Problems of VirologyProblems of VirologyВопросы вирусологии0507-40882411-2097Central Research Institute for Epidemiology12236ArticlesСтатьиResearch ArticlePeculiarity of reassortment of current wild type influenza viruses with master donor viruses for live influenza vaccineОсобенности реассортации современных штаммов вируса гриппа с донорами аттенуации живой гриппозной вакцины15102013585VOL 58, NO5 (2013)ТОМ 58, №5 (2013)263109062023Copyright ©; 2013, Kiseleva I.V., Bazhenova E.A., Larionova N.V., Fedorova E.A., Dubrovina I.A., Isakova-Sivak I.N., Rudenko L.G.Copyright ©; 2013, Киселева И.В., Баженова Е.А., Ларионова Н.В., Федорова Е.А., Дубровина И.А., Исакова-Сивак И.Н., Руденко Л.Г.2013Kiseleva I.V., Bazhenova E.A., Larionova N.V., Fedorova E.A., Dubrovina I.A., Isakova-Sivak I.N., Rudenko L.G.Киселева И.В., Баженова Е.А., Ларионова Н.В., Федорова Е.А., Дубровина И.А., Исакова-Сивак И.Н., Руденко Л.Г.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://virusjour.crie.ru/jour/article/view/12236

The live attenuated influenza vaccine (LAiV) currently licensed in Russia consists of the reassortant viruses with hemagglutinin (HA) and neuraminidase (nA) gene segments from the circulating wild-type viruses and the six internal protein-encoding gene segments from cold-adapted master donor viruses (MDV) A/Leningrad/134/17/57 (H2N2) or B/USSR/60/69. Presently, only classical reassortment technique is approved for the generation of Russian LAiV strains. in this work, we describe the obstacles to the development of LAiV 6:2 vaccine strains depending on the phenotypic properties of the wild-type viruses used for reassortment. it was demonstrated that the highest percentage of 6:2 vaccine reassortants could be achieved when wild-type parental viruses were resistant to non-specific gamma-inhibitors. it was shown that it was impossible to generate 6:2 vaccine reassortants possessing six internal genes of the A/Leningrad/134/17/57 (H2N2) master donor virus and avian HA and NA genes from H5N1-PR8 viruses using classical reassortment technique. it was suggested that strong constellation effects between the gene segments of the parental viruses could affect the virus gene reassortment. A strong interaction between the genome segments encoding neuraminidase of avian origin and PB2 gene of PR8 virus was observed. When the PB2 gene was inherited from cold-adapted master donor virus, the neuraminidase was also found to be of MDV origin.

Современные живые гриппозные вакцины представляют собой реассортанты, полученные при скрещивании актуального циркулирующего вируса гриппа с холодоадаптированным донором аттенуации. Два донора аттенуации - А/Ленинград/134/17/57 (H2N2) и В/СССР/60/69 - применяются в России для подготовки вакцинных штаммов живой гриппозной вакцины методами классической реассортации. Вакцинный штамм 6:2 содержит 2 поверхностных антигена - гемагглютинин (HA) и нейраминидазу (NA) от актуального вируса гриппа и 6 генов, кодирующих внутренние белки, - от донора аттенуации. В настоящем исследовании проведен анализ сложностей в подготовке вакцинных штаммов живой гриппозной вакцины, связанных с постоянно меняющимися биологическими свойствами циркулирующих вирусов гриппа. Показано, что наиболее высокий процент получения реассортантных вакцинных штаммов 6:2 достигается, если эпидемические родительские вирусы устойчивы к неспецифическим гамма-ингибиторам. Методами классического скрещивания вирусов H5N1-PR8 с донором аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2) не удалось получить реассортанты 6:2, содержащие HA и NA птичьего происхождения. Это может объясняться особенностями жесткой констелляции генов указанных вирусов. Была выявлена прочная связь между генами PB2/PR8 и птичьей NA, которые всегда наследовались реассортантами вместе. Если же в геном реассортантного вируса включался ген РВ2 донора аттенуации, NA также наследовалась от него.

live influenza vaccinereassortmentgene constellationgene compatibilityживая гриппозная вакцинареассортацияконстелляция геновнесовместимость геновАлександрова Г.И. Применение метода генетической рекомбинации для получения вакцинных штаммов вируса гриппа. Вопросы вирусологии. 1977; 4: 387-95.Kiseleva I.V., Voeten J.T.M., Teley L.C.P., Larionova N.V, Dubrovina I.A., Berdygulova Zh.A. et al. Genome composition analysis of reas-sortant influenza viruses used in seasonal and pandemic live attenuated influenza vaccine. Mol. Gen. Mikrobiol. Virol. 2011; 26 (4): 174-85.Методические указания МУ 3.3.2.1758-03. Методы определения показателей качества иммунобиологических препаратов для профилактики и диагностики гриппа. http://rudoctor.net/medicine/bz-bw/med-amtuh/index.htm.Киселева И.В. Основы аттенуации вируса гриппа: Автореф. дис.. д-ра биол. наук. СПб.; 2001.Киселева И.В., Ларионова Н.В., Литвинова О.М., Иванова В.В., Исакова И.Н., Медведева Т.Е. и др. Изменение признака темпе-ратурочувствительности как отражение эволюционной изменчивости эпидемических штаммов вирусов гриппа. Медицинский академический журнал. 2002; 2 (3): 49-57.Ларионова Н.В., Киселева И.В., Исакова И.Н., Литвинова О.М., Руденко Л.Г. Фенотипические особенности эпидемических штаммов вируса гриппа В разных лет выделения. Вопросы вирусологии. 2006; 5: 38-41.Matrosovich M., Gao P., Kawaoka Y. Molecular mechanisms of serum resistance of human influenza H3N2 virus and their involvement in virus adaptation in a new host. J. Virol. 1998; 72 (8): 6373-80.Gimsa U., Grotzinger I., Gimsa J. Two evolutionary strategies of influenza viruses to escape host non-specific inhibitors: alteration of hemagglutinin or neuraminidase specificity. Virus Res. 1996; 42(1-2): 127-35.Gambaryan A.S., Lomakina N.F., Boravleva E.Y., Kropotkina E.A., Mashin V.V., Krasilnikov I.V et al. Comparative safety, immuno-genicity, and efficacy of several anti-H5N1 influenza experimental vaccines in a mouse and chicken models (Testing of killed and live H5 vaccine). Influenza Other Respi Viruses. 2012; 6 (3): 188-95.Subbarao K., Webster R.G., Kawaoka Y., Murphy B.R. Are there alternative avian influenza viruses for generation of stable attenuated avian-human influenza A reassortant viruses? Virus Res. 1995; 39 (2-3): 105-18.Lind P.E., Burnet F.M. Further studies of recombination between heat-inactivated virus and active virus. Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci. 1957; 35(6): 531-40.Gotlieb T., Hirst G.K. The experimental production of combination forms of virus. VI. Reactivation of influenza viruses after inactivation by ultraviolet light. Virology. 1956; 2(2): 235-48.Найхин А.Н. Противогриппозный иммунитет: отечественный вклад в изучение проблемы и перспективные направления развития исследований. Медицинский академический журнал. 2010; 4(10): 249-55.Смородинцев А.А. Грипп и его профилактика. М.; 1984.Wilschut J.C., McElhaney L.E., Palache A.M., eds. Influenza. Amsterdam: Elsevier; 2006.Gillim-Ross L., Subbarao K. Can immunity induced by the human influenza virus N1 neuraminidase provide some protection from avian influenza H5N1 viruses? PLOS Med. 2007; 4(2): 0226-8.Nayak B., Kumar S., DiNapoli J.M., Paldurai A., Perez D.R., Collins P.L. et al. Contributions of the avian influenza virus HA, NA, and M2 surface proteins to the induction of neutralizing antibodies and protective immunity. J. Virol. 2010; 84(5): 2408-20.