The results of polymerase chain reaction and of DNA sequencing of the Adel2 mutant variant of adenovirus serotype 5, passaged 10 times and capable of selectively infecting and lysing the p53-deficient human tumor cells, are indicative of a high stability of its genotype and of the phenotypic properties acquired by it in successive passage on 293 cells. The absence of admixtures of wild-type adenovirus was clearly shown in the cultivation and passage processes. It was revealed in an experimental analysis of virus-productive properties of the studied continuous cell culture 293 by using the method of multilayer cultivation, that the maximal Adel2 yield is obtained at the 50% cytopathic effect. Virus doses, that are effective for cell-culture contamination, are within a range of 10010 ТСРЕЯ per cell. In order to spare the viral material, the infecting dose of 10 ТСРЕЮ per cell was chosen to infect a cell monolayer.
Результаты ПЦР-анализа и секвенирования ДНК мутантного варианта аденовируса серотипа 5 Adel2, обладающего способностью избирательно инфицировать и лизировать р53-дефектные опухолевые клетки человека и прошедшего 10 пассажей, свидетельствуют о высокой степени стабильности его генотипа и приобретенных фенотипических свойств при последовательном пассировании на клетках 293. При этом в процессе культивирования и пассирования достоверно показано отсутствие примеси аденовируса дикого типа. При экспериментальном изучении вируспродуктивных свойств исследуемой перевиваемой культуры клеток 293 методом монослойного культивирования отмечено, что наибольший урожай Adel2 удается получать при 50% цитопатическом действии на клеточном монослое. Эффективные дозы вируса для заражения культур клеток находятся в диапазоне 100-10 ТЦПДМ на клетку. С целью экономии вирусного материала для наработки вируса выбрана доза заражения клеточного монослоя 10 ТЦПДМ на клетку. Полученные результаты демонстрируют возможность и перспективность использования культуры клеток 293 для производственной наработки мутантного штамма аденовируса Adel2.