Problems of VirologyProblems of VirologyВопросы вирусологии0507-40882411-2097Central Research Institute for Epidemiology41010.36233/0507-4088-2020-65-4-228-236TO VIROLOGIST’S AIDВ ПОМОЩЬ ВИРУСОЛОГУStudy of the antiviral activity of the liquid corneal storage medium in relation to the herpes simplex virus in vitroИзучение противовирусной активности жидких сред для хранения роговицы в отношении вируса простого герпеса in vitrohttps://orcid.org/0000-0002-8972-3111AlimbarovaL. M.АлимбароваЛ. М.
Russian Federation

Lyudmila M. Alimbarova – Cand. Med. Sci., assistant professor, leading researcher.

Moscow, 123098

Алимбарова Людмила Михайловна – кандидат медицинских наук, доцент, ведущий научный сотрудник.

123098, Москва

virology@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8967-6370KerimovT. Z.КеримовТ. З.
Russian Federation

Timur Z. Kerimov – postgraduate of the Eye Disease Department.

Moscow, 127473

Керимов Тимур Захирович – аспирант кафедры глазных болезней.

127473, Москваhttps://orcid.org/0000-0001-9160-6240BorzenokS. A.БорзенокС. А.
Russian Federation

Sergei A. Borzenok – Dr. Med. Sci., Acad. of RANS, Professor of the Eye Disease Department, A.I. Yevdokimov Moscow State University of Medicine and Dentistry of the Ministry of Health; Head of the Center for Fundamental and Applied Biomedical Problems of S.N. Fedorov Eye Microsurgery Federal State Institution of the Ministry of Health.

Moscow, 127486

Борзенок Сергей Анатольевич – акад. РАЕН, доктор медицинских наук, профессор кафедры глазных болезней МГМСУ им. А.И. Евдокимова; руководитель Центра фундаментальных и прикладных медико-биологических проблем НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова.

127486, Москва

National Research Centre for Epidemiology and Microbiology named after the honorary academician N.F. GamaleyaФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава РоссииA.I. Evdokimov Moscow State University of Medicine and DentistryФГБОУ ВО «Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И. Евдокимова» Минздрава РоссииS. Fyodorov Eye Microsurgery Complex Federal State InstitutionФГАУ «Национальный медицинский исследовательский центр «Межотраслевой научно-технический комплекс «Микрохирургия глаза» имени академика С.Н. Фёдорова» Минздрава России170920206542282361709202017092020Copyright ©; 2020, Alimbarova L.M., Kerimov T.Z., Borzenok S.A.Copyright ©; 2020, Алимбарова Л.М., Керимов Т.З., Борзенок С.А.2020Alimbarova L.M., Kerimov T.Z., Borzenok S.A.Алимбарова Л.М., Керимов Т.З., Борзенок С.А.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://virusjour.crie.ru/jour/article/view/410

The aim of the study was to assess the antiviral activity of the 7 types of liquid corneal storage medium on an experimental model of herpesvirus infection in vitro.

Material and methods. The study of antiviral activity of 7 samples of liquid corneal storage medium on a model of herpesvirus infection caused by the herpes simplex virus type 1 in Vero-cell using virological and statistical research methods was carried out.

Results and discussion. All the studied images of the corneal storage medium, including the Borzenka-Moroz base medium, did not have a cytotoxic effect on Vero cell culture. Out of of 7 samples of liquid corneal storage medium, 4 samples had reliable antiviral activity against HSV-1 when used under the therapeutic regimen (1 hour after infection) and under the preventive regimen (2 hours before infection). Antiviral activity was established in 2 samples containing the interferon inducer cycloferon at a concentration of 10 mg/kg and 30 mg/kg (sample 2, 3), in a sample containing the interferon inducer gamapren 15 mg/kg (sample 5), and in a sample containing a combination of drugs - 10 mg/kg cycloferon and an acyclic nucleoside analog-acyclovir 10 mg/kg (sample 6). According to the results of 2 test regimens, the maximum statistically significant inhibitory effect in relation to HSV-1 was detected in sample 6, containing a combination of drugs. Against the background of sample 6, the infectious activity of the test virus decreased by an average of 3.2 lg, the inhibition coefficient was 54.5%.

Conclusion. The results of the study indicate the prospects of using types of media with antiviral activity (samples 2, 3, 5, 6) for storing donor corneas in order to increase the effectiveness of keratoplasty in patients with ophthalmic herpes.

Цель исследования - изучить противовирусную активность 7 образцов жидкой среды для хранения роговицы на модели герпесвирусной инфекции in vitro.

Материал и методы. Изучена противовирусная активность 7 образцов жидкой среды для хранения роговицы (ОСХР) на модели герпесвирусной инфекции, обусловленной вирусом простого герпеса 1-го типа (ВПГ-1), штамм ЕС, в культуре клеток Vero с использованием вирусологического и статистического методов исследования.

Результаты и обсуждение. Показано, что все исследуемые образцы среды для хранения роговицы, в том числе и базовая среда Борзенка-Мороз, не оказывают цитотоксического действия на культуру клеток Vero. Установлено, что 4 из 7 образцов жидкой среды для хранения роговицы обладают достоверной противовирусной активностью в отношении ВПГ-1 при использовании по терапевтической (через 1 ч после инфицирования) и по профилактической (за 2 ч до инфицирования) схемам. Противовирусная активность установлена у 2 образцов, содержащих индуктор интерферона циклоферон в концентрации 10 и 30 мг/кг (ОСХР 2, 3 соответственно); у образца, содержащего индуктор интерферона гамапрен 15 мг/кг (ОСХР 5), и у образца, содержащего комбинацию препаратов: циклоферон 10 мг/кг и ациклический аналог нуклеозида - ацикловир 10 мг/кг (ОСХР 6). Максимальный статистически достоверный ингибиторный эффект по отношению к ВПГ-1 по результатам двух схем испытаний был выявлен у ОСХР 6, содержащего комбинацию препаратов. На фоне его применения инфекционная активность тест-вируса снижалась в среднем на 3,2 lg, коэффициент ингибиции составил 54,5%.

Заключение. Результаты исследования свидетельствуют о перспективности использования образцов противовирусных сред для хранения донорских роговиц (образцы 2, 3, 5 и 6) с целью повышения эффективности кератопластики у больных офтальмогерпесом.

herpes simplex virus type 1HSV-1herpesvirus infectionliquid corneal storage mediumcornea preservationantiviral activityвирус простого герпеса 1-го типаофтальмогерпесгерпесвирусная инфекцияжидкая среда для хранения роговицыконсервация роговицыпротивовирусная активность1. Исаков В.А., ред. Герпесвирусные инфекции человека: руководство для врачей. СПб.: СпецЛит; 2013.2. Resnikoff S., Pascolini D., Etya’ale D., Kocur I., Pararajasegaram R., Pokharel G.P., et al. Global data on visual impairment in the year 2002. Bull. WorldHealth Organ. 2004; 82(11): 844-51.3. Каспаров А.А. Офтальмогерпес. М.: Медицина; 1994.4. Amiri F., Ghiyasvandian S., Navab E., Zakerimoghadam M. Corneal transplantation: A new view of life. Electron. Physician. 2017; 9(4): 4055-63. DOI: http://doi.org/10.19082/40555. Spadea L., De Rosa V Current techniques of lamellar keratoplasty for keratoconus. Saudi Med. J. 2016; 37(2): 127-36. DOI: http://doi.org/10.15537/smj.2016.2.129856. Rahman I., Carley F., Hillarby C., Brahma A., Tullo A.B. Penetrating keratoplasty: indications, outcomes, and complications. Eye (bond). 2009; 23(6): 1288-94. DOI: http://doi.org/10.1038/eye.2008.3057. Борзенок С.А. Медико-технологические и методологические основы эффективной деятельности глазных тканевых банков России в обеспечении операций по сквозной трансплантации роговицы: Дисс. ... д-ра мед. наук. М.; 2008.8. Кагушева А.Э. Прогнозирование, профилактика и лечение персистирующих эрозий и язв трансплантата роговицы при сквозной кератопластике высокого риска: Дисс. ... кандидат медицинских наук. М.; 2013.9. Борзенок С.А., Ролик О.И., Онищенко Н.А., Комах Ю.А. Методы консервации донорских роговиц и применение гомологичных клеточных пептидов. Офтальмология. 2011; (4): 75-8.10. Armitage W.J. Preservation of human cornea. Transfus. Med. Hemother. 2011; 38(2): 143-7. DOI: http://doi.org/10.1159/00032663211. Керимов Т.З., Борзенок С.А., Гаврилова Н.А., Тонаева Х.Д. Герпесвирусная инфекция трансплантата роговицы: подходы к вирусной деконтаминации на этапе консервации. Практическая медицина. 2018; 16(3): 89-92.12. Миронкова Е.А., Макаров П.В., Слепова О.С., Гундорова P.A., Кугушева A3., Демкин В.В. и др. Инфицированность донорского материала вирусами группы герпеса как возможная причина развития болезни трансплантата при сквозной кератопластике. Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2012; 14(4): 48-51. DOI: http://doi.org/10.15825/1995-1191-2012-4-48-5113. Shimomura Y., Deai T., Fukuda M., Higaki S., Hooper L.C., Hayashi K. Corneal buttons obtained from patients with HSK harbor high copy numbers of the HSV genome. Cornea. 2007; 26(2): 190-3. DOI: http://doi.org/10.1097/ICO.0b013e31802eaee614. Reed L., Muench H. A simple method of estimating 50% endpoints. Amer. J. Hygiene. 1938; 27: 493-7.15. Миронов А.Н., Бунатян Н.Д., Васильев А.Н., Верстакова О.Л., Журавлёва М.В., Лепахин В.К. и др. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть 1. М.: Гриф и К; 2012.16. Osano E., Kishi J., Takahashi Y. Phagocytosis of titanium particles and necrosis in TNF-alpha-resistant mouse sarcoma L929 cells. Toxicol. In Vitro. 2003; 17(1): 41-7. DOI: http://doi.org/10.1016/s0887-2333(02)00127-317. Cotarelo M., Catalan P., Sanchez-Carrillo C., Menasalvas A., Cer-cenado E., Tenorio A., et al. Cytopathic effect inhibition assay for determining the in vitro susceptibility of herpes simplex virus to antiviral agents. J. Antimicrob. Chemother 1999; 44(5): 705-8. DOI: http://doi.org/10.1093/jac/44.5.70518. Gain P., Jullienne R., He Z., Aldossary M., Acquart S., Cognasse F., et al. Global survey of corneal transplantation and eye banking. JAMA Ophthalmol. 2016; 134(2): 167-73. DOI: http://doi.org/10.1001/jamaophthalmol.2015.477619. Williams K.A., Muehlberg S.M., Lewis R.F., Coster D.J. How successful is corneal transplantation? A report from the Australian Corneal Graft Register. Eye (Lond). 1995; 9(Pt. 2): 219-27. DOI: http://doi.org/10.1038/eye.1995.4320. Kaye R., Steger B., Chen J.Y., Romano V. A serious adverse surgical event: Management of suspected HSV-1 keratitis in a donor cornea. Spektrum Augenheilkd. 2017; 31(1): 19-22. DOI: http://doi.org/10.1007/s00717-016-0325-621. Wilhelmus K.R. Antiviral treatment and other therapeutic interventions for herpes simplex virus epithelial keratitis. Cochrane Database Syst. Rev. 2015; 1: CD002898. DOI: http://doi.org/10.1002/14651858.CD002898.pub5