Влияние мутаций в гене гемагглютинина вируса гриппа подтипа H5N1 на антигенность и вирулентность, выявляемое сайт-специфическим мутагенезом


Цитировать

Полный текст

Аннотация

В наших прошлых исследованиях было показано, что аминокислотные замены в гемагглютинине (HA) эскейп-мутантов вируса гриппа подтипа H5N1, обеспечивающие резистентность к моноклональным антителам, в некоторых случаях коррелируют со снижением вирулентности вируса для мышей. Вирулентность восстанавливается при серийном пассировании вируса. В настоящей работе мутации, соответствующие изменениям в гене HA низковирулентного эскейп-мутанта и его реадаптированного варианта, были введены в ген HA посредством сайт-специфического мутагенеза. С помощью плазмидной трансфекции были получены вирусы, содержащие либо HA вируса A/Vietnam/1203/2004 (H5N1) с делецией сайта нарезания, либо HA низковирулентного мутанта, либо HA реадаптированного варианта, а также 6 генов вируса A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) и NA вируса A/Vietnam/1203/2004 (H5N1). Определение вирулентности для мышей показало, что аминокислотная замена в HA низковирулентного эскейп-мутанта приводит к снижению вирулентности вируса для мышей. Введение дополнительной мутации, соответствующей аминокислотной замене в HA реадаптированного варианта, полностью восстанавливает вирулентность. Полученные данные являются первым строгим доказательством снижения вирулентности вируса подтипа H5N1 в результате аминокислотной замены, изменяющей антигенную специфичность HA, и восстановления вирулентности вследствие компенсирующей мутации в гене HA.

Список литературы

  1. Крылов П. С., Руднева И. А., Тимофеева Т. А. и др. Аминокислотные замены в гемагглютинине вируса гриппа подтипа H5, влияющие на антигенную специфичность и вирулентность вируса // Вопр. вирусол. - 2009. - Т. 54. - № 5. - С. 14-19.
  2. Brown E. G. Increased virulence of a mouse-adapted variant of influenza A/FM/1/47 virus is controlled by mutations in genome segments 4, 5, 7, and 8 // J. Virol. - 1990. - Vol. 64. - P. 4523-4533.
  3. Hoffmann E., Neumann G., Kawaoka Y. et al. A DNA ransfection system for generation of influenza A virus from eight plasmids // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2000.-Vol. 97. - P. 6108-6113.
  4. Kaverin N. V., Rudneva I. A., Ilyushina N. A. et al. Structure of the antigenic sites on the haemagglutinin molecule of H5 influenza virus and phenotypic variation of escape mutants // J. Gen. Virol. - 2002. - Vol. 83. - P. 2497-2505.
  5. Kaverin N. V., Rudneva I. A., Govorkova E. A. et al. Epitope mapping of the hemagglutinin molecule of a highly pathogenic H5N1 influenza virus by using monoclonal antibodies // J. Virol. - 2007. - Vol. 81. - P. 12911-12917.
  6. Philpott M., Hioe C., Sheerar M., Hinshaw V. Hemagglutinin mutations related to attenuation altered cell tropism of a virulent avian influenza A virus // J. Virol. - 1990. Vol. 64. - P. 2941- 2947.
  7. Rudneva I. A., Ilyushina N. A., Timofeeva T. A. et al. Restoration of virulence of escape mutants of H5 and H9 influenza viruses by their readaptation to mice // J. Gen. Virol. - 2005. - Vol. 86. - P. 2831-2838.
  8. Rudneva I. A., Timofeeva T. A., Shilov A. A. et al. Effect of gene constellation and postreassortment amino acid change on the phenotypic features of H5 influenza virus reassortants // Arch. Virol. - 2007. - Vol. 152. - P. 1139-1145.
  9. Schulman J. L., Palese P. Selection and identification of influenza virus recombinants of defined genetic composition // J. Virol. - 1976. - Vol. 20. - P. 248-254.
  10. Stevens J., Blixt О., Тumреу Т. М. et al. Structure and receptor specificity of the hemagglutinin from an H5N1 influenza virus // Science - 2006. - Vol. 312. - P. 404-410.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Крылов П.С., Говоркова Е.А., Каверин Н.В., Krylov P.S., Govorkova E.A., Kaverin N.V., 2010

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС77-77676 от 29.01.2020.