Problems of VirologyProblems of VirologyВопросы вирусологии0507-40882411-2097Central Research Institute for Epidemiology40810.36233/0507-4088-2020-65-4-212-217ORIGINAL RESEARCHESОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯDevelopment of inactivated cultural yellow fever vaccineРазработка инактивированной культуральной вакцины против жёлтой лихорадкиhttps://orcid.org/0000-0003-4576-7136IvanovA. P.ИвановА. П.
Russian Federation

Alexander P. Ivanov – D. Sci. (Med.), leading researcher, laboratory of molecular biology of viruses.

Moscow, 108819

Иванов Александр Петрович – доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной биологии вирусов.

108819, Москваivanovalexander1@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0003-4288-6818KlebleevaT. D.КлеблееваТ. Д.
Russian Federation

Tatiana D. Klebleeva – junior researcher, laboratory of molecular biology of viruses.

Moscow, 108819

Клеблеева Татьяна Дмитриевна – младший научный сотрудник лаборатории молекулярной биологии вирусов.

108819, Москва

https://orcid.org/0000-0002-4655-5330RogovaY. V.РоговаЮ. В.
Russian Federation

Yulia V. Rogova - head of the department of experimental aAnimals.

Moscow, 108819

Рогова Юлия Вячеславовна – руководитель отделения подопытных животных.

108819, Москва

https://orcid.org/0000-0003-1784-4827IvanovaO. E.ИвановаО. Е.
Russian Federation

Ol'gaE. Ivanova - D. Sci. (Med.), leading researcher, laboratory of virology of poliomyelitis and other enterovirus infections with the WHO Polio Surveillance Center, Chumakov FSCRD of Immune-and-Biological Products of RAS; prof. of the Department of Organization and Technology of Immunobiological Preparations of the Institute of Translational Medicine and Biotechnology, Federal State Autonomous Educational Institution of Higher Education, I.M. Sechenov FMSMU.

Moscow, 11999, 108819

Иванова Ольга Евгеньевна – доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории вирусологии полиомиелита и других энтеровирусных инфекций с Референс-центром ВОЗ по надзору за полиомиелитом ФГБНУ «ФНЦИРИП им. М.П. Чумакова РАН; профессор кафедры организации и технологии иммунобиологических препаратов Института трансляционной медицины и биотехнологии ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова.

108819, 11999, Москва

Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products, Russian Academy of SciencesФГБНУ Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова, РАНI.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University)ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)170920206542122171709202017092020Copyright ©; 2020, Ivanov A.P., Klebleeva T.D., Rogova Y.V., Ivanova O.E.Copyright ©; 2020, Иванов А.П., Клеблеева Т.Д., Рогова Ю.В., Иванова О.Е.2020Ivanov A.P., Klebleeva T.D., Rogova Y.V., Ivanova O.E.Иванов А.П., Клеблеева Т.Д., Рогова Ю.В., Иванова О.Е.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://virusjour.crie.ru/jour/article/view/408

Introduction. The only currently available live vaccine against yellow fever (YF) based on chicken embryos infected with an attenuated 17D strain of the YF virus is one of the most effective vaccine preparations. However, the live vaccine is associated with “viscerotropic syndrome” (approximately 0.4 cases per 100 000 vaccinated). Therefore, the development and introduction of highly purified inactivated vaccine against YF is intended to ensure the maximum safety of vaccination against one of the most common human viral diseases.

Goals and objectives. Development and evaluation of immunogenicity of the cultural inactivated vaccine against YF at the laboratory model level.

Material and methods. Adaptation of 17D strain of YF virus to Vero cell culture, cultivation, removal of cellular DNA, inactivation with β-propiolactone, concentration, chromatographic purification, determination of protein and antigen of YF virus, assessment of immunogenicity in mice in parallel with commercial live vaccine.

Results and discussion. Immunogenicity: the determination of specific antibodies of class G (IgG) and virus neutralizing antibodies in the sera of immunized mice showed high level of antibodies exceeding that of immunized with commercial live vaccine. The optimal dose of antigen in the vaccine (total protein) was 50 μg/ml (5 μg/0.1 ml -dose and volume per 1 vaccination of mice). Thus, the laboratory version of cultural inactivated vaccine against YF is as effective (and even superior) as the commercial live vaccine.

Conclusion. Laboratory version of cultural inactivated vaccine against YF, which is not inferior in immunogenicity (in animal model) to commercial live vaccine, has been developed.

Введение. Жёлтая лихорадка (ЖЛ) - одно из самых распространённых вирусных заболеваний человека. Единственная на сегодняшний день доступная живая вакцина против ЖЛ на основе куриных эмбрионов, инфицированных аттенуированным штаммом 17D вируса ЖЛ, относится к наиболее эффективным вакцинным препаратам. Однако живая вакцина ассоциирована с тяжёлыми поствакцинальными осложнениями, в том числе с висцеротропным синдромом (примерно 0,4 случая на 100 тыс. вакцинированных). В связи с этим разработка и внедрение высокоочищенной инактивированной вакцины против ЖЛ призвана обеспечить максимальную безопасность вакцинации.

Цель исследования - разработка и оценка иммуногенности культуральной инактивированной вакцины против ЖЛ на уровне лабораторной модели.

Материал и методы. В ходе исследования проведены адаптация штамма 17D вируса ЖЛ к культуре клеток Vero, культивирование, удаление клеточной ДНК, инактивация β-пропиолактоном, концентрирование, хроматографическая очистка, определение белка и антигена вируса ЖЛ, оценка иммуногенности на мышах параллельно с коммерческой живой вакциной.

Результаты и обсуждение. Определение специфических антител класса G (IgG) и вируснейтрализующих антител в сыворотках крови иммунизированных мышей показало высокий уровень антител, превышающий таковой при иммунизации коммерческой живой вакциной. Оптимальная доза антигена в вакцине по общему белку составила 50 мкг/мл (5 мкг/0,1 мл - доза и объём на 1 вакцинацию мышей). Таким образом, лабораторный вариант культуральной инактивированной вакцины против ЖЛ по эффективности не уступает коммерческой живой вакцине и даже превосходит её.

Заключение. Разработан лабораторный вариант культуральной инактивированной вакцины против ЖЛ, не уступающий по иммуногенности (на модели животных) коммерческой живой вакцине.

strain 17D of yellow fever viruscultural inactivated vaccine against yellow feverlive vaccine against yellow feverVero cell culturepurification of yellow fever virusimmunogenicityBALB/c miceштамм 17D вируса жёлтой лихорадкикультуральная инактивированная вакцина против жёлтой лихорадкиживая вакцина против жёлтой лихорадкикультура клеток Veroочистка вируса жёлтой лихорадкииммуногенностьмыши BALB/c1. Monath T.P., Lee C.K., Julander J.G., Brown A., Beasley D.W., Watts D.M., et al. Inactivated yellow fever 17D vaccine: Development and nonclinical safety, immunogenicity and protective activity. Vaccine. 2010; 28(22): 3827-40. DOI: http://doi.Org/10.1016/j.vaccine.2010.03.0232. Theiler M., Smith H.H. The use of yellow fever virus modified by in vitro cultivation for human immunization. J. Exp. Med. 1937; 65(6): 787-800. DOI: http://doi.org/10.1084/jem.65.6.7873. Yellow fever vaccine - current supply outlook. UNICEF Supply Division; 2016. Available at: https://www.unicef.org/supply/sites/unicef. org.supply/files/2019-06/yellow-fever-vaccine-supply-outlook.pdf4. Whittembury A., Ramirez G., Hernandes H., Ropero A.M., Waterman S., Ticona M., et al. Viscerotropic disease following yellow fever vaccination in Peru. Vaccine. 2009; 27(43): 5974-81. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2009.07.0825. Hayes N.B. Is it time for a new yellow fever vaccine? Vaccine. 2010; 28(51): 8073-6. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2010.10.0156. Pereira R.C., Silva A.N., Souza M.C., Silva M.V., Neves P.P., Silva A.A., et al. An inactivated yellow fever 17DD vaccine cultivated in Vero cell culture. Vaccine. 2015; 33(35): 4261-8. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2015.03.0777. Иванов А.П., Клеблеева Т.Д., Иванова О.Е. Опыт применения IgY-технологии для лабораторной диагностики вирусных инфекций. Вопросы вирусологии. 2020; 65(1): 21-6. DOI: http://doi.org/10.36233/0507-4088-2020-65-1-21-26.8. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 1976; 72(1-2): 248-54. DOI: http://doi.org/10.1006/abio.1976.99999. Ivanov A.P., Bashkirtsev V.N., Tkachenko E.A. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of arenaviruses. Arch. Virol. 1981; 67(1): 71-4. DOI: http://doi.org/10.1007/BF0131460310. Mercier-Delarue S., Durier C., Colin de Verdiere N., Poveda JD., Meiffredy V., Garcia MDF., et al. Screening test for neutralizing antibodies against yellow fever virus, based on flavivirus pseudotype. PLoS One. 2017; 12(5): e0177882. DOI: http://doi.org/10.1371/journal.pone.017788211. Lindsey N.P., Schroeder B.A., Miller E.R., Braun M.M., Hinkley A.F., Marano N., et al. Adverse event reports following yellow fever vaccination. Vaccine. 2008; 26(48): 6077-82. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2008.09.00912. Alexander L.N., Seward J.F., Santibanez T.A., Pallansch M.A., Kew O.M., Prevots D.R., et al. Vaccine policy changes and epidemiology of poliomyelitis in the United States. JAMA. 2004; 292(14): 1696-701. DOI: http://doi.org/10.1001/jama.292.14.1696