Problems of VirologyProblems of VirologyВопросы вирусологии0507-40882411-2097Central Research Institute for Epidemiology11843ArticlesСтатьиInbuilt of glycoproteins of the Aujeszky disease virus (Suid herpesvirus 1) into the artificial liposomes' membranes and their interaction with cellsВстраивание гликопротеинов вируса болезни Ауески (Suid herpesvirus 1) в мембраны искусственных липосом и их взаимодействие с клетками15042004492NO2 (2004)№2 (2004)323609062023Copyright ©; 2004, Vrublevskaya V.V., Vinokurov M.G., Kholodkov О.A., Kornev A.V., Morenkov O.S.Copyright ©; 2004, Врублевская В.В., Винокуров М.Г., Холодков О.А., Корнев А.В., Моренков О.С.2004Vrublevskaya V.V., Vinokurov M.G., Kholodkov О.A., Kornev A.V., Morenkov O.S.Врублевская В.В., Винокуров М.Г., Холодков О.А., Корнев А.В., Моренков О.С.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://virusjour.crie.ru/jour/article/view/11843

The purpose of the case study was to investigate the interplay between liposomes, containing the in-built glycoproteins of the Aujeszky disease virus (ADV, Suid herpesvirus 1) with plasmatic membranes of sensitive cells. The conditions of reconstructing the ADV glycoproteins into artificial-liposome membranes were optimized. The above liposomes (virosomes), 40 x 200 nm, were impermeable to univalent ions, which confirmed the virosome membranes were intact. The gE and gB glycoproteins (90-98% of them) were located, inside the liposome membrane with the outwards orientation of their ecto-domain fragments. Virosomes were binding with cells in the dosedependent mode. The purified ADV virions, the ADV gB glycoproteins and heparin inhibited such binding process of virosomes with cells, which denoted the specificity of their interaction with cells. An effective internalization of cell-binding virosomes was observed at 37°C. The conclusion is that the ADV glycoproteins, constructed into the liposome membranes, simulate adequately enough the viral receptor structures and that the thus obtained virosomes could be used to investigate the interplay between alpha-herpes viruses and cells.

Целью работы было изучение взаимодействия липосом, содержащих встроенные гликопротеины вируса болезни Ауески (ВБА, Suid herpesvirus 1), с плазматическими мембранами чувствительных клеток. Оптимизированы условия реконструкции гликопротеинов ВБА в мембраны искусственных липосом. Реконструированные липосомы (виросомы) имели размер 40-200 нм и были непроницаемы для одновалентных ионов, что свидетельствовало о целостности мембран виросом. 90-98% гликопротеинов дЕ и дВ ориентировались в мембране липосом эктодоменными фрагментами наружу. Виросомы дозозависимо связывались с клетками. Очищенные вирионы ВБА, гликопротеин дВ ВБА и гепарин ингибировали связывание виросом с клетками, что свидетельствовало о специфичности их взаимодействия с клетками. При 37°С наблюдалась эффективная интернализация связавшихся с клетками виросом. Полученные данные позволили сделать вывод о том, что гликопротеины ВБА, встроенные в мембраны липосом, достаточно адекватно имитируют вирусные рецепторные структуры, и полученные виросомы могут быть использованы для изучения взаимодействия апьфа-герпесвирусов с клетками.

alpha-herpes virusesAujeszky disease virusglycoproteinsreconstructed liposomesinterplay with cellsальфа-герпесвирусывирус болезни Ауескигликопротеиныреконструированные липосомывзаимодействие с клеткамиВинокуров М. Г., Печатников В. А. Эффективная реконструкция Са-АТФазы саркоплазматического ретикулума с Lubrol РХ // Укр. биохим. журн. - 1991. - Т. 63, № 1. - С. 67-71.Моренков О. С., Манцыгин Ю. А., Сергеев В. А. и др. Использование моноклональных антител для определения иммуноферментным методом вируса болезни Ауески в культуральной среде // Вопр. вирусол. - 1994. - Т. 39, № 5. - С. 212-215.Ben-Porat Т., DeMarchi J. M., Kaplan A. S. Characterization of defective interfering viral particles present in a population of pseudorabies virions // Virology. - 1974. - Vol. 61. - P. 29-37.Boyle K. A., Compton T. Receptor-binding properties of a soluble form of human cytomegalovirus glycoprotein В // J. Virol. - 1998. - Vol. 72. - P. 1826-1833.Herold В. С., WuDunn D., Soltys N., Spear P. G. Glycoprotein С of herpes simplex virus type 1 plays a principal role in the absorption of virus to cells and in infectivity // J. Virol. - 1991. - Vol. 65. - P. 1090-1098.Huang R. Т., Wahn К., Klenk H. D., Rott R. Fusion between cell membrane and liposomes containing the glycoproteins of influenza virus // Virology. - 1980. - Vol. 104. - P. 294-302.Johnson D. C., Wittels M., Spear P. G. Binding to cells of virosomes containing herpes simplex virus type 1 glycoproteins and evidence for fusion // J. Virol. - 1984. - Vol. 52. - P. 238-247.Karger A., Mettenleiter Т. С. Glycoprotein gill and gp5 play dominant roles in biphasic attachment of pseudorabies virus // Virology. - 1993. - Vol. 194. - P. 654-664.Li Y., Liang X., van Drunen Littel-van den Hurk S., Babiuk L. A. Characterization of cell-binding properties of bovine herpes virus 1 glycoproteins В, С, and D: identification of dual cell-binding function of gB // J. Virol. - 1995. - Vol. 69. - P. 4758-4768.Lycke Т., Johansson M., Svennerholm В., Lindahl U. Binding of herpes simplex virus to cellular heparan sulfate, an initial step in the adsorption process // J. Gen. Virol. - 1991. - Vol. 72. -P. 1131-1137.Mettenleiter T. C., Zsak L., Zuckermann F. et al. Interaction of glycoprotein gill with a cellular heparin like substance mediates adsorption of pseudorabies virus // J. Virol. - 1990. - Vol. 64. - P. 278-286.Morenkov O. S., Smimov S. V., Vrublevskaya V. V. Isolation of mutants of Aujeszky's disease virus with antigenically altered glycoprotein E by affinity chromatography using monoclonal antibodies // J. Virol. Meth. - 1999. -Vol. 77.-P. 101-108.Roizman В., Spear P. G. Herpes simplex viruses and their replication // Fields Virology / Eds B. N. Fields et al. - 3-rd Ed. - Philadelphia, 1996. - P. 2231-2295.Shieh M.-T., WuDunn D., Montgomery R. I. et al. Cell surface receptors for herpes simplex virus are heparan sulfate proteoglycans // J. Cell Biol. - 1992. - Vol. 116. - P. 1273-1281.Spear P. G. Entry of alphaherpes viruses into cells // Semin. Virol. - 1993. - Vol. 4. - P. 167-180.Stegmann Т., Morselt H. W., Booy F. P. etal. Functional reconstitution of influenza virus envelopes // EMBO J. - 1987. - Vol. 6. - P. 2651-2659.Vrublevskaya V. V., Komev A. N., Smirnov S. V., Morenkov O. S. Cell-binding properties of glycoprotein В of Aujeszky's disease virus // Virus Res. - 2002. - Vol. 86, N 1-2. - P. 7-19.Wittman G. Spread and control of Aujeszky's disease (AD) // Сотр. Immmun. Microbiol. Infect. Dis. - 1991. - Vol. 14. - P. 165-173.