Problems of VirologyProblems of VirologyВопросы вирусологии0507-40882411-2097Central Research Institute for Epidemiology510.36233/0507-4088-2019-64-4-165-172ORIGINAL RESEARCHESОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯCytokine-regulating activity of anti-virus preparation CelAgripus in Burkitt's lym-phoma stable B-cell linesЦитокин-регулирующая активность противовирусного препарата ЦелАгрип в перевиваемых В-клеточных линиях лимфомы Беркиттаhttps://orcid.org/0000-0003-0601-7148NarovlyanskyA. N.НаровлянскийА. Н.
Russian Federation

Alexander N. Narovlyansky - DBS, Chief Researcher of the Cytokine Laboratory.

Moscow, 123098.

Наровлянский Александр Наумович - доктор биологических наук, профессор, главный научный сотрудник лаборатории цитокинов НИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России.

123098, Москва. 

narovl@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7346-5536MezentsevaM. V.МезенцеваМ. В.
Russian Federation

Moscow, 123098.

123098, Москва.

https://orcid.org/0000-0003-2878-0590SuetinaI. A.СуетинаИ. А.
Russian Federation

Moscow, 123098.

123098, Москва.

https://orcid.org/0000-0001-6353-9917RussuL. I.РуссуЛ. И.
Russian Federation

Moscow, 123098.

123098, Москва.

https://orcid.org/0000-0002-6008-7967IvanovaA. M.ИвановаА. М.
Russian Federation

Moscow, 123098.

123098, Москва.

https://orcid.org/0000-0003-0001-2493PoloskovV. V.ПолосковВ. В.
Russian Federation

Moscow, 123098.

123098, Москва.

https://orcid.org/0000-0002-0035-324XIzmest'evaA. V.ИзместьеваА. В.
Russian Federation

Moscow, 123098.

123098, Москва.

https://orcid.org/0000-0002-1580-6096OspelnikovaT. P.ОспельниковаТ. П.
Russian Federation

Moscow, 123098.

123098, Москва.

https://orcid.org/0000-0003-4562-7280SarymsakovA. A.СарымсаковА. А.
Uzbekistan

Tashkent, 100128.

100128, Ташкент.

https://orcid.org/0000-0002-4780-7560ErshovF. I.ЕршовФ. И.
Russian Federation

Moscow, 123098.

123098, Москва.

National Research Centre for Epidemiology and Microbiology named after the honorary academician N.F.GamaleyaНациональный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава РоссииInstitute of Polymer Chemystry and Physics Uzbek Academy of SciencesИнститут химии и физики полимеров Академии наук Республики Узбекистан200820196441651721612201916122019Copyright ©; 2019, Narovlyansky A.N., Mezentseva M.V., Suetina I.A., Russu L.I., Ivanova A.M., Poloskov V.V., Izmest'eva A.V., Ospelnikova T.P., Sarymsakov A.A., Ershov F.I.Copyright ©; 2019, Наровлянский А.Н., Мезенцева М.В., Суетина И.А., Руссу Л.И., Иванова А.М., Полосков В.В., Изместьева А.В., Оспельникова Т.П., Сарымсаков А.А., Ершов Ф.И.2019Narovlyansky A.N., Mezentseva M.V., Suetina I.A., Russu L.I., Ivanova A.M., Poloskov V.V., Izmest'eva A.V., Ospelnikova T.P., Sarymsakov A.A., Ershov F.I.Наровлянский А.Н., Мезенцева М.В., Суетина И.А., Руссу Л.И., Иванова А.М., Полосков В.В., Изместьева А.В., Оспельникова Т.П., Сарымсаков А.А., Ершов Ф.И.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://virusjour.crie.ru/jour/article/view/5

Introduction. Cytokines activated in response to immunosuppressive viral infections can directly or indirectly affect the neoplastic transformation of B cells. In this study, we studied a new substance designed to produce the antiviral drug CelAgrip (CA, CelAgripus), which exhibits interferon (IFN) and cytokine-inducing activity and, apparently, can be used as an activator of antiviral immunity.

Purpose - is to evaluate the cytokine-regulating effect of CA in Burkitt's lymphoma (LB) cell lines latently infected with the Epstein-Barr virus (EBV).

Objectives: to study the CA-induced expression of the cytokine genes IL-ip, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, IL-18, IFN-a, IFN -Y, IFN-p, IFN-A1, IFN-A2, IFN-A3, TNF-a in normal and EBV transformed LB cells.

Material and methods. Cell line: the human embryo fibroblasts (HEF), Namalva, Daudi, Raji, P3HR-1. Preparations: CA, gossypol-acetic acid (GAA), sodium carboxymethyl cellulose (Na-CMC). Methods: RT-PCR and methods for assessing cytotoxicity (MTT and Scepter 2.0 Merck cell counter).

Results. The effect of the CA preparation on the expression of IFN-Л, IL-1p, IL-6, IL-8 and IL-10 genes was revealed. Discussion. We observed the activation of gene expression of IFN-A, IL-1P, IL-6, IL-8 and suppression of IL-10 gene activity when treatment CA of LB cells.

Conclusion. The substance CA has new effects on the activation of the expression of a number of key cytokine genes in stable Burkitt lymphoma cell lines.

Введение. Цитокины, активируемые в ответ на иммуносупрессивные вирусные инфекции, могут прямо или косвенно влиять на неопластическую трансформацию В-клеток. В настоящем исследовании изучали новую субстанцию, разработанную для получения противовирусного лекарственного средства ЦелАгрип (CelAgripus, ЦА), которая проявляет интерферон- (ИФН) и цитокин-индуцирующую активность и, по-видимому, может быть использована в качестве активатора противовирусного иммунитета.

Цель исследования - оценить цитокин-регулирующее действие ЦА в линиях клеток лимфомы Беркитта (ЛБ), латентно инфицированных вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ).

Авторам предстояло изучить ЦА-индуцированную экспрессию генов цитокинов - интерлейкинов (ИЛ) -1р, -2, -4, -6, -8, -10, -12, -17, -18; ИФН-а, -Y, -в, -А1, -Л2, -Л3; фактора некроза опухоли а (ФНОа) в нормальных и трансформированных ВЭБ клетках ЛБ.

Материал и методы. Использовали линии клеток фибробластов эмбриона человека (ФЭЧ), Namalva, Daudi, Raji и Р3НR-1, на которых изучали препараты ЦА, госсипол-уксусной кислоты (ГУК), натрий-карбоксиметилцеллюлозы (Na-КМЦ) с помощью методов ОТ-ПЦР и оценки цитотоксичности.

Результаты. Выявлено действие ЦА на экспрессию генов ИФН-Л, ИЛ-1р, ИЛ-6, ИЛ-8 и ИЛ-10. Направленность цитокинового ответа зависела от вида клеток и дозы препарата.

Обсуждение. При обработке ЦА клеток ЛБ наблюдались активация генной экспрессии ИФН-Л, ИЛ-1Р, -6, -8 и супрессия активности гена ИЛ-10. При действии субстанций Na-КМЦ и ГУК, используемых для синтеза ЦА, выявлено, в основном, подавление экспрессии генов ИФН-р, ИЛ-1Р, ИЛ-10, ИЛ-18 и ФНОа.

Заключение. Субстанция ЦА оказывает новые эффекты по активации экспрессии ряда ключевых цитокиновых генов в перевиваемых линиях клеток ЛБ. Направленность цитокинового ответа зависит от вида клеток и дозы препарата.

cytokinesinterferon inducerEpstein-Barr virusBurkitt’s lymphomastable cell linesgene expressionthe polymerase chain reactionцитокиныиндуктор интерферонавирус Эпштейна-Баррлимфома Беркиттаперевиваемые линии клетокэкспрессия геновполимеразная цепная реакцияРабота выполнена при финансовой поддержке «Российского фонда фундаментальных исследований» по проекту (гранту) № 18-515-41001\18.1. Epstein M.A. Virus particles in cultured lymphoblasts from Burkitt’s lymphoma. Lancet. 1964; 1(7335): 702-3. Doi: https://doi.org/10.1016/s0140-6736(64)91524-72. Ndede I., Mining S.K., Patel K., Wanjala F.M., Chumba D., Tenge C. Cytokines associated with Burkitt’s lymphoma in western Kenya. BMC Res. Notes. 2017; 10(1): 519. Doi: https://doi.org/10.1186/s13104-017-2841-03. Miyauchi K., Urano E., Yoshiyama H., Komano J. Cytokine signatures of transformed B cells with distinct Epstein-Barr virus latencies as a potential diagnostic tool for B cell lymphoma. Cancer Sci. 2011; 102(6): 1236-41. Doi: https://doi.org/104111/j.1349-7006.2011.01924.x4. Liu Y., de Waal Malefyt R., Briere F., Parham C., Bridon J.M., Banchereau J., et al. The EBV IL-10 homologue is a selective agonist with impaired binding to the IL-10 receptor. J. Immunol. 1997; 158(2): 604-13.5. Jog N.R., Chakravarty E.F., Guthridge J.M., Judith A., James J.A. Epstein Barr Virus Interleukin 10 Suppresses Antiinflammatory Phenotype in Human Monocytes. Front. Immunol. 2018; 9: 2198. Doi: https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.021986. Ершов Ф.И., Киселев О.И. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств). М.: ГЭОТАР-Медиа; 2005.7. Ершов Ф.И., Наровлянский А.Н. Интерфероны и индукторы интерферонов. В кн.: Хаитов Р.М., Атауллаханов Р.И., Шульженко А.Е., ред. Иммунотерапия: руководство для врачей. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2018: 123-47.8. Атаханов А.А., Сарымсаков А.А., Рашидова С.Ш. Наносистемы целлюлозы и серебра: синтез, структура и свойства. Ташкент; 2016.9. Klein G., Dombos L., Gothoskar B. Sensitivity of Epstein-Barr virus (EBV) producer and non-producer human lyphoblastoid cell lines to superinfection with EBV. Int. J. Cancer. 1972; 10(1): 44-57. Doi: https://doi.org/10.1002/ijc.291010010810. Klein E., Klein G., Nadkarni J.S., Nadkarni J.J., Wigzell H., Clifford P. Surface IgM kappa specificity on a Burkitt lymphoma cell in vivo and in derived cultured lines. Cancer Res. 1968; 28(7): 1300-10.11. Pulvertaft R.J.V., Cantab M.D. Cytology of Burkitt’s tumour (African lymphoma). Lancet. 1964; 283(7327): 238-40. Doi: https://doi.org/10.1016/S0140-6736(64)92345-112. Hinuma Y., Konn M., Yamaguchi J., Grace J.T. Replication of Herpes-Type Virus in a Burkitt Lymphoma Cell Line. J. Virol. 1967; 1(6): 1045-51.13. Хабриев Р.У., ред. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: Медицина; 2005.14. PrimerBank. PCR Primers for Gene Expression Detection and Quantification. Available at: https://pga.mgh.harvard.edu/primerbank_15. Платэ Н.А., Васильев А.Е. Физиологически активные полимеры. М.: Химия; 1986.16. Pickering L.A., Kronenberg L.H., Stewart W.E. Spontaneous production of human interferon. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1980; 77(10): 5938-42. Doi: https://doi.org/10.1073/pnas.77.10.593817. Mostafavi S., Yoshida H., Moodley D., LeBoite H., Rothamel K., Raj T., et al. Parsing the interferon transcriptional network and its disease associations. Cell. 2016; 164(3): 564-78. Doi: https://doi.org/10.1016/j.cell.2015.12.03218. Sarhan J., Liu B.C., Muendlein H.I., Weindel C.G., Irina Smirnova I., Tang A.Y., et al. Constitutive interferon signaling maintains critical threshold of MLKL expression to license necroptosis. Cell Death Differ. 2019; 26(2): 332-47. Doi: https://doi.org/10.1038/s41418-018-0122-719. Abt M.C., Osborne L.C., Monticelli L.A., Doering T.A., Alenghat T., Sonnenberg G.F., et al. Commensal bacteria calibrate the activation threshold of innate antiviral immunity. Immunity. 2012; 37(1): 158-70. Doi: https://doi.org/10.1016/j.immuni.2012.04.01120. van Kooten C., Rensink I., Aarden L., van Oers R. Cytokines and Intracellular Signals Involved in the Regulation of B-CLL Proliferation. Leuk. Lymphoma. 1993; 12(1-2): 27-33. Doi: https://doi.org/10.3109/1042819930905956821. Purdue M.P., Lan Q., Kricker A., Grulich A.E., Vajdic C.M., Turner J. Polymorphisms in immune function genes and risk of non-Hodgkin lymphoma: findings from the New South Wales non-Hodgkin Lymphoma Study. Carcinogenesis. 2007; 28(3): 704-12. Doi: https://doi.org/10.1093/carcin/bgl20022. Warzocha K., Salles G., Bienvenu J., Bastion Y., Dumontet C., Renard N., et al. Tumor necrosis factor ligand-receptor system can predict treatment outcome in lymphoma patients. J. Clin. Oncol. 1997; 15(2): 499-508. Doi: https://doi.org/10.1200/JCO.1997.15z2.49923. Tian T., Wang M., Ma D. TNF-a, a good or bad factor in hematological diseases? Stem Cell Investig. 2014; 1: 12. Doi: https://doi.org/10.3978/j.issn.2306-9759.2014.04.0224. Gardella S., Andrei C., Costigliolo S., Poggi A., Zocchi M.R., Rubartelli A. Interleukin-18 synthesis and secretion by dendritic cells are modulated by interaction with antigen-specific T-cells. J. Leukoc. Biol. 1999; 66(2): 237-41.25. Lorey S.L., Huang Y.C., Sharma V. Constitutive expression of Interleukin-18 and Interleukin-18 receptor mRNA in tumour derived human B-cell lines. Clin. Exp. Immunol. 2004; 136(3): 456-62. Doi: https://doi.org/10.1111/j.1365-2249.2004.02465.x26. IL1B interleukin 1 beta (Homo sapiens (human); Gene ID: 3553. Available at: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/3553_27. IL6 interleukin 6 Homo sapiens (human); Gene ID: 3569. Available at: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/356928. Anestakis D., Petanidis S., Kalyvas S., Nday C.M., Tsave O., Kioseoglou E., et al. Mechanisms and Applications of Interleukins in Cancer Immunotherapy. Int. J. Mol. Sci. 2015; 16(1): 1691-710. Doi: https://doi.org/10.3390/ijms1601169129. Akdis M., Aab A., Altunbulakli C., Azkur K. Interleukins (from IL-1 to IL-38), interferons, transforming growth factor P, and TNF-a: Receptors, functions, and roles in diseases. JACI. 2016; 138(4): 984-1010. Doi: https://doi.org/10.1016/jjaci.2016.06.03330. Waugh D.J., Wilson C. The interleukin-8 pathway in cancer. Clin. Cancer Res. 2008; 14(21): 6735-41. Doi: https://doi.org/10.1158/1078-0432.ccr-07-484331. Sunaga N., Kaira K., Tomizawa Y., Shimizu K., Imai H., Takahashi G., et al. Clinicopathological and prognostic significance of interleukin-8 expression and its relationship to KRAS mutation in lung adenocarcinoma. Br. J. Cancer. 2014; 110(8): 2047-53. Doi: https://doi.org/10.1038/bjc.2014.11032. Lee H.L., Eom H.S., Yun T., Kim H.J., Park W.S., Nam B.H., et al. Serum and urine levels of interleukin-8 in patients with non-Hodgkin’s lymphoma. Cytokine. 2008; 43(1): 71-5. Doi: https://doi.org/10.1016/j.cyto.2008.04.00433. Miyata-Takata T., Takata K., Toji T., Goto N., Kasahara S., Takahashi T., et al. Elevation of serum interleukins 8, 4, and 1p levels in patients with gastrointestinal low-grade B-cell lymphoma. Sci. Rep. 2015; 5:18434. Doi: https://doi.org/10.1038/srep1843434. Wikipedia, The Free Encyclopedia. IL10. Available at: https://en.wikipedia.org/wiki/Interleukin_1035. Sabat R., Grutz G., Warszawska K., Kirsch S., Witte E., Wolk K., et al. Biology of interleukin-10. Cytokine Growth Factor Rev. 2010; 21(5): 331-44. Doi: https://doi.org/10.1016/j.cytogfr.2010.09.00236. Berti F.C.B., de Oliveira K.B. IL-10 in cancer: Just a classical im-munosuppressive factor or also an immunostimulating one? AIMS AllergyImmunol. 2018; 2(2): 88-97. Doi: https://doi.org/10.3934/Allergy.2018.2.88