Introduction. Fowl adenoviruses (FAdV) are infectious pathogens causing significant economic losses in poultry industry. Molecular, pathoanatomic, and pathomorphological methods are used for laboratory diagnosis of FAdV infection. The clinical picture and postmortem lesions are not sufficient to diagnose, unlike histological analysis. Histological examination reveals basophilic intranuclear inclusion bodies considered a pathognomonic sign of FAdV infection. Despite the informative value of the histological method, it has a limitation – the long duration of the procedure, which ranges from 5 to10 days, or, in some cases, several weeks.
The aim of this study is to conduct a comparative analysis of pathohistological and pathomorphological changes in the liver cells of chicks infected with avian adenovirus type E, and to develop a cytological diagnostic method based on the preparation and staining of smear imprints to detect, under a microscope, specific inclusions in hepatocytes, which are a pathognomonic sign of avian adenovirus infections.
Materials and methods. Liver samples collected from intact and infected with field FAdV-E isolate 13-day-old SPF chicken embryos were used for preparation of histological sections and imprint smears.The imprint smears were stained with azure-eosin for 60 minutes, and conventionally Gram stained. Microscopy was performed in transmitted light at magnifications ranging from ×80 to ×1000.
Results. Characteristic basophilic intranuclear inclusion bodies (large, blue-violet, rounded inclusion bodies) were detected in histological sections. In the Romanowsky–Giemsa stained imprint smears, the inclusion bodies were also detected within the areas of hepatocyte lysis. When Gram staining was used, the basophilic staining of both lymphocyte nuclei and inclusion bodies made their identification difficult.
Conclusion. Microscopy of liver imprint smears stained according to Romanowsky–Giemsa is promising method due to its simplicity, time efficiency, lower reagent and equipment costs.
Введение. Аденовирусы птиц (Fowl adenovirus, FAdV) являются важными инфекционными патогенами, ответственными за значительные экономические потери в птицеводческой отрасли во всем мире. При диагностике аденовирозов птиц, вызванных FAdV, в лабораторных условиях широко используются молекулярно-биологические, патолого-анатомические и патоморфологические методы исследований. Клиническая картина и патолого-анатомические признаки недостаточно специфичны для установления диагноза, в отличие от гистологического анализа. При гистологическом исследовании выявляют внутриядерные базофильные тельца-включения, являющиеся патогномоничным признаком при инфекции, вызванной FAdV. Несмотря на информативность гистологического метода, он имеет ощутимый недостаток, заключающийся в длительном сроке его проведения, который составляет 5–10 сут, в некоторых случаях несколько недель.
Цель исследования – сравнительное изучение патогистологических и патоморфологических изменений в клетках печени цыплят, заражённых аденовирусом птиц вида Е, и разработка цитологического метода диагностики, основанного на приготовлении и окрашивании мазков-отпечатков для обнаружения в гепатоцитах специфических телец-включений при микроскопии, являющихся патогномоничным признаком при аденовирозах птиц.
Материалы и методы. Для приготовления гистологических препаратов и мазков-отпечатков использовали печень от интактных и пораженных полевым изолятом FAdV-E 13-суточных эмбрионов СПФ-кур (свободных от определенных патогенов). Мазки-отпечатки окрашивали азуром и эозином по Романовскому–Гимзе в течение 60 мин, по Граму – общепринятым методом. Микроскопию проводили в проходящем свете при увеличении от ×80 до ×1000.
Результаты. В гистологических препаратах выявлены характерные базофильные внутриядерные тельца-включения (крупные, сине-фиолетовые, округлой формы). В мазках-отпечатках, окрашенных по Романовскому–Гимзе, также обнаружены тельца-включения на месте лизированных гепатоцитов. При окраске по Граму базофильная окраска ядер лимфоцитов и телец-включений затрудняла их идентификацию.
Заключение. Метод микроскопии мазков-отпечатков печени, окрашенных по Романовскому–Гимзе, перспективен благодаря простоте, экономии времени и снижению затрат на реактивы и оборудование.