Антивирусный эффект нового конъюгата пурина LAS-131 в отношении вируса простого герпеса 1 типа (Herpesviridae: Alphaherpesvirinae: Simplexvirus: Human alphaherpesvirus 1) in vitro

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Вирусы простого герпеса типа 1 (ВПГ-1) чрезвычайно широко распространены во всем мире и, подобно другим герпесвирусам, устанавливают пожизненные инфекции в организме хозяина. Спорадически реактивируясь, ВПГ-1 вызывает рецидивы как у иммунокомпетентных лиц, так и у имеющих ослабленный иммунитет и может стать причиной тяжелых заболеваний (слепота, энцефалит, генерализованные инфекции). Современные противогерпетические лекарственные средства, нацеленные главным образом на ингибирование репликации вирусной ДНК, не всегда оказываются достаточно эффективными, например из-за развития лекарственной резистентности. Как было показано нами ранее, новое оригинальное соединение LAS-131 высокоселективно ингибирует ре- продукцию ВПГ-1 (индекс селективности, SI = 63). В присутствии этого вещества в концентрации 20 мкг/мл титр ВПГ-1 (штамм L2) в условиях одноцикловой инфекции in vitro снижается на 4 lg.

Материал и методы. Чтобы установить этап(ы) жизненного цикла вируса, чувствительный(ные) к действию LAS-131, мы применили обычно используемый в мировой практике подход (метод варьирования времени добавления препарата, time-of-addition assay), позволяющий установить временнóй период, на который можно отсрочить введение тестируемого соединения без потери его противовирусной активности, и сравнить этот показатель с переломным временем введения ингибиторов с хорошо известным механизмом действия (in vitro).

Результаты. Нами впервые показано, что LAS-131 сохраняет выраженное противовирусное действие при внесении в экспериментальную систему не позднее 9 ч после инфицирования (p.i.), но не влияет на выход ВПГ-1 из клетки.

Обсуждение. Полученные результаты, а также известные данные о том, что в клеточной культуре, инфицированной ВПГ с высокой множественностью (≥1 БОЕ/кл), синтез вирусной ДНК прекращается через 9–12 ч после адсорбции, в совокупности позволяют предположить, что рассматриваемое соединение вмешивается в жизненный цикл ВПГ‑1 во время синтеза вирусной ДНК. Для точного установления биомишени, на которую действует LAS-131, необходимо проведение дальнейших исследований его механизма действия.

Полный текст

Введение

Вирус простого герпеса 1 типа (ВПГ-1) чрезвы­чайно широко распространён - по последним дан­ным, представленным ВОЗ, во всём мире инфициро­вано около 67% населения в возрасте до 50 лет [1]. После первичного инфицирования ВПГ устанавли­вает пожизненную латентную инфекцию с периоди­ческими рецидивами, тяжесть клинического течения которых напрямую зависит от функционального состояния иммунной системы: у иммунокомпроме- тированных пациентов герпес может поражать прак­тически все органы и ткани организма и даже при­водить к летальному исходу. Доступные в настоящее время этиотропные противогерпетические препара­ты 1 и 2 рядов (ингибиторы вирусной ДНК-поли- меразы) снижают тяжесть симптомов, уменьшают продолжительность и частоту рецидивов, однако не способны элиминировать вирус из организма и устранить скрытые ВПГ-инфекции. Помимо это­го, они могут оказаться недостаточно эффективны­ми в случае развития лекарственной резистентности у вируса [2][3], поэтому поиск новых антивирусных агентов сохраняет актуальность для практического здравоохранения.

Как было установлено нами ранее, LAS-131 высо­коселективно ингибирует репродукцию ВПГ-1/Ц, включая резистентные к ацикловиру (АЦВ) и фосфо- номуравьиной кислоте (ФМК) варианты вируса с уста­новленным молекулярным механизмом формирования лекарственной резистентности [4]: ИД50 1,93 мкг/мл, ЦД50 122 мкг/мл, индекс селективности (SI) 63 [5][6]. Полученные результаты позволяют предположить, что это соединение ингибирует репродукцию вируса спо­собом, отличным от такового у АЦВ и ФМК.

Целью данной работы было установление стадии вирусной репродукции, чувствительной к действию LAS-131.

Материал и методы

Препараты. LAS-131 ((35)-4-[6-(пурин-6-ил-амино)гексаноил]-3,4-дигидро-3-метил-7,8-дифтор- 2Н-[1, 4]-бензоксазин) синтезирован в ФГБУН «Ин­ститут органического синтеза им. И.Я. Постовского» Уральского отделения Российской академии наук (Екатеринбург, Россия). Ацикловир (9-[(2-гидрок- сиэтокси)-метил]гуанин (АЦВ, регистрационный номер: 59277-89-3) и тринатриевой соли фосфоно- муравьиной кислоты гексагидрат (ФМК, регистра­ционный номер 34156-56-4) применяли в качестве референс-препаратов (Sigma Aldrich, США).

Клетки. Использовали 24-часовую культуру кле­ток почки зелёной мартышки (Chlorocebus sabaeus) Vero E6. Ростовой средой для культур клеток слу­жила питательная среда ИГЛА МЕМ (ФГБНУ «Фе­деральный научный центр исследований и разра­ботки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова» РАН (ФНЦИРИП), Москва, Россия), содержащая 5% эмбриональной телячьей сыворот­ки (ЭТС) («ПанЭко», Москва, Россия) и 100 ЕД/мл бензилпенициллина.

Вирусы. Вирус простого герпеса 1 типа, штамм L2 (ВПГ-1/L2) получен в лаборатории Государствен­ной коллекции вирусов Института вирусологии им. Д.И. Ивановского (подразделение ФГБУ «Наци­ональный исследовательский центр эпидемиоло­гии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи» МЗ РФ (ФНИЦЭМ, Москва, Россия)). Вирус поддерживали путём пассирования с использова­нием среды поддержки, состоящей из питательных сред ИГЛА oiusdfghqwe65МЕМ и 199 (ФГБНУ «ФНЦИРИП им. М.П. Чумакова» РАН, Москва, Россия), соединён­ных в соотношении 1 : 1.

Определение инфекционного титра вируса. Ма­териалом для исследования служили клеточные куль­туры со средой поддержки, подвергшиеся 3-крат­ному замораживанию-оттаиванию. Полученную суспензию центрифугировали при 5000 об/мин в течение 5 мин при 4 °С и определяли инфекцион­ный титр вируса в полученном супернатанте мето­дом бляшкообразования в соответствии с протоко­лом, описанным Sarisky R.T. и соавт. [7]. Исполь­зовали 24-луночные планшеты (Corning, США) со сформировавшимся клеточным монослоем. Клетки инфицировали серийными разведениями ВПГ-1 с кратностью 10. Инфекционный титр определяли после 48 ч инкубации.

Построение ростовой кривой. Для построения ростовой кривой в чашки Петри (Nunc, Дания) со сформировавшимся монослоем культуры клеток Vero Е6 вносили ВПГ-1/Ц в разведении, обеспечивающем множественность инфицирования (m.o.i.) 10 БОЕ/кл. Для синхронизации процесса пенетрации по­сле 1-часовой адсорбции при 4 °С клетки отмывали от не связавшихся с ними вирусных частиц холод­ным физиологическим раствором и вносили нагре­тую до 37 °С среду поддержки. Инфицированные клетки инкубировали при 37 °С в атмосфере 5% СО2. Через 0, 2, 5, 7, 9, 11, 13 и 23 ч после инфицирова­ния (p.i.) клетки с культуральной средой подверга­ли 3-кратному замораживанию-оттаиванию и опре­деляли инфекционный титр вируса.

Оценка влияния LAS-131 на связывание вируса с ре­цепторами на поверхности клетки. Монослойные культуры клеток Vero E6, выращенные в чашках Пе­три, предварительно инкубировали в течение 0, 1 и 2 ч. при 4 oC с вирусной суспензией, содержащей (опыт) или не содержащей (контроль) тестируемое соедине­ние. Величина m.o.i. составляла 10 БОЕ/кл, концентра­ция LAS-131 в вируссодержащей жидкости - 20 мкг/мл. Затем клетки отмывали от неадсорбировавшегося ви­руса холодным физиологическим раствором, вноси­ли среду поддержки без препарата и инкубировали при 37 °С. Через 23 ч p.i. клетки вместе со средой под­держки подвергали 3-кратному замораживанию-отта­иванию и определяли титр вируса [8].

Оценка влияния LAS-131 на проникновение ВПГ-1 в клетку. Монослои клеток Vero Е6, выращенные в 24-луночных пластиковых планшетах (Corning, США), предварительно охлаждали до 4 °С и иноку- лировали с m.o.i. 10 БОЕ/кл в течение 2 ч при той же температуре. Не связанные с клеточной поверхно­стью вирусные частицы удаляли путём промывания клеточных культур холодным физиологическим рас­твором и, чтобы обеспечить проникновение вируса в клетку, вносили предварительно нагретую до 37 °С среду, содержащую (опыт) или не содержащую (кон­троль) LAS-131 (20 мкг/мл). После инкубации кле­ток при 37 °С в течение 0, 30, 60 или 90 минут среду удаляли и подвергали клетки воздействию цитратно- го буфера (рН 3,0) в течение 1 мин при комнатной температуре для инактивации вируса, не проникше­го в клетки-мишени. Затем клетки отмывали тёплым раствором Хенкса и вносили среду поддержки без препарата [8].

Оценка влияния LAS-131 на выход вируса из клет­ки проводилась в соответствии с протоколом, описан­ным MacLean C.A. [8]. Монослои клеток, выращенные в чашках Петри, заражали с m.o.i. 10 БОЕ/кл и инкуби­ровали при 37 °С. LAS-131 вводили в эксперименталь­ную систему сразу после адсорбции в составе среды поддержки (20 мкг/мл). Инфицированная необрабо­танная культура клеток служила контролем. Через 23 ч титр вируса определяли методом бляшкообразования раздельно в культуральной среде и в клетках.

Статистическая обработка полученных в ходе исследования данных проводилась в соответствии с ме­тодами, описанными Glantz S.A. [9], с использованием следующих характеристик: среднее арифметическое значение m и среднее квадратическое отклонение σ. Уровень значимости (р) при проверке статистических гипотез во всех случаях составлял 0,05.

Результаты

С целью установления этапа жизненного цикла ВПГ, на который направлено антивирусное действие LAS-131, было проведено комплексное исследование, включающее построение ростовой кривой вируса, из­учение зависимости выраженности антивирусной ак­тивности вещества от времени введения его в экспе­риментальную систему (методом варьирования вре­мени добавления препарата; time-of-addition assay, TАA), его влияния на адсорбцию вирусных частиц на клеточной поверхности, эффективности проникнове­ния вируса в клетку (пенетрацию) и выхода из клетки.

Динамика накопления инфекционного вируса в культуре клеток в течение 1 цикла репродукции по­казана на рис. 1 (ростовая кривая). Как видно из при­ведённых данных, после 5-часового латентного пери­ода начинается экспоненциальный рост титра виру­са, продолжающийся до 9 ч p.i., после чего скорость накопления вируса в экспериментальной системе постепенно снижается. К 13 ч p.i. показатель титра достигает плато и существенно не изменяется в про­цессе дальнейшей инкубации на протяжении после­дующих 10 ч (до 23 ч p.i. включительно).

 

Рис. 1. Влияние времени введения LAS-131 и фосфономуравьиной кислоты (ФМК) на репродукцию вируса простого герпеса 1 типа (m.o.i. 10 БОЕ/кл).

Кривая демонстрирует динамику изменения титра вируса при инкубации инфицированных клеток без препарата. Гистограмма представляет среднее значение снижения титра вируса LAS-131 (1) или ФМК (2) по сравнению с контрольной (необработанной инфицированной) культурой клеток. LAS- 131 (20 мкг/мл) или ФМК (100 мкг/мл) добавляли в указанные моменты времени. Инфицированная в тех же условиях, но без препарата культура клеток служила контролем. За временную точку «0» принималось время после завершения адсорбции. Продолжительность инкубации - 23 ч. Титр вируса в контроле составил 6,36±0,21 Ig БОЕ/мл. Приведены результаты 2 независимых опытов.

Fig. 1. Influence of the time of addition of LAS-131 and phosphonoformic acid (PFA) on the reproduction of herpes simplex virus type 1 (m.o.i. 10 PFU/cell).

The single-cycle growth curve represents the dynamics of the change in the titer of the virus during incubation of infected cells without the drug. The bar graph demonstrates the mean decrease in LAS-131 virus titer (1) or PFA (2) compared to the control (untreated infected) cell culture. LAS-131 (20 μg/ml) or PFA (100 μg/ml) were added at the indicated time points. The cell culture infected under the same conditions, but without the preparation, served as a control. The time point «0» was taken as the time after the completion of adsorption. The incubation time was 23 hours. The virus titer in the control was 6.36±0.21 lg PFU/ml. The results of 2 independent experiments are presented.

 

 

С целью определения этапа репродукции ВПГ-1, чувствительного к LAS-131, мы изучили изменение биологической активности соединения в зависимости от времени его введения в эксперименталь­ную систему в условиях одноциклового опыта при m.o.i. 10 БОЕ/кл, для чего исследуемое вещество в нецитотоксической концентрации 20 мкг/мл (10 ИД50) добавляли во временные точки, соответствую­щие различным этапам вирусного цикла (ТАА). Ин­фицированная необработанная клеточная культура служила контролем. В качестве препаратов сравне­ния использовали ФМК в концентрации 100 мкг/мл (6,4 ИД ) и АЦВ в концентрации 100 мкг/мл (250 ИД50). Все препараты добавляли в точно опре­делённые моменты времени. Титр вируса в контроле через 23 ч p.i. составил 6,36 ± 0,21 Ig БОЕ/мл.

Как следует из гистограммы, представленной на рис. 1, ингибирующая активность как LAS-131, так и ФМК сохранялась при введении через 0, 3, 5, 7 и 9 ч p.i., а при добавлении их после 9 ч p.i. значительно снижалась.

При введении второго референс-препарата - АЦВ (100 мкг/мл или 250 ИД50) через 0, 3, 5, 7 или 9 ч p.i. в тех же экспериментальных условиях (m.o.i. 10 БОЕ/кл) репродукция вируса супрессировалась до титров ниже чувствительности метода, т.е. снижение титра вируса по сравнению с контрольной инфицированной куль­турой составило не менее 6 Ig (рис. 2). Однако инги­бирующий эффект АЦВ был значительно снижен при его добавлении через 11 ч p.i.: разница титров вируса в опыте и контроле составила лишь 1,6 Ig БОЕ/мл. Подобным образом противовирусная активность LAS-131 также существенно снижалась при его вне­сении в культуральную среду спустя 11 ч p.i.

 

Рис. 2. Влияние времени введения LAS-131 и ацикловира (АЦВ) на репродукцию вируса простого герпеса 1 типа (m.o.i. 10 БОЕ/кл).

1 - LAS-131 (100 мкг/мл)

2 - АЦВ (20 мкг/мл)

Fig. 2. Influence of the time of addition of LAS-131 and acyclovir (ACV) on the reproduction of herpes simplex virus type 1 (m.o.i. 10 PFU/cell).

1 - LAS-131 (100 pg/ml)

2 - ACV (20 pg/ml)

 

На следующем этапе изучалось влияние LAS-131 на связывание вируса с рецепторами на поверхно­ сти клетки и на проникновение ВПГ-1 в клетку, как подробно описано в разделе «Материал и методы». Результаты (см. таблицу) указывают на то, что LAS- 131 не влияет на эффективность адсорбции ВПГ-1: инфекционные титры в контрольной и опытной куль­турах существенно не отличались, даже если продол­жительность адсорбции составляла 2 ч - 6,23 и 6,20 lg БОЕ/мл соответственно. Кроме того, согласно данным таблицы, эффективность проникновения ви­руса в клетки в присутствии LAS-131 не снижалась по сравнению с контрольной инфицированной кле­точной культурой.

Оценка влияния LAS-131 на выход вирусных частиц из клетки описана в разделе «Материал и методы» [9]. Как показывают представленные на рис. 3 ре­зультаты, по сравнению с контрольной культурой ин­фекционный титр внеклеточного вируса был снижен на 2,93 lg БОЕ/мл в присутствии LAS-131, так же как и внутриклеточного (3,01 lg). Число внеклеточ­ных инфекционных вирусных частиц в контрольной культуре было в 7,76 раз меньше, чем внутри клетки. В присутствии LAS-131 это соотношение было рав­но 6,46. Отсюда можно сделать вывод, что LAS-131 существенно не влияет на эффективность последнего этапа жизненного цикла вируса - выход из клетки.

 

Рис. 3. Влияние LAS-131 на выход вируса простого герпеса 1 типа из клетки в условиях одноцикловой инфекции (m.o.i. 10 БОЕ/кл).

Соединение вводили сразу после адсорбции. Учитывали результаты 2 независимых опытов.

А - титр вируса в контроле; В - титр вируса в присутствии LAS-131.

Fig. 3. Effect of LAS-131 on the infectivity of intracellular and extracellular herpes simplex virus type 1 progeny under conditions of single-cycle infection (m.o.i. 10 PFU/cell).

The compound was introduced immediately after adsorption. The results of 2 independent experiments were considered.

A - virus titer in control; B - virus titer in the presence of LAS-131.

 

Обсуждение

Обобщая вышеизложенное, можно заключить, что в условиях одноцикловой инфекции LAS-131 сохра­няет способность эффективно ингибировать репро­дукцию ВПГ-1 при внесении в экспериментальную систему не позднее 9 ч p.i. и не влияет на выход ви­руса из клетки. В соответствии с данными литерату­ры [10][11] синтез ДНК ВПГ-1 начинается через 2 ч p.i., достигает максимальной скорости к 4 ч и сохра­няется до 8 ч p.i., после чего продукция её снижается на 30%. Спустя 12 ч p.i. репликация ДНК практиче­ски прекращается. Таким образом, наиболее вероят­но, что LAS-131 ингибирует репродукцию ВПГ глав­ным образом путём супрессии репликации вирусной ДНК. Действительно, профиль TAA ФМК, хорошо известного ингибитора вирусной ДНК-полимеразы, соответствует таковому для LAS-131 (см. рис. 1). Как известно, ФМК имитирует структуру пирофос­фата (PPi), высвобождение которого из дезоксину- клеотидов (dNTP) в процессе элонгации репликации запускает последнюю стадию репликационного про­цесса - транслокацию (перемещение ДНК-полимеразы на 1 нуклеотид вперёд по матрице ДНК), после чего может произойти присоединение очередного нуклеотида. Взаимодействуя с РР^связывающим центром фермента, ФМК образует неактивный ком­плекс и ингибирует активность ДНК-полимеразы вируса [12].

Результаты, полученные нами при изучении вли­яния времени введения LAS-131 на его противови­русную активность (рис. 2), согласуются с данными литературы: описана подобная зависимость уровня инактивации ВПГ-1 и ВПГ-2 от времени добавления в экспериментальную систему АЦВ в условиях одно­цикловой инфекции [13][14]. В частности, АЦВ в кон­центрации 50 мкг/мл при добавлении через 0, 2, 4 и 8 ч p.i. эффективно (на 90%) ингибирует репродукцию ВПГ, но при его введении через 12 ч p.i. противови­русная активность препарата резко снижается.

В наших экспериментах был использован АЦВ в более высокой концентрации - 100 мкг/мл (рис. 2), что также привело к глубокой супрессии репродук­ции вируса при введении препарата спустя 9 ч p.i., но при добавлении вещества через 11 ч p.i. его про­тивовирусная активность значительно снизилась. Известно, что механизм действия АЦВ на герпесви­русную инфекцию отличается от такового ФМК. Оба соединения ингибируют активность ДНК-полимера- зы ВПГ. Однако, в отличие от ФМК, после внутри­клеточного кинирования до активной трифосфатной формы (1-й этап кинирования до монофосфата ка­тализируется вирусной тимидинкиназой, 2-й и 3-й - клеточными ферментами) АЦВ как структурный ана­лог дезоксигуанозина трифосфата (dGTP) встраива­ется в синтезирующуюся цепь ДНК вируса, в резуль­тате чего синтез терминируется, а также связывается с нуклеотид-связывающим центром ДНК-полимера- зы и ингибирует активность фермента [2][15].

Таким образом, 2 соединения с различными ме­ханизмами противогерпетического действия, но ис­пользующие одну и ту же биомишень (ДНК-поли- меразу ВПГ) и супрессирующие синтез ДНК ВПГ-1, имеют профиль ТАА, близкий к полученному для LAS-131. Учитывая, что окончание чувствительного к действию LAS-131 периода совпадает со временем снижения эффективности синтеза вирусной ДНК, представляется наиболее вероятным, что данное сое­динение, подобно АЦВ и ФМК, ингибирует реплика­цию вирусного генома.

ДНК-полимераза ВПГ сформирована 2 вирусными белками, pUL30 и pUL42, каждый из которых может быть мишенью для действия противогерпетических агентов. Однако в репликации ДНК ВПГ участвуют ещё 5 кодируемых вирусом белков: pUL9 - инициа- торный белок (связывается с точками начала репли­кации, ori); pUL29 (SSB/ICP8) - белок, связывающий­ся с одноцепочечной ДНК (стимулирует активность хеликазо-праймазного комплекса и полимеразную ак­тивность, негативно регулирует транскрипцию β-бел- ков после репликации вирусной ДНК), а также гете- ротримерный хеликазо-праймазный комплекс (pUL5/ pU.8/pUL52) [16]. Каждый из них потенциально спо­собен выступать в качестве биомишени для LAS-131.

Кроме того, нельзя исключить возможность супрес­сии рассматриваемым агентом процесса репродукции ВПГ-1 в результате ингибирования активности фер­ментов, участвующих в метаболизме нуклеотидов, например рибонуклеотидредуктазы (pUL39/pUL40) [17], или на этапах сборки капсида и упаковки в него вирусной ДНК, происходящих параллельно с репли­кацией. Так, для нарезания и упаковки ДНК в капсид необходимы pUL6 (портальный белок), pU.15, pU.17, pUL25, pUL28, pUL32 и pUL33 [18]. pUL14 вовле­чен в транспорт pUL17, pUL26, pUL35, pUL33 в ядро клетки. Наконец, ещё 8 кодируемых вирусом бел­ков, формирующих капсид (основной белок капси- да pUL19 (MCP/ICP5/VP5), малый капсидный белок pU.35 (VP26), портальный белок pU.6, а также pU.38 (VP19C), pUL18 (VP23), pUL17, pUL25 и pUL36) [19] также могут быть вовлечены в механизм противови­русного действия LAS-131.

 

Влияние LAS-131 на ранние стадии репродукции ВПГ-1 в условиях одноцикловой инфекции

Influence of LAS-131 on early stages of HSV-1 reproduction under conditions of single-cycle infection

Условия эксперимента

Experimental conditions

Влияние LAS-131 на адсорбцию вируса

Effect of LAS-131 on virus adsorption

Влияние LAS-131 на пенетрацию вируса

Effect of LAS-131 on virus penetration

Продолжительность контакта вируса с препаратом, ч

The duration of contact of the virus with the drug, hr

0

1

2

0

0,5

1

1,5

Инфекционный титр вируса, lg БОЕ/мл

Virus infectious titer, lg PFU/ml

0

1

2

0

0.5

1

1.5

Контроль вируса

4,55±0,15

6,24±0,06

6,23±0,13

6,27±0,03

6,09±0,21

6,21±0,33

6,27±0,03

Virus control

4.55±0.15

6.24±0.06

6.23±0.13

6.27±0.03

6.09±0.21

6.21±0.33

6.27±0.03

LAS-131, 20 мкг/мл

4,79±0,09

6,12±0,12

6,20±0,10

6,27±0,09

6,27±0,03

6,38±0,14

6,24±0,14

LAS-131, 20 μg/ml

4.79±0.09

6.12±0.12

6.20±0.10

6.27±0.09

6.27±0.03

6.38±0.14

6.24±0.14

Примечание. Приведены результаты 2 независимых экспериментов.

Note. Results of 2 independent experiments are shown.

Представленные результаты позволяют сделать следующие выводы:

  1. LAS-131 не оказывает значительного влияния на проникновение ВПГ-1 в клетку (адсорбция и пенетрация) и выход вируса из клетки.
  2. В условиях одноциклового опыта зафиксиро­ван временн0й период (до 9 ч i. включительно), в течение которого репродукция ВПГ-1 сохраняет чувствительность к LAS-131, из чего можно пред­положить его воздействие на процесс репликации. В пользу этого свидетельствуют данные, получен­ные для АЦВ и ФМК.
×

Об авторах

В. Л. Андронова

ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. почётного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: andronova.vl@yandex.ru

кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярного патогенеза хронических вирусных инфекций, Институт вирусологии им. Д.И. Ивановского 

123098, Москва

Россия

Г. А. Галегов

ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. почётного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России

Email: g.galegov@yandex.ru

доктор биологических наук, профессор, руководитель лаборатории молекулярного патогенеза хронических вирусных инфекций, Институт вирусологии им. Д.И. Ивановского

123098, Москва

Россия

В. В. Мусияк

ФГБУН «Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского» Уральского отделения Российской академии наук

Email: vvmusiyak@ios.uran.ru

кандидат химических наук, научный сотрудник лаборатории асимметрического синтеза

620108, Екатеринбург

Россия

О. А. Воздвиженская

ФГБУН «Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского» Уральского отделения Российской академии наук

Email: olgavozdv@mail.ru

младший научный сотрудник лаборатории асимметрического синтеза

620108, Екатеринбург

Россия

Г. Л. Левит

ФГБУН «Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского» Уральского отделения Российской академии наук

Email: ca512@ios.uran.ru

доктор химических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории асимметрического синтеза 

620108, Екатеринбург

Россия

В. П. Краснов

ФГБУН «Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского» Уральского отделения Российской академии наук; ФГАОУ ВО «Уральский федеральный университет имени первого Президента России Б.Н. Ельцина»

Email: ca@ios.uran.ru

доктор химических наук, профессор, руководитель лаборатории асимметрического синтеза; ведущий научный сотрудник научной лаборатории медицинской химии и перспективных органических материалов Химико-технологического Института

620108, Екатеринбург

620002, Екатеринбург

Россия

Список литературы

  1. ВОЗ. Вирус простого герпеса. Available at: https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/herpes-simplex-virus. (дата доступа 1 мая 2020 г.).
  2. De Clercq E., Li G. Approved Antiviral Drugs over the Past 50 Years. Clin. Microbiol. Rev. 2016; 29(3): 695–747. https://doi.org/10.1128/CMR.00102-15.
  3. Андронова В.Л. Современная этиотропная химиотерапия герпесвирусных инфекций: достижения, новые тенденции и перспективы. Альфагерпесвирусы (часть I). Вопросы вирусологии. 2018; 63(3): 106–14. https://doi.org/10.18821/0507-4088-2018-63-3-106-114.
  4. Коровина A.H., Гуськова А.А., Скоблов М.Ю., Андронова В.Л., Галегов Г.А., Кочетков С.Н. и др. Анализ мутаций в генах ДНК-полимераз и тимидинкиназ клинических изолятов вируса простого герпеса, резистентных к антигерпетическим препаратам. Молекулярная биология. 2010; 44(3): 488–96. https://doi.org/10.1134/s0026893310030192.
  5. Мусияк В.В., Галегов Г.А., Андронова В.Л., Краснов В.П., Левит Г.Л., Груздев Д.А. и др. (3S)-4-[6-(пурин-6-иламино) гексаноил]-3,4-дигидро-3-метил-7,8-дифтор-2Н-[1,4]-бензоксазин и (3R)-4-[6-(пурин-6-иламино)гексаноил]-3,4-дигидро-3-метил-7,8-дифтор-2Н-[1,4]бензоксазин, обладающие противовирусной активностью. Патент РФ №2644351; 2018.
  6. Krasnov V.P., Musiyak V.V., Vozdvizhenskaya O.A., Galegov G.A., Andronova V.L., Gruzdev D.A.б et al. N-[ω-(Purin-6-yl)aminoalkanoyl] derivatives of chiral heterocyclic amines as promising anti-herpesvirus agents. Eur. J. Org. Chem. 2019; 2019: 4811–21. https://doi.org/10.1002/ejoc.201900727.
  7. Sarisky R.T., Nguyen T.T., Duffy K.E., Wittrock R.J., Leary J.J. Difference in incidence of spontaneous mutations between herpes simplex virus types 1 and 2. Antimicrob. Agents Chemother. 2000; 44(6): 1524–9. https://doi.org/10.1128/aac.44.6.1524-1529.2000.
  8. MacLean C.A. HSV entry and spread. In: Brown S.M., MacLean A.R., eds. Herpes Simplex Virus Protocols. Totowa, New Jersey: Humana Press; 1998: 9–18.
  9. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. М.: Практика; 1999.
  10. Aranda-Anzaldo A. Evidence for an altered kinetics of DNA excision-repair in cells infected by herpes simplex virus type 1. Acta Virol. 1992; 36(5): 417–27. PMID: 1364017.
  11. Dremela S.E., DeLuca N.A. Genome replication affects transcription factor binding mediating the cascade of herpes simplex virus transcription. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2019; 116(9): 3734–9. https://doi.org/10.1073/pnas.1818463116.
  12. Crumpacker C.S. Mechanism of action of Foscarnet against viral polymerases. Am. J. Med. 1992; 92(2A): 3S-7S. https://doi.org/10.1016/0002-9343(92)90329-a.
  13. Callegaro S., Perrone R., Scalabrin M., Doria F., Palù G., Richter S.N. A core extended naphtalene diimide G-quadruplex ligand potently inhibits herpes simplex virus 1 replication. Sci. Rep. 2017; 7(1): 2341. https://doi.org/10.1038/s41598-017-02667-3.
  14. Song S., Qiu M., Chu Y., Chen D., Wang X., Su A., et al. Downregulation of cellular c‑Jun N-terminal protein kinase and NF- κB activation by berberine may result in inhibition of herpes simplex virus replication. Antimicrob. Agents Chemother. 2014; 58(9): 5068–78. https://doi.org/10.1128/AAC.02427-14.
  15. Elion G.B. Mechanism of action and selectivity of acyclovir. Am. J. Med. 1982; 73(1A): 7–13. https://doi.org/10.1016/0002-9343(82)90055-9.
  16. Stengel G., Kuchta R.D. Coordinated leading and lagging strand DNA synthesis by using the Herpes Simplex Virus 1 replication complex and minicircle DNA templates. J. Virol. 2011; 85(2):957–67. https://doi.org/10.1128/JVI.01688-10.
  17. Loret S., Guay G., Lippe R. Comprehensive characterization of extracellular herpes simplex virus type 1 virions. J. Virol. 2008; 82(17): 8605–18. https://doi.org/10.1128/JVI.00904-08.
  18. Weller S.K., Coen D.M. Herpes simplex viruses: mechanisms of DNA replication. Cold Spring Harbor Perspect. Biol. 2012; 4(9): a013011. https://doi.org/10.1101/cshperspect.a013011.
  19. Heming J.D., Conway J.F., Homa F.L. Herpesvirus capsid assembly and DNA packaging. Adv. Anat. Embryol. Cell Biol. 2017; 223: 119–42. https://doi.org/10.1007/978-3-319-53168-7_6.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Андронова В.Л., Галегов Г.А., Мусияк В.В., Воздвиженская О.А., Левит Г.Л., Краснов В.П., 2021

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС77-77676 от 29.01.2020.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах