Experience with the use of pharmacopoeial reference material for the activity of measles vaccine

Anna S. Binyatova; Бинятова Анна Станиславовна; Tatyana N. Yunasova; Юнасова Татьяна Николаевна; Rauza A. Volkova; Волкова Рауза Асхатовна; Alexey Yu. Butirskiy; Бутырский Алексей Юрьевич; Tatyana N. Ilyasova; Ильясова Татьяна Николаевна; Karine А. Sarkisyan; Саркисян Каринэ Арташесовна; Artashes A. Movsesyants; Мовсесянц Арташес Авакович

doi:10.36233/0507-4088-185

Опыт применения фармакопейного стандартного образца активности коревой вакцины

Авторы: Бинятова А.С.¹, Юнасова Т.Н.¹, Волкова Р.А.¹, Бутырский А.Ю.¹, Ильясова Т.Н.¹, Саркисян К.А.¹, Мовсесянц А.А.¹
Учреждения:
1. ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава России
Выпуск: Том 68, № 4 (2023)
Страницы: 327-333
Раздел: ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Дата подачи: 25.07.2023
Дата публикации: 21.09.2023
URL: https://virusjour.crie.ru/jour/article/view/14571
DOI: https://doi.org/10.36233/0507-4088-185
EDN: https://elibrary.ru/ohwjub
ID: 14571

Цитировать

Полный текст

Аннотация
Полный текст
Об авторах
Список литературы
Дополнительные файлы
Статистика

Аннотация

Введение. В связи с возросшей заболеваемостью корью в России и в мире препараты для профилактики кори особенно востребованы. Обеспечение качества коревой вакцины для проведения эффективной профилактики заболевания входит в сферу задач государственной политики нашей страны.

Цель исследования. Оценка опыта применения фармакопейного стандартного образца активности коревой вакцины при определении специфической активности вируса кори в вакцинах с коревым компонентом, использующихся в РФ для профилактики кори.

Материалы и методы. Объектом исследования был фармакопейный стандартный образец (ФСО) активности живой коревой вакцины серии 10, анализ активности которого проводили при определении специфической активности коревой, паротитно-коревой и комбинированной вакцины для профилактики кори, краснухи и паротита, а также по материалам сводных протоколов производства указанных вакцин.

Результаты. Показано, что титр вируса кори в ФСО при каждом определении специфической активности вируса кори в вакцинах в ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России в 2021–2022 гг., а также по данным сводных протоколов производства был в границах аттестованного значения (4,63 ± 0,5) lgТЦД₅₀/0,5 мл, а результаты испытаний соответствовали критериям приемлемости согласно требованиям нормативной документации. За время наблюдения среднее значение титра ФСО (4,61 lgТЦД₅₀/0,5 мл) практически не отличалось от среднего значения аттестованной характеристики ФСО, стандартное отклонение среднего значения титра вируса кори в ФСО не превышало 0,15 lgТЦД₅₀, что свидетельствовало о стабильности аналитической работы на предприятии и в Испытательном центре ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России.

Заключение. Полученные данные свидетельствуют о стабильной активности ФСО, о правильности определения титра вируса кори в прививочной дозе препаратов и о валидности метода контроля специфической активности вируса кори в вакцинах.

Ключевые слова

фармакопейный стандартный образец, вакцины для профилактики кори, качество, контроль, критерии пригодности системы, критерии приемлемости результатов

Полный текст

Введение

Вакцинация против кори в нашей стране является обязательной и проводится в соответствии с Национальным календарем профилактических прививок, утвержденным Приказом Министерства здравоохранения Российской Федерации (РФ)¹. Благодаря массовой и плановой вакцинопрофилактике кори, проводящейся в России с 1968 г., а также системе мероприятий по элиминации кори в РФ, проводящихся в рамках программ Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) и национальных программ², начиная с 2002 г. по настоящее время, достигнуты значительные успехи в борьбе с этой инфекцией. В соответствии с индикативными критериями элиминации Россия в 2010 г. вступила в стадию элиминации кори [1]. По данным федерального статистического наблюдения, охват вакцинацией против кори декретированных групп населения в нашей стране в течение ряда лет составляет 97–98%, что соответствует целевым показателям, определенным ВОЗ³. При этом вспышки кори периодически происходят в России.

Два подъема заболеваемости корью в России зарегистрированы в 2014 и 2018–2019 гг. В 2020 и 2021 гг. заболевания корью в России практически не было. В 2021 г. был зарегистрирован один случай заболевания корью; в 2022 г. – 102 случая, но за первые 4 месяца 2023 г. число заболевших корью в 44 регионах России приблизилось к 1000⁴. Причиной настоящего подъема заболеваемости корью в России эпидемиологи считают активные миграционные процессы и завоз инфекции из эпидемически неблагополучных стран, а также увеличение неиммунной прослойки населения в некоторых регионах нашей страны вследствие отказа от вакцинации вообще и от кори в частности⁵.

На фоне карантинных мероприятий по поводу пандемии COVID-19 в 2020–2021 гг. в ряде регионов мира наблюдался некоторый спад заболеваемости корью. Вместе с тем вследствие снижения охвата вакцинацией против кори, связанного с «ковидными» ограничениями, риск возникновения вспышек кори увеличился. В 2020 г. высокая заболеваемость корью (от 600 до 3000 заболевших) уже регистрировалась в Индии, Узбекистане, Филиппинах, Казахстане, Турции, Румынии, Киргизии. В 2021 г. отмечены крупные вспышки кори в Конго, Нигерии, Афганистане, а также в Украине и Таджикистане. В 2023 г. выросла заболеваемость корью в Турции, в Великобритании, Франции и Польше. Особую тревогу вызывают вспышки кори в ближнем зарубежье – в Украине, Таджикистане и Казахстане⁶.

Профилактические и противоэпидемические мероприятия, своевременно проводящиеся органами здравоохранения в РФ в очагах, как правило, обеспечивают быстрое купирование очагов и снижение угрозы массовой заболеваемости. В соответствии с Постановлением Главного Государственного санитарного врача РФ с 3 апреля и до конца 2023 г. в России проводится подчищающая иммунизация населения и трудовых мигрантов против кори⁷. Вакцинация затрагивает тех, кто не был привит против кори раньше, не болел и не имеет сведений о прививках.

Подводя итоги вышесказанному, следует отметить, что в связи с возросшей заболеваемостью корью в России и в мире препараты для профилактики кори в нашей стране в настоящее время особенно востребованы. Обеспечение качества коревой вакцины для проведения эффективной иммунопрофилактики является предметом пристального внимания национальных уполномоченных органов и входит в сферу задач государственной политики нашей страны.

Для профилактики кори в России используется отечественная моновалентная коревая вакцина двух производителей – АО «НПО «Микроген» и ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора, а также две комбинированные вакцины производства АО «НПО «Микроген»: для профилактики кори и паротита, для профилактики кори, краснухи и паротита. Эти препараты рекомендованы к применению Национальным календарем профилактических прививок, что накладывает на контролирующие органы особую ответственность за их качество, т.к. они являются препаратами массового применения и используются для профилактики кори у населения. Ранее нами было показано, что названные отечественные вакцины соответствуют международным требованиям и характеризуются стабильным качеством [2].

Специфическая активность является одним из важнейших показателей качества вакцин. Регламентированный уровень содержания вируса кори в вакцине гарантирует эффективность препарата. Таким образом, важность достоверного количественного определения специфической активности вируса в прививочной дозе не требует доказательств. При этом адекватность интерпретации получаемых результатов обеспечивается использованием фармакопейного стандартного образца (ФСО), предназначенного прежде всего для оценки пригодности системы. Кроме того, применение ФСО также позволяет проводить оценку стабильности результатов при определении специфической активности вируса кори в вакцинах⁸.

Цель исследования – оценка опыта применения ФСО активности коревой вакцины при определении специфической активности вируса кори в вакцинах с коревым компонентом, использующихся в РФ для профилактики кори.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

Провести ретроспективный анализ результатов определения специфической активности ФСО по сводным протоколам производства вакцин, содержащих коревой компонент, за 2021–2022 гг.
Провести анализ результатов испытаний специфической активности ФСО в Испытательном центре (ИЦ) ФГБУ «НЦЭСМП»
Провести сравнительный анализ результатов определения специфической активности ФСО на предприятии и в ИЦ.

Как отмечено в Руководстве ВОЗ 2010 г. по независимому выпуску серий вакцин регуляторным органом, решающее значение для интерпретации результатов испытания специфической активности вакцин имеет использование стандартного образца. Отклонения значения титра вируса в стандартном образце позволят своевременно выявить проблемы анализа⁹.

В соответствии с рекомендациями ВОЗ, для адекватной оценки титра вируса кори в вакцине стандартный образец должен быть аналогичен вакцине по технологии изготовления и составу. При контроле коммерческих серий вышеуказанных вакцин предприятием и внешней испытательной лабораторией важно использовать единый стандартный образец и единый метод определения активности. Испытания активности контролируемых серий вакцин и ФСО проводят с использованием калиброванного и поверенного оборудования¹⁰.

Использование ФСО активности коревой вакцины для подтверждения правильности определения количества вируса кори в прививочной дозе профилактических препаратов является требованием нормативной документации (НД) на вакцины¹¹.

Материалы и методы

Объектом исследования был ФСО активности живой коревой вакцины серии 10 (ранее – ОСО 42-28-347-2017, сер. 10).

ФСО был приготовлен на предприятии АО «НПО «Микроген» в соответствии с требованиями НД на вакцину коревую культуральную живую и представлял собой часть полуфабриката коммерческой серии с дополнительным количеством стабилизатора. ФСО аттестован в установленном порядке в ИЦ и включен в Реестр фармакопейных стандартных образцов Государственной фармакопеи Российской Федерации¹².

Аттестованной характеристикой ФСО активности коревой вакцины является специфическая активность. Все испытания по определению специфической активности вируса кори проводили на культуре клеток Vero. В качестве аттестованной характеристики ФСО серии 10 было принято среднее арифметическое значение титра ФСО (по результатам 90 определений), равное (4,63 ± 0,5) lgТЦД₅₀/0,5 мл при доверительной вероятности 0,95.

При каждом проведении контроля специфической активности вируса кори в вакцине, в соответствии с требованиями НД, трижды титровали одну ампулу ФСО. Для оценки приемлемости получаемых результатов проводили расчет доверительного интервала (ДИ) среднего значения титра ФСО, определенного при трехкратном титровании 1 ампулы. Критерии приемлемости результатов изложены в НД и соответствуют Европейской фармакопее 10-го издания (ЕФ 10)¹³:

– ДИ (р = 0,95) среднего значения титра ФСО, определенного при трехкратном титровании 1 ампулы, должен быть в пределах ± 0,3 lgТЦД₅₀;

– активность ФСО не должна отличаться более чем на 0,5 lgТЦД₅₀ от аттестованного значения.

Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы Stat Plus 7.

Результаты

Был проведен ретроспективный анализ результатов 67 испытаний в ИЦ по определению специфической активности вируса кори в ФСО при контроле ряда вакцин с коревым компонентом в 2021–2022 гг.: «Вакцины для профилактики кори», «Вакцины для профилактики кори и паротита», «Вакцины для профилактики кори, краснухи и паротита». Проанализировано также 130 сводных протоколов производства и контроля указанных вакцин, произведенных в АО «НПО «Микроген» за тот же период.

При оценке приемлемости результатов испытаний коммерческих серий вакцин для профилактики кори по показателю «Специфическая активность» установлено, что ДИ при каждом анализе границ среднего значения титра ОСО был менее 0,3 lgТЦД₅₀ и соответствовал критериям приемлемости результатов контроля, указанным в НД на вакцины. Результаты определения специфической активности ФСО серии 10, полученные при контроле каждой серии препарата трех наименований вакцин на предприятии и в ИЦ в 2021–2022 гг., представлены в таблице. По полученным результатам составлены контрольные карты (рис. 1, 2).

Таблица. Активность вируса кори в ФСО серии 10 при проведении контроля препаратов с коревым компонентом по показателю «Специфическая активность» на предприятии и в ИЦ

Table. The activity of the measles virus in PRM series 10 during the control of preparations with the measles component in terms of «Specific activity» at the enterprise and in the evaluation center (EC)

Наименования вакцин, при испытании которых определяли активность ФСО Names of vaccines, during the testing of which the activity of PRM was determined	Активность вируса кори в ФСО серии 10 (аттестованное значение ФСО: (4,63±0,5) lgТЦД₅₀/0,5 мл Measles virus activity in PRM series 10 (certified PRM value: (4.63 ± 0.5) lgTCD₅₀/0.5 ml
	АО «НПО «Микроген» AO «NPO «Mikrogen»			Испытательный центр Evaluation center
	количество испытаний number of trials	Х ± S*	ДИ в lgТЦД₅₀/0,5 мл DI in lgTCD₅₀/0.5 ml	количество испытаний number of trials	Х ± S	ДИ в lgТЦД₅₀/0,5 мл DI in lgTCD₅₀/0.5 ml
Живая коревая вакцина Live measles vaccine	25	4,58 ± 0,14	< 0,3	15	4,64 ± 0,10	0–0,2
Паротитно-коревая вакцина Mumps- measles vaccine	37	4,65 ± 0,15	< 0,3	26	4,57 ± 0,11	0–0,2
«Вактривир» VAKTRIVIR	68	4,6 ± 0,14	< 0,3	26	4,64 ± 0,13	0–0,2
Все указанные вакцины All above vaccines combined	130	4,61 ± 0,14	< 0,3	67	4,61 ± 0,11	0–0,2

Примечание: *Х ± S – среднее значение титра ± стандартное отклонение; **ДИ – доверительный интервал среднего значения титра ФСО, определенного при трехкратном титровании 1 ампулы.

Note: *Х ± S – mean titer value ± standard deviation; **DI – confidence interval of the average value of the PRM titer, determined by three-fold titration of one ampoule.

Рис. 1. Результаты определения специфической активности ФСО активности коревой вакцины на предприятии (контрольная карта). По оси абсцисс – номер испытания в порядке проведения; по оси ординат – lgТЦД₅₀/0,5 мл.

Рис. 2. Результаты определения специфической активности ФСО активности коревой вакцины в Испытательном центре (контрольная карта). По оси абсцисс – номер испытания в порядке проведения; по оси ординат – lgТЦД₅₀/0,5 мл.

Из таблицы видно, что при определении специфической активности соответствующих вакцин в 2021–2022 гг. среднее значение титра вируса кори в ФСО составило (4,61±0,11) lgТЦД₅₀/0,5 мл и находилось в границах аттестованного значения как в ИЦ, так и на предприятии; ДИ среднего значения активности ФСО при трехкратном титровании 1 ампулы не превышал 0,3 lgТЦД_50,что свидетельствовало о соответствии полученных данных критериям приемлемости результатов контроля активности испытуемых препаратов.

Из таблицы и рисунков 1 и 2 видно, что стандартное отклонение среднего значения активности ФСО за период наблюдения находилось в пределах от 0,10 до 0,15 lgТЦД₅₀ и в основном не превышало границы ±2S; только в двух испытаниях на предприятии полученные результаты были незначительно выше границы +2S, тем не менее подобные факты требуют внимания и анализа.

Таким образом, опыт применения ФСО при испытаниях вакцин для профилактики кори по показателю «Специфическая активность» свидетельствует о стабильности работы в лабораториях ИЦ и предприятия, проводящих эти испытания.

Обсуждение

Проведен ретроспективный анализ специфической активности ФСО активности коревой вакцины при контроле иммунобиологических препаратов с коревым компонентом на специфическую активность в ИЦ и на предприятии в 2021–2022 гг.

Необходимо подчеркнуть, что в течение анализируемого периода времени испытания активности ФСО серии 10 при контроле активности коммерческих препаратов с коревым компонентом были проведены разными операторами в двух разных учреждениях с разным оборудованием, но по единой методике и с использованием образцов одного и того же ФСО. Анализ полученных результатов показал, что среднее значение активности вируса кори в ФСО серии 10 при испытаниях на предприятии и в ИЦ было близко к аттестованному значению, что позволило сделать заключение о правильности определения содержания вируса кори в испытуемых сериях препаратов.

Также важно отметить, что при испытаниях активности ФСО и серий вакцины, проводившихся на перевиваемой культуре клеток Vero, пассажные уровни культуры клеток на предприятии и в ИЦ менялись от 3-го до 14-го пассажа по объективным причинам, связанным со спецификой ведения культуры клеток. При этом разброс среднего значения активности ФСО находился в пределах от 0,10 до 0,15 lgТЦД₅₀. Эти данные показали, что меняющиеся уровни пассажа культуры клеток не влияют на результаты испытаний, что свидетельствует об устойчивости метода в указанном диапазоне пассажей. Полученные данные подтверждают валидность метода контроля специфической активности вируса кори и его соответствие критериям пригодности системы.

Таким образом, проведенные исследования показывают эффективность использования ФСО при испытаниях вакцин с коревым компонентом по показателю «Специфическая активность» как с целью подтверждения приемлемости получаемых результатов согласно критериям пригодности системы, так и с целью оценки стабильности аналитической работы при испытании вакцин по этому показателю.

Выводы

Ретроспективная оценка результатов определения активности вируса кори в образцах ФСО активности коревой вакцины по сводным протоколам производства и по результатам испытаний в ИЦ в 2021–2022 гг. показала, что активность ФСО серии 10 находилась в границах аттестованного значения.
Соответствие активности ФСО, определяемой при каждом испытании вышеназванных вакцин, критериям пригодности системы/приемлемости результатов позволяет учитывать результаты контроля активности испытуемых препаратов.
Среднее значение титра ФСО (4,61 lgТЦД₅₀/0,5 мл) практически не отличалось от значения аттестованной характеристики ФСО (4,63 lgТЦД₅₀/0,5 мл); стандартное отклонение среднего значения активности ФСО серии 10 на предприятии и в ИЦ при испытании вакцин находилось в диапазоне от 0,10 до 0,15 lgТЦД_50,т.е. не превышало 0,3 lgТЦД₅₀, что свидетельствует о стабильности аналитической работы в испытательном центре и на предприятии.

¹ Приказ Минздрава России №125н «Об утверждении национального календаря профилактических прививок и календаря профилактических прививок по эпидемическим показаниям». М.; 2014. Available at: https://10.rospotrebnadzor.ru/ upload/medialibrary/0bc/prikaz-ministerstva-zdravookhraneniya-rf-ot-21.03.2014-_125n.pdf

² Роспотребнадзор. О Программе «Элиминация кори и краснухи в Российской Федерации (2016-2020 гг)». Available at: http://25.rospotrebnadzor.ru/rss_all/-/asset_publisher/Kq6J/content/id/336749

³ Роспотребнадзор. Программа «Элиминации кори и краснухи в Российской Федерации» (2016-2020 гг). Available at: https:// www.rospotrebnadzor.ru/upload/iblock/bcf/programma_elyuminatsii_kori_i_krasnukhi_v_rf_2016_2020_gg.pdf; Распоряжение Правительства РФ от 18.09.2020 № 2390-р. Available at: http://static.government.ru/media/files/Zz7brckXMkAQTZHTA6ixAxlY4lhYBEeM.pdf

⁴ Государственный доклад «О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения Российской Федерации в 2022 году». Available at: https://www.rospotrebnadzor.ru/documents/details.php?ELEMENT_ID=25076; Коммерсантъ. Покорение кори. Available at: https://www.kommersant.ru/doc/5967666; Независимая газета. Корь вернулась в Европу и Россию. Available at: https://www.ng.ru/health/2023-0418/8_8709_measles. html?PREVIEW_SECRET_KEY=463dbf111c6725c53063ca9d1c5d252c

⁵ Фарммедпром. В Россию возвращается корь – какие меры будут приняты? Available at: https://pharmmedprom.ru/news/v-rossiyu-vozvraschaetsya-kor-kakie-meri-budut-prinyati/

⁶ Роспотребнадзор. Эпидемиологическая ситуация по заболеваемости корью в России и мире. Available at: https://12.rospotrebnadzor.ru/c/journal/view_article_content?groupId=10156&articleId=1025584&version=1.3

⁷ Ведомости. В России растет заболеваемость корью. Available at: https://www.vedomosti.ru/society/articles/2023/04/11/ 970345-v-rossii-rastet-zabolevaemost-koryu

⁸ Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий (ISO/IEC 17025:2019, IDT). Available at: https:// dsm.consultant.ru/cgi/online.cgi?req=doc&ts=nbQwNiT01l3SclkB1&cacheid=2D3611B8C1FC0CFAD6B9A90262049B6B&mode=splus&rnd=Nk9Btw&base=LAW&n=332887#mrVwNiTkzkmawFkY2

⁹ WHO. Guidelines for independent lot release of vaccines by regulatory authorities, Annex 2, TRS № 978; 2010. Available at: https:// www.who.int/publications/m/item/guidelines-for-independent-lot-release-of-vaccines-annex-2-trs-no-978

¹⁰ WHO. Recommendations for the preparation, characterization and establishment of international and other biological reference standards (revised 2004), Annex 2, 2006, TRS № 932. Available at: https://www.who.int/publications/m/item/annex-2-trs-no-932

¹¹ Нормативная документация ЛС-002140-190320, изм. 1-4 на Вакцину коревую культуральную живую; 2011; Нормативная документация Р N000544/01-301219, изм. 1-4 на Вакцину паротитно-коревую культуральную живую; 2008; НД ЛП-005859-171019 «ВАКТРИВИР Комбинированная вакцина против кори, краснухи и паротита культуральная живая»; 2019.

¹² Приказ Минздрава России № 202 «О метрологической службе Министерства здравоохранения российской федерации в сфере обращения лекарственных средств для медицинского применения»; 2020.

¹³ Вакцина для профилактики кори, паротита и краснухи (живая). Европейская фармакопея; 2019: 1057.