Introduction. Enterovirus infection, widespread in the world and in Russia, is characterized by a variety of clinical forms, one of which is serous meningitis. The most common cause of enterovirus meningitis in children is echovirus 30 (E30). Previously, we obtained a chimeric protein consisting of the S domain of norovirus VP1 protein(SN), fused into one molecule with VP1 protein of E30 (SN-VP1E30), which in the future can be used to develop a vaccine for the prevention of enterovirus meningitis caused by the E30 virus.
The aim of this work was to study the immunological properties of the SN-VP1E30 protein.
Materials and methods. Balb/c mice and a guinea pig were immunized with the SN-VP1E30 protein. The production of IgG and IgM antibodies was studied by ELISA. The interaction of antibodies against SN-VP1E30 with virions of enteroviruses E30 of different genotypes was studied by electron microscopy. The reaction of neutralization of E30 by antibodies was carried out in vitro in RD cells.
Results. In mice immunized with SN-VP1E30 without adjuvant, the average titers of total antibodies against E30 VP1 protein were 1 : 19,000. The use of adjuvant increased the average titer of antibodies by 3 times. The level of IgM antibodies was significantly lower and amounted to, on average, 1 : 1500. Using immunoelectron microscopy, it was shown that guinea pig antibodies against chimeric SN-VP1E30 are able to bind virions of E30 genotypes h and eC2. Mouse and guinea pig antibodies were able to neutralize E30 in RD cell line. Neutralizing antibody titers in mice varied from 20 to 40, and were 40 in guinea pigs.
Conclusion. The immunogenicity of SN-VP1E30 in two animal species and the ability of antibodies to bind and neutralize enterovirus E30 allows us to propose it as an antigen in a vaccine for the prevention of diseases caused by E30.
Введение. Энтеровирусная инфекция, широко распространенная в мире и в России, характеризуется разнообразием клинических форм, одной из которых является серозный менингит. Наиболее частой причиной энтеровирусного менингита у детей является вирус echovirus 30 (E30). Ранее нами получен химерный белок, состоящий из S-домена белка VP1 норовируса (SN), слитого в одну молекулу с VP1 Е30 (SN-VP1E30), который в перспективе может быть использован для разработки вакцины для профилактики энтеровирусного менингита, вызванного вирусом Е30.
Целью настоящей работы явилось изучение иммунологических свойств белка SN-VP1E30.
Материалы и методы. Мышей линии Balb/c и морскую свинку иммунизировали белком SN-VP1E30. Продукцию антител класса G (IgG) и M (IgM) исследовали методом иммуноферментного анализа. Взаимодействие антител против SN-VP1E30 с вирионами энтеровирусов Е30 разных генотипов изучали методом электронной микроскопии. Реакцию нейтрализации Е30 антителами проводили в культуре клеток RD.
Результаты. У мышей, иммунизированных SN-VP1E30 без адъюванта, средние титры суммарных антител против VP1 E30 составили 1 : 19 000. Использование адъюванта повышало средний титр антител в 3 раза. Уровень IgM был значительно ниже и составил в среднем 1 : 1500. С помощью иммуноэлектронной микроскопии показано, что антитела морской свинки против химерного SN-VP1E30 способны связывать вирионы E30 генотипов h и еС2. Антитела мышей и морской свинки способны нейтрализовать Е30 в культуре клеток RD. У мышей титры нейтрализующих антител варьировали от 20 до 40, у морской свинки составили 40.
Заключение. Иммуногенность SN-VP1E30 у двух видов животных и способность антител связывать и нейтрализовать энтеровирус Е30 позволяет предложить его в качестве антигена в составе вакцины для профилактики заболеваний, вызванных E30.