2 (1,6–10,3) |
40–50 | 72; 8; 11,1 (5,7–20,4) | 41; 4; 9,7 (3,8–22,5) | 31; 4; 12,9 (5,1–28,8) |
50–60 | 126; 16; 12,7 (7,9–19,6) | 68; 9; 13,2 (7,1–23,3) | 58; 7; 12,0 (5,9–22,8) |
> 60 | 71; 15; 21,1 (13,2–31,9) | 36; 7; 19,4 (9,7–35,0) | 35; 8; 22,8 (12,1–39,0) |
Всего / Total | 949; 73; 7,7 (6,2–9,5) | 504; 38; 9,5 (5,5–10,2) | 445; 35; 7,8 (5,7–10,7) |
Общее по стране / Total by country | |||
< 10 | 228; 9; 3,9 (2,1–7,3) | 118; 4; 3,4 (1,3–8,4) | 110; 5 4,5 (1,9–10,2) |
10–20 | 562; 18; 3,2 (2,0–5,0) | 283; 13; 4,6 (2,7–7,7) | 279; 5; 1,8 (0,8–4,1) |
20–30 | 910; 37; 4,1 (2,9–5,5) | 465; 19; 4,1 (2,6–6,3) | 445; 18; 4,0 (2,6–6,3) |
30–40 | 861; 43; 4,9 (3,7–6,7) | 417; 24; 5,7 (3,9–8,4) | 444; 19; 4,3 (2,8–6,6) |
40–50 | 654; 40; 6,1 (4,5–8,2) | 330;22; 6,7 (4,4–9,8) | 324; 18; 5,6 (3,5–8,6) |
50–60 | 439; 40; 9,1 (6,7–12,2) | 228; 21; 9,2 (6,1–13,7) | 211; 19; 9,0 (5,8–13,6) |
> 60 | 285; 35; 12,3 (8,9–16,6) | 145; 17; 11,7 (7,4–17,9) | 140; 18; 12,8 (8,3–19,4) |
Всего / Total | 3939; 222; 5,6 (4,9–6,4) | 1986; 119; 6,0 (5,0–7,1) | 1953;103; 5,3 (4,4–6,4) |
Все полученные образцы крови перед началом работы тестировали с помощью ОТ-ПЦР набором реагентов «АмплиCенс EBOV Zaire-FL» (ФБУН ЦНИИЭ, Россия) для выявления РНК вируса Эбола. Во всех случаях был получен отрицательный результат. Для исключения вероятности неспецифических реакций при экспериментальной работе сыворотки также исследовали методом иммунохроматографического анализа для обнаружения антигенов малярийных плазмодиев с применением диагностического препарата SDBIOLINE Malaria Ag P.f./Pan (Standart Diagnostics, Inc., Республика Корея). Образцы, содержащие антигены возбудителей малярии, из последующих исследований исключили.
Сыворотки, полученные от реконвалесцентов, изучали в разведениях от 1 : 100 до 1 : 3200, от практически здоровых лиц – в титре 1 : 100. Исследования проводили методом ИФА для выявления специфических антител класса IgG к вирусу Эбола с использованием набора реагентов «Вектор ИФА Эбола-AT скрин» (РУ № РЗН 2015/3458; ГНЦ ВБ «Вектор», Российская Федерация). Диагностическая специфичность и чувствительность препарата была оценена во время эпидемии БВВЭ в Гвинейской Республике. В последующем, после прохождения всех этапов клинических и лабораторных испытаний, набор был официально зарегистрирован [25].
Проведение описываемой научной работы одобрено решением Этического комитета Гвинеи (протокол № 129/CNERS/16 от 31.08.2015). Материал забирали после подписания взрослыми пациентами информированного согласия, а у несовершеннолетних – после разрешения родителей или законных представителей. Практически здоровые лица, принимавшие участие в исследовании, дополнительно подтверждали, что в 2014–2016 гг. не были инфицированы вирусом Эбола, но не исключали контакт с дикими и домашними животными.
Результаты
В результате работы специфические антитела класса IgG к вирусу Эбола в сыворотках крови пациентов госпиталя через 1 мес после завершения болезни выявляли в титре от 1 : 200 до 1 : 800. К 12 мес уровень антител во всех образцах снизился до титра 1 : 100 и продолжал держаться до 48 мес, а после 6 лет (72 мес) наблюдений во всех случаях был получен отрицательный результат (табл. 1).
При исследовании 3939 образцов крови от практически здоровых жителей Гвинеи специфические антитела класса IgG к вирусу Эбола были выявлены в 222 случаях, что составило 5,6% (95% ДИ 4,9–6,4%). Из общего количества положительных проб 119 (53,6%) принадлежали мужчинам, а 103 (46,4%) – женщинам. Достоверной зависимости уровня иммунной прослойки от гендерной принадлежности обследованных лиц не выявлено. Максимальный процент позитивных проб был выявлен в возрастной группе лиц старше 70 лет (12,3% (95% ДИ 8,9–16,6%)), а минимальный – у жителей страны в возрасте от 10 до 20 лет (3,2% (95% ДИ 2,0–5,0%)).
Бо́льшая часть положительных образцов была собрана на территории Лесной Гвинеи (7,7% (95% ДИ 6,2–9,5%)), где в феврале–апреле 2021 г. отмечалась вспышка БВВЭ [3], а меньшая – в Верхней Гвинее (4,5%) (табл. 2, рисунок). Иммунная прослойка к возбудителю БВВЭ для жителей Средней и Нижней (Приморской) Гвинеи зарегистрирована на уровне 5,5% (95% ДИ 4,3–7,2%) и 4,9% (95% ДИ 3,8–6,3%) соответственно.
Рисунок. Результаты выявления антител класса IgG к вирусу Эбола у жителей различных ландшафтно-географических зон Гвинеи.
Figure. The results of the detection of IgG antibodies to Ebola virus in residents of various landscape-geographical zones of Guinea.
Обсуждение
Таким образом, в настоящем исследовании было показано, что высокий уровень постинфекционного иммунитета у людей после перенесенной БВВЭ (т.е. при разведении сыворотки крови в титре, превышающем 1 : 100) сохраняется непродолжительное время (в течение первых 6 мес), что соответствует данным, полученным и другими авторами [14], но не исключает возможность повторного заражения в будущем. И, конечно, при проведении исследований такого плана было бы интересно изучить и изменения клеточного иммунитета, что не всегда возможно в имеющихся условиях.
Полученные современные сведения о выявлении специфических антител класса IgG к возбудителю БВВЭ у практически здоровых жителей Гвинейской Республики подтверждают высказанные ранее предположения о распространении вируса Эбола на территории страны [22, 23]. Следует отметить, что наиболее высокий уровень иммунной прослойки населения регистрируется в Лесной Гвинее, и это достоверно выше среднестатистических значений по стране (табл. 2, рисунок). Данная территория географически относится к поясу тропических дождевых лесов, где, по наблюдениям многих авторов, циркуляция вируса Эбола является более активной [17]. Население в большинстве своем ведет оседлый образ жизни, занимается охотой и земледелием. Самый низкий уровень отмечен в Верхней Гвинее, бо́льшая часть которой относится к зоне саванн, где местные жители, ведущие кочевой образ жизни, выпасают крупный и мелкий рогатый скот. Неоднородность иммунной прослойки можно объяснить различием климатических и экологических условий для проживания населения, а также отличающимися основными видами деятельности и методами ведения сельского хозяйства, что, безусловно, повышает риск контакта человека с возбудителем.
По данным ряда авторов, до 27,1% (95% ДИ 14,5–39,6%) случаев заражения вирусом Эбола протекает в виде бессимптомной инфекции [26, 27]. Эти сведения позволяют сделать предположение о более активной циркуляции возбудителя и постоянного контакта с ним у жителей Лесной Гвинеи, что периодически может приводить к эпидемиологическим осложнениям, о чем свидетельствуют события в 2021 г.
Заключение
Полученные в результате настоящей работы данные указывают на необходимость проводить дальнейшие исследования по изучению возможности циркуляции возбудителя БВВЭ на территории Гвинейской Республики, ориентируясь на конкретную местность. Одновременно необходимо продолжать и регулярный эпизоотологический мониторинг с целью выявления возможных видов теплокровных носителей вируса Эбола на территории разных ландшафтно-географических зон Гвинейской Республики.
1 Health worker Ebola infections in Guinea, Liberia and Sierra Leone Preliminary report. WHO/EVD/SDS/REPORT/2015.1 [Электронный ресурс]. URL. https://www.who.int/publications/i/item/WHO-EVD-SDS-REPORT-2015.1 (дата обращения 09.11.2024).
Об авторах
Екатерина Владимировна Найденова
ФКУН Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора
Автор, ответственный за переписку.
Email: katim2003@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-6474-3696
канд. биол. наук, ведущий научный сотрудник отдела диагностики инфекционных болезней
Россия, 410005, г. СаратовМихаил Юрьевич Карташов
ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Email: Mikkartash@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-7857-6822
канд. биол. наук, старший научный сотрудник отдела флавивирусных инфекций
Россия, 630559, п.г.т. Кольцово, Новосибирская обл.Ирина Сергеевна Шульгина
ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Email: Shuigina.is@vector.ru
ORCID iD: 0000-0002-6850-338X
младший научный сотрудник отдела коллекции микроорганизмов
Россия, 630559, п.г.т. Кольцово, Новосибирская обл.Степан Александрович Пьянков
ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Email: pyanstep@gmail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6593-6614
ведущий научный сотрудник отдела коллекции микроорганизмов
Россия, 630559, п.г.т. Кольцово, Новосибирская обл.Максим Андреевич Кулагин
ФКУН Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора
Email: rusrapi@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6423-1460
младший научный сотрудник отдела диагностики инфекционных болезней
Россия, 410005, г. СаратовМамадю Бандикура Ба
Исследовательский институт прикладной биологии Гвинеи
Email: boundoukhourabah@gmail.ru
ORCID iD: 0000-0002-4565-269X
научный сотрудник
Гвинея, г. КиндиаИбрагим Нурдин
Лаборатория вирусных геморрагических лихорадок
Email: Ibrahimndin@yahoo.fr
ORCID iD: 0000-0002-2970-9676
канд. биол. наук, научный сотрудник, директор
Гвинея, г. КонакриМагассуба Н’Фалли
Лаборатория вирусных геморрагических лихорадок
Email: cmagassouba01@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-3760-6642
канд. биол. наук, научный консультант
Гвинея, г. КонакриВиктор Коному
Научный клинико-диагностический центр эпидемиологии и микробиологии
Email: Saet-64@yandex.ru
ORCID iD: 0009-0007-5010-0041
главный врач госпиталя
Гвинея, г. КиндиаМамед Заар Траоре
Исследовательский институт прикладной биологии Гвинеи
Email: dg@irbag.edu.gn
ORCID iD: 0000-0002-3811-8675
канд. биол. наук, Генеральный директор
Гвинея, г. КиндиаСанаба Бумбали
Лаборатория вирусных геморрагических лихорадок
Email: drboumbaly@yahoo.fr
ORCID iD: 0000-0002-4506-6033
канд. биол. наук, директор
Гвинея, г. КонакриВладимир Викторович Кутырев
ФКУН Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора
Email: rusrapi@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3788-3452
академик РАН, д-р мед. наук, профессор, директор
Россия, 410005, г. СаратовСписок литературы
- Gonzalez J.P., Herbreteau V., Morvan J., Leroy E.M. Ebola virus circulation in Africa: a balance between clinical expression and epidemiological silence. Bull. Soc. Pathol. Exot. 2005; 98(3): 210–7.
- Malvy D., McElroy A.K., de Clerck H., Günther S., van Griensven J. Ebola virus disease. Lancet. 2019; 393(10174): 936–48. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(18)33132-5
- Keita A.K., Koundouno F.R., Faye M., Düx A., Hinzmann J., Diallo H., et al. Resurgence of Ebola virus in 2021 in Guinea suggests a new paradigm for outbreaks. Nature. 2021; 597(7877): 539–43. https://doi.org/10.1038/s41586-021-03901-9
- Pare B.C., Camara A.M., Camara A., Kourouma M., Enogo K., Camara M.S., et al. Ebola outbreak in Guinea, 2021: Clinical care of patients with Ebola virus disease. S. Afr. J. Infect. Dis. 2023; 38(1): 454. https://doi.org/10.4102/sajid.v38i1.454
- Kritsky A.A., Keita S., Magassouba N., Krasnov Ya.M., Safronov V.A., Naidenova E.V., et al. Ebola virus disease outbreak in the Republic of Guinea 2021: hypotheses of origin. bioRxiv. Preprint. 2021. https://doi.org/10.1101/2021.04.23.440924
- Лопатин А.А., Найденова Е.В., Сафронов В.А., Раздорский А.С., Уткин Д.В., Касьян Ж.А. и др. Изучение сохранения вируса Эбола в биологических жидкостях пациента на поздних стадиях выздоровления. Проблемы особо опасных инфекций. 2015; (3): 73–6. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2015-3-73-76
- Diallo B., Sissoko D., Loman N.J., Bah H.A., Bah H., Worrell M.C., et al. Resurgence of Ebola virus disease in Guinea linked to a survivor with virus persistence in seminal fluid for more than 500 days. Clin. Infect. Dis. 2016; 63(10): 1353–6. https://doi.org/10.1093/cid/ciw601
- Geisbert T.W. Persistence of Ebola virus RNA in seminal fluid. Lancet Glob. Health. 2017; 5(1): e12–3. https://doi.org/10.1016/S2214-109X(16)30336-9
- Mukadi-Bamuleka D., Edidi-Atani F., Morales-Betoulle M.E., Legand A., Nkuba-Ndaye A., Bulabula-Penge J., et al. Fatal meningoencephalitis associated with Ebola virus persistence in two survivors of Ebola virus disease in the Democratic Republic of the Congo: a case report study. Lancet Microbe. 2024; 5(10): 100905. https://doi.org/10.1016/S2666-5247(24)00137-X
- Fallah M.P., Reilly C., Van Ryn C., Badio M., Camanor S.W., Kaler S.G., et al. Pregnancy, pregnancy outcomes, and infant growth and development after recovery from Ebola virus disease in Liberia: an observational cohort study. Lancet Glob. Health. 2023; 11(7): e1053–60. https://doi.org/10.1016/S2214-109X(23)00210-3
- Baize S., Leroy E.M., Georges-Courbot M.C., Capron M., Lansoud-Soukate J., Debré P., et al. Defective humoral responses and extensive intravascular apoptosis are associated with fatal outcome in Ebola virus-infected patients. Nat. Med. 1999; 5(4): 423–6. https://doi.org/10.1038/7422
- Natesan M., Jensen S.M., Keasey S.L., Kamata T., Kuehne A.I., Stonier S.W., et al. Human survivors of disease outbreaks caused by Ebola or Marburg virus exhibit cross-reactive and long-lived antibody responses. Clin. Vaccine Immunol. 2016; 23(8): 717–24. https://doi.org/10.1128/CVI.00107-16
- Rimoin A.W., Lu K., Bramble M.S., Steffen I., Doshi R.H., Hoff N.A., et al. Ebola virus neutralizing antibodies detectable in survivors of the Yambuku, Zaire outbreak 40 years after infection. J. Infect. Dis. 2018; 217(2): 223–31. https://doi.org/10.1093/infdis/jix584
- Diallo M.S.K., Ayouba A., Keita A.K., Thaurignac G., Sow M.S., Kpamou C., et al. Temporal evolution of the humoral antibody response after Ebola virus disease in Guinea: a 60-month observational prospective cohort study. Lancet Microbe. 2021; 2(12): e676–84. https://doi.org/10.1016/S2666-5247(21)00170-1
- Gonzalez J.P., Josse R., Johnson E.D., Merlin M., Georges A.J., Abandja J., et al. Antibody prevalence against haemorrhagic fever viruses in randomized representative Central African populations. Res. Virol. 1989; 140(4): 319–31. https://doi.org/10.1016/s0923-2516(89)80112-8
- Busico K.M., Marshall K.L., Ksiazek T.G., Roels T.H., Fleerackers Y., Feldmann H., et al. Prevalence of IgG antibodies to Ebola virus in individuals during an Ebola outbreak, Democratic Republic of the Congo, 1995. J. Infect. Dis. 1999; 179(Suppl. 1): S102–7. https://doi.org/10.1086/514309
- Rowe A.K., Bertolli J., Khan A.S., Mukunu R., Muyembe-Tamfum J.J., Bressler D., et al. Clinical, virologic, and immunologic follow-up of convalescent Ebola hemorrhagic fever patients and their household contacts, Kikwit, Democratic Republic of the Congo. Commission de Lutte contre les Epidémies à Kikwit. J. Infect. Dis. 1999; 179(Suppl. 1): S28–35. https://doi.org/10.1086/514318
- Becquart P., Wauquier N., Mahlakõiv T., Nkoghe D., Padilla C., Souris M., et al. High prevalence of both humoral and cellular immunity to Zaire ebolavirus among rural populations in Gabon. PLoS One. 2010; 5(2): e9126. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009126
- Bouree P., Bergmann J.F. Ebola virus infection in man: a serological and epidemiological survey in the Cameroons. Am. J. Trop. Med. Hyg. 1983; 32(6): 1465–6. https://doi.org/10.4269/ajtmh.1983.32.1465
- Gonzalez J.P., Nakoune E., Slenczka W., Vidal P., Morvan J.M. Ebola and Marburg virus antibody prevalence in selected populations of the Central African Republic. Microbes Infect. 2000; 2(1): 39–44. https://doi.org/10.1016/s1286-4579(00)00287-2
- Bane S., Rosenke K., Maiga O., Feldmann F., Meade-White K., Callison J., et al. Ebola virus IgG seroprevalence in Southern Mali. Emerg. Infect. Dis. 2021; 27(6): 1681–4. https://doi.org/10.3201/eid2706.203510
- Иванов А.П., Ткаченко Е.А. ван дер Гроен Г., Бутенко А.М., Константинов О.К. Непрямой иммуноферментный метод для лабораторной диагностики геморрагических лихорадок Ласса и Эбола. Вопросы вирусологии. 1986; 31(2): 186–90.
- Бутенко А.М. Ретроспективные данные по изучению лихорадки Эбола в Африке. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2015; 20(1): 39–43. https://elibrary.ru/ttmbcv
- Попова А.Ю., Смоленский В.Ю., Найденова Е.В., Щербакова С.А., Сафронов В.А., Коломоец Е.В. и др. Россия – Гвинея: исторические аспекты научного взаимодействия в области борьбы с опасными инфекционными болезнями. Проблемы особо опасных инфекций. 2024; (3): 6–14. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2024-3-6-14
- Пьянков С.А., Пьянков О.В., Найденова Е.В., Агафонов А.П., Boiro M.Y., Солодкий В.В. и др. Опыт использования метода ИФА для выявления антител к вирусу Эбола при работе бригады СПЭБ в Гвинейской Республике. Проблемы особо опасных инфекций. 2016; (3): 71–5. https://elibrary.ru/xantbd
- Dean N.E., Halloran M.E., Yang Y., Longini I.M. Transmissibility and pathogenicity of Ebola virus: a systematic review and meta-analysis of household secondary attack rate and asymptomatic infection. Clin. Infect. Dis. 2016; 62(10): 1277–86. https://doi.org/10.1093/cid/ciw114
- Bower H., Glynn J.R. A systematic review and meta-analysis of seroprevalence surveys of ebolavirus infection. Sci. Data. 2017; 4(1): 160133. https://doi.org/10.1038/sdata.2016.133
Дополнительные файлы
