Разработка диагностической тест-системы на основе "сэндвич"-ИФА для выявления вируса гриппа А птиц


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Получена панель гибридом, продуцирующих моноклональные антитела (МКА) к нуклеокапсидному белку (NР) вируса гриппа А птиц. На основе 2 МКА разработан антигенсвязывающий ИФА ("сэндвич"-ИФА), в котором МКА NР3 были использованы в качестве антигенсвязывающих антител, а МКА NРS, конъюгированные с пероксидазой хрена, - как антигендетектирующие антитела. Определена специфичность тест-системы к вирусу гриппа птиц. Установлено, что разработанная тест-система специфично выявляет вирус гриппа А всех исследованных подтипов и не дает перекрестных реакций с другими протестированными вирусными патогенами. Чувствительность "сэндвич"-ИФА составила 30 нг/мл NР в препаратах вируса, обработанных мочевиной. Метод апробирован на экспериментально Н5N1-инфицированных мышах. Полученные данные положительно коррелировали с результатами патолого-анатомических исследований и методом изоляции вирусов в куриных эмбрионах. Разработанная тест-система может быть использована для выявления вируса гриппа А птиц в качестве альтернативы или в дополнение к другим диагностическим методам

Список литературы

  1. Власова А. Н., Гибадулин Р. А., Тимофеева Т. А., Верховский О. А. Серологический мониторинг вируса гриппа А // Ветеринария. - 2005. - № 11. - С. 25-29.
  2. Львов Д. К., Ямникова С. С., Федякина И. Т. и др. Экология и эволюция вирусов гриппа в России (1979-2002 гг.) // Вопр. вирусол. - 2004. - Т. 49, № 3. - С. 17-24.
  3. Brown I. H. The epidemiology and evolution of influenza viruses in pigs // Vet. Microbiol. - 2000. - Vol. 74. - P. 29-46.
  4. Chen H., Smith G. J. D., Zhang S. Y. et al. H5N1 virus outbreak in migratory waterfowl // Nature. - 2005. - Vol. 436. - P. 191-192.
  5. Chomel J. J., Thouvenot D., Onno M. at al. Rapid diagnosis of influenza infection of NP antigen using an immunocapture Elisa test // J. Virol. Meth. - 1989. - Vol. 25. - P. 81-92.
  6. Cooper L. A., Subbarao K. A simple restriction fragment length polymorphism-based strategy that can distinguish the internal genes of human H1N1, H3N2, and H5N1 influenza A viruses // J. Clin. Microbiol. - 2000. - Vol. 38. - P. 2579-2583.
  7. Englund L., Klingeborn B., Mejerland T. Avian influenza A virus causing an outbreak of contagious interstitial pneumonia in mink // Acta Vet. Scand. - 1986. - Vol. 27. - P. 497-504.
  8. Harlow E., Lane D. Antibodies: a Laboratory Manual. - Cold Spring Harbor, 1988. - P. 222-223.
  9. Horimoto T., Kawaoka Y. Direct Reverse Transcriptase PCR to determine virulence potential of influenza A viruses in birds // J. Clin. Microbiol. - 1995. - Vol. 33. - P. 748-751.
  10. Ito T., Goto H., Yamamoto E. et al. Generation of a highly pathogenic avian influenza A virus from an avirulent field isolate by passaging in chickens // J. Virol. - 2001. - Vol. 75. - P. 4439-4443.
  11. Laemmli U. K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. - 1970. - Vol. 227. - P. 680-685.
  12. Rowe T., Abernathy R. A., Hu-Primmer J. Detection of antibody to avian influenza A (H5N1) virus in human serum by using a combination of serologic assays // J. Clin. Microbiol. - 1999. - Vol. 37. - P. 937-943.
  13. Scholtissek C., Burger H., Bachmann P. A., Hannoun C. Genetic relatedness of hemagglutinins of the HI subtype of influenza A viruses isolated from swine and birds // Virology. - 1983. - Vol. 129. - P. 521-523.
  14. Spackman E., Senne D. A., Myers T. J. at al. Development of real-time reverse transcriptase PCR assay for type A influenza virus and the avian H5 and H7 hemagglutinin subtypes // J. Clin. Microbiol. - 2002. - Vol. 40. - P. 3256-3260.
  15. World Health Organization. Evolution of H5N1 avain influenza viruses in Asia // Emerg. Infect. Dis. - 2005. - Vol. 11. - P. 1515-1521.
  16. Zhang A., Jin M., Liu F. et al. Development and evaluation of a DAS-Elisa for rapid detection of avian influenza viruses // Avian Dis. - 2006. - Vol. 50. - P. 325-330.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Жемаева Л.В., Козлов А.Ю., Ямникова С.С., Кальнов С.Л., Верховский О.А., Алипер Т.И., Zhemayeva L.V., Kozlov A.Y., Yamnikova S.S., Kalnov S.L., Verkhovsky O.A., Aliper T.I., 2009

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС77-77676 от 29.01.2020.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах