Разработка высокочувствительного устойчивого к нуклеотидным несовпадениям ПЦР-теста для качественного и количественного определения РНК ВИЧ-1


Цитировать

Полный текст

Аннотация

На основе метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени был разработан пригодный для применения в клинической практике набор "РеалБест РНК ВИЧ" для обнаружения РНК ВИЧ-1 и определения вирусной нагрузки в образцах плазмы или сыворотки крови. Благодаря выбору высококонсервативного района генома, а также проведенному экспериментальному исследованию влияния на ПЦР различных мисматчей (нуклеотидные несовпадения) в комплексах праймер-матрица и зонд-матрица с последующим подбором оптимальной композиции олигонуклеотидов разработанный тест позволяет выявлять и измерять концентрацию всех субтипов ВИЧ-1 группы M. Набор обеспечивает высокую воспроизводимость и чувствительность анализа и широкий динамический диапазон измерения вирусных нагрузок (от 20 до 107 МЕ/мл сыворотки или плазмы крови).

Список литературы

  1. Бобков А. Ф., Казеннова Е. В., Селимова Л. М. и др. Молекулярно-вирусологические особенности эпидемии ВИЧ-инфекции в России и других странах СНГ // Вестн. РАМН. - 2003. - № 12. - С. 83-84.
  2. Доклад о глобальной эпидемии СПИДа. - Женева, 2008.
  3. Amendola A., Bordi L., Angeletti C. et al. Comparison of LCx with other current viral load assays for detecting and quantifying human immuinodeficiency virus type 1 RNA in patients infected with the circulating recombinant form A/G (CRF02) // J. Clin. Microbiol. - 2004. - Vol. 42. - P. 811-815.
  4. Chamberland M. E., Lackritz E. M., Busch M. P. HIV screening of the blood supply in developed and developing countries // AIDS Rev. - 2001. - Vol. 3. - P. 24-35.
  5. Christopherson C., Sninsky J., Kwok S. The effects of internal primer-template mismatches on RT-PCR: HIV-1 model studies // Nucl. Acids Res. - 1997. - Vol. 25. - P. 654-658.
  6. Colson P., Solas C., Moreaud J. et al. Impaired quantification of plasma HIV-1 RNA with a commercialized real-time PCR assay in a couple of HIV-1-infected individuals // J. Clin. Virol. - 2007. - Vol. 39. - P. 226-229.
  7. Delwart E. L., Shpaer E. G., Louwagie J. et al. Genetic relationships determined by a DNA heteroduplex mobility analysis of HIV-1 env genes // Science. - 1993. - Vol. 262. - P. 1257- 1261.
  8. Finney D. J. Probit analysis. - Cambridge, 1980.
  9. Korber B. T. M., Allen E. E., Farmer A. D., Myers G. L. Heterogeneity of HIV-1 and HIV-2 // AIDS. - 1995. - Vol. 9. - P. 5-18.
  10. Levy D. N., Aldrovandi G. M., Kutsch O., Shaw G. M. Dynamics of HIV-1 recombination in its natural target cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2004. - Vol. 101. - P. 4204-4209.
  11. McCutchan F. E. Global epidemiology of HIV // J. Med. Virol. - 2006. - Vol. 78. - P. 7-12.
  12. Ritter D., Taylor J., Walkenbach R. et al. Diagnostic testing for HIV type 1 RNA in seronegative blood // Am. J. Clin. Pathol. - 2000. - Vol. 113. - P. 128-134.
  13. Saag M. S., Holodniy M., Kuritzkes D. R. et al. HIV viral load markers in clinical practice // Nat. Med. - 1996. - Vol. 2. - P. 625-629.
  14. Saldanha J. Validation and standardisation of nucleic acid amplification technology (NAT) assays for the detection of viral contamination of blood and blood products // J. Clin. Virol. - 2001. - Vol. 20. - P. 7-13.
  15. Tang N., Huang S., Salituro J. et al. A RealTime HIV-1 viral load assay for automated quantitation of HIV-1 RNA in genetically diverse group M subtypes A-H, group O and group N samples // J. Virol. Meth. - 2007. - Vol. 146. - P. 236-245.
  16. Van der Kuyl A. C., Cornelissen M. Identifying HIV-1 dual infections // Retrovirology. - 2007. - Vol. 4. - P. 67-78.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Прасолова М.А., Иванов М.К., Дымшиц Г.М., Prasolova M.A., Ivanov M.K., Dymshits G.M., 2011

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС77-77676 от 29.01.2020.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах